Anticuerpo contra klotho-beta para utilizar en el tratamiento de tumores, cáncer o trastornos proliferativos celulares.

Antagonista de KLβ para utilizar en un método de tratamiento de un trastorno asociado con la expresión oactividad de KLβ

, comprendiendo el método administrar una cantidad eficaz del antagonista de KLβ a un individuo,en el que el trastorno es un tumor, un cáncer o un trastorno proliferativo celular, y

en el que el antagonista de KLβ es un anticuerpo contra KLβ.

Anticuerpo contra klotho-beta para utilizar en el tratamiento de tumores, cáncer o trastornos proliferativos celulares.

SOLICITUDES RELACIONADAS

Esta solicitud reivindica prioridad de la solicitud de Patente de Estados Unidos No. De Serie 60/909, 699 presentada el 2 de abril de 2007 y la solicitud de patente de Estados Unidos de No. De Serie 60/916, 187 presentada el 4 de mayo del 2007.

CAMPO DE LA INVENCIÓN

La presente invención se refiere en general a los campos de la biología molecular. Más específicamente, la invención se refiere a los usos de agentes anti-KLº y la detección de KLº y/o FGF 19 y/o FGFR4.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN

Klotho beta ("KLº", "KLB" o "beta klotho") es una proteína transmembrana de 130 kDa de tipo 1 con un dominio intracelular corto (29 aminoácidos) que no tiene una actividad quinasa prevista (Ito et al., Mech. Dev. 98 (2000) 115-119) . KLº tiene dos dominios glicosidasa extracelular que carecen de un residuo de ácido glutámico característico esencial para la actividad enzimática. Los ratones deficientes en Klb (ratones Klb - / -) presentan una expresión de CYP7A1 incrementada y un tamaño disminuido de la vesícula biliar, indicando que los ratones Klb -/ no pueden suprimir más la síntesis de ácido bilizr (Inagaki, T et al (2005) Cell Metab 2:217-25) . La KLº se expresa predominantemente en el hígado y el páncreas. Id. La alteración del gen que codifica KLº en ratones da lugar a incrementos destacados en los niveles de ARNm de la colesterol 7alfa-hidroxilasa (CYP7A1) , la primera enzima limitante de la velocidad en el mecanismo biosintético de los ácidos biliares. Ito et al (2005) J Clin Invest 115 (8) :2202-2208; Arrese et al (2006) Hepatology 43 (1) :191-193; Moschetta y Kliewer (2005) J Clin Invest 115 (8) : 2075-2077.

La familia del factor de crecimiento de fibroblasto (FGF) está compuesta de 22 polipéptidos relacionados estructuralmente que se unen a 4 tirosina quinasas receptoras (FGFR1-4) y un receptor deficiente en quinasa (FGFR5) (Eswarakumar et al (2005) Cytokine Growth Factor Rev 16, 139-149; Omitz et al (2001) Genome Biol 2, REVIEWS3005; Sleeman et al (2001) Gene 271, 171-182) . La interacción de FGF con FGFR1-4 da lugar a una homodimerización y autofosforilación del receptor, el reclutamiento de adaptadores citosólicos, tales como FRS2 y el inicio de mecanismos de señalización múltiples (Powers et al (2000) Endocr Relat Cancer 7, 165-197; Schlessinger,

J. (2004) Science 306, 1506-1507) .

Los FGF y FGFR juegan papeles importantes en el desarrollo y la reparación de tejidos mediante la regulación de la proliferación celular, migración, quimiotaxis, diferenciación, morfogénesis y angiogénesis (Omitz ct al (2001) Genome Biol 2, REVIEWS3005; Augusteet al (2003) Cell Tissue Res 314, 157-166; Steiling et al (2003) Curr Opin Biotechnol 14, 533-537) . Varios FGF y FGFR están asociados con la patogénesis de cánceres de mama, próstata, cuello uterino, estómago y colon (Jeffers et al (2002) Expert Opin Ther Targets 6, 469-482; Mattila et al. (2001) Oncogene 20, 2791-2804; Ruohola et al. (2001) Cancer Res 61, 4229-4237; Marsh et al (1999) Oncogene 18, 1053-1060; Shimokawa et al (2003) Cancer Res 63, 6116-6120; Jang (2001) Cancer Res 61, 3541-3543; Cappellen (1999) Nat Genet 23, 18-20; Gowardhan (2005) Br J Cancer 92, 320-327) .

El FGF19 es un miembro de los más distantes de las siete subfamilias de los FGF. El FGF19 es un ligando de alta afinidad de FGFR4 (Xie et al (1999) Cytokine 11:729-735) . El FGF19 se secreta normalmente por el epitelio biliar e intestinal. El FGF19 juega un papel en la homeóstasis del colesterol mediante la represión de la expresión hepàtica de la colesterol-7-a-hidroxilasa 1 (Cyp7a1) , la enzima limitante de la velocidad para la síntesis del colesterol y ácidos biliares (Gutierrez et al (2006) Arterioscler Thromb Vasc Biol 26, 301-306; Yu et al (2000) J Biol Chem 275, 15482-15489; Holt, JA, et al. (2003) Genes Dev 17 (130) :158) . La expresión ectópica de FGF19 en un modelo de ratón transgénico incrementa la proliferación de hepatocitos, induce la displasia hepatocelular y da lugar a neoplasia en 10 meses de edad (Nicholes et al. (2002) . Am J Pathol 160, 2295-2307) . Se cree que el mecanismo del carcinoma hepatocelular inducido por FGF19 implica la interacción con FGFR4. La sobreexpresión de FGF19 en tejidos de tumores se describen la solicitud de patente de Estados Unidos en trámite de titularidad compartida de número de serie 11/673, 411 (presentada el 9 de febrero de 2007) . Los ratones transgénicos que expresan ectópicamente FGF19 pesan menos que sus miembros de la camada de tipo natural, debido en parte a la disminución en tejido adiposo blanco. Tomlinson, E et al. (2002) Endocrinology 143:1741-1747. Aunque los ratones transgénicos de FGF19 presentan una mayor ingesta de comimda, también presentan una tasa metabólica más que elevada que es independiente de los incrementos en los niveles de leptina, IGF-1, hormona del crecimiento u hormona tiroides. De manera similar, el tratamiento con FGF-19 incrementaba la tasa metabólica e invertía la diabetes dietética y deficiente de leptina. La adminsitración de FGF 19 mejoró la tolerancia a la glucosa y disminuyó la insulina en suero, leptina, colesterol y triglicéridos. Fu et al (2004) 145:2594-2603. La administración de FGF19 recombinante a ratones ob/ob, o el cruzamiento de los ratones transgénicos de FGF19 sobre la base de ob/ob dio lugar a ratones que pesaban menos y presentaban niveles de glucosa en suero menores y mejoraba ka sensibilidad de la glucosa en comparación con ratones ob/ob. Id. El FGF-19 también se describe en, por ejemplo, Harmer et al (2004) Biochemistr y 43:629-640.

La expresión de FGFR4 está ampliamente distribuida y se describió en el desarrollo de músculos esqueléticos, hígado, pulmón, páncreas, glándulas adrenales, riñón y cerebro (Kan et al. (1999) J Biol Chem 274, 15947-15952; Nicholes et al. (2002) . Am J Pathol 160, 2295-2307; Ozawa et al. (1996) Brain Res Mol Brain Res 41, 279-288; Stark et al (1991) Development 113, 641-651) . La amplificación de FGFR4 se describió en adenocarcinomas mamarios y de ovario (Jaakkola et al (1993) Int J Cancer 54, 378-382) . La mutación y el truncamiento de FGFR4 se correlacionaban con el tumor y en algunos casos el pronóstico de adenocarcinomas de próstata y pulmón, carcinoma de célula escamosa de cabeza y cuello, sarcoma de tejido blando, astrocitoma y adenomas pituitarios (Jaakkola et al (1993) Int J Cancer 54, 378-382; Morimoto (2003) Cancer 98, 2245-2250; Qian (2004) J Clin Endocrinol Metab 89, 1904-1911; Spinola et al. (2005) J Clin Oncol 23, 7307-7311; Streit et al (2004) Int J Cancer 111, 213-217; Wang (1994) Mol Cell Biol 14, 181-188; Yamada (2002) Neurol Res 24, 244-248) . La sobreexpresión de FGFR4 en tejidos de tumores se describe en WO2007/13693.

Está claro que existe de forma continua la necesidad de agentes que tienen características clínicas que son óptimas para el desarrollo como agentes terapéuticos. La invención aquí descrita cumple esta necesidad y proporciona otras ventajas.

DESCRIPCIÓN RESUMIDA DE LA INVENCIÓN

En el presente documento se demuestra que el FGF19 requiere que la KLº se una a FGFR4, la señalización cascada abajo de FGFR4 y la modulación génica cascada abajo. De este modo, se muestra que la KLº y su interacción con FGFR puede ser una diana única y ventajosa para un mayor ajuste en el diseño de estrategias profilácticas y/o terapéuticas contra condiciones patológicas asociadas con la señalización anormal o no deseada del mecanismo de FGF/FGFR. De este modo, la memoria proporciona métodos, composiciones, kits y artículos de fabricación para identificar y utilizar sustancias que son capaces de modular los mecanismos de FGF/FGFR a través de la modulación de la unión de KLº a FGFR y la modulación de la unión de KLº a FGFs, y para la modulación de actividades biológicas/fisiológicas asociadas con la señalización de FGF/FGFR. La KLº se presenta como una diana terapéutica importante y ventajosa y la invención también proporciona composiciones y métodos basados en la unión de KLº. Los agentes de unión a KLº, tal como se describen aquí, proporcionan importantes agentes terapéuticos y de diagnóstico para utilizar en el reconocimiento de condiciones patológicas asociadas con la expresión y/o actividad de los mecanismos de KLº-FGF-FGFR.

En un aspecto, la memoria proporciona métodos, composiciones, kits y artículos de fabricación relacionados con la unión a KLº y la detección de la unión a KL y/o FGF19 y/o FGFR4.

En un aspecto, la presente memoria proporciona métodos y composiciones útiles para la modulación de estados patológicos... [Seguir leyendo]

1. Antagonista de KLº para utilizar en un método de tratamiento de un trastorno asociado con la expresión o actividad de KLº, comprendiendo el método administrar una cantidad eficaz del antagonista de KLº a un individuo, en el que el trastorno es un tumor, un cáncer o un trastorno proliferativo celular, y en el que el antagonista de KLº es un anticuerpo contra KL.

2. Utilización de un antagonista de KLº en la preparación de un medicamento para utilizar en un método de tratamiento de un trastorno asociado con la expresión o actividad de KLº comprendiendo el método administrar una cantidad eficaz del antagonista de KLº a un individuo, en el que el trastorno es un tumor, un cáncer o un trastorno proliferativo celular, y en el que el antagonista de KLº es un anticuerpo contra KL.

3. Antagonista de KLº para utilizar, según la reivindicación 1, o utilización, según la reivindicación 2, en el que el tumor, cáncer o trastorno proliferativo celular es carcinoma hepatocelular, cáncer pancreático, cáncer de pulmón de célula no pequeña, cáncer de mama, o cáncer colorrectal.

4. Antagonista de KLº para utilizar o utilización, según cualquiera de las reivindicaciones 1-3, en el que el método comprende además administrar al individuo una cantidad eficaz de un segundo medicamento, en el que el antagonista de KLº es un primer medicamento.

5. Antagonista de KLº para utilizar o utilización, según la reivindicación 4, en el que el segundo medicamento es un anticuerpo, un agente quimioterapéutico, un agente citotóxico, un agente antiangiogénico, un agente inmunosupresor, un profármaco, una citoquina, un antagonista de citoquina, radioterapia citotóxica, un corticosteroide, un antiemético, una vacuna contra el cáncer, un analgésico o un agente inhibidor del crecimiento.

6. Antagonista de KLº para utilizar o utilización, según la reivindicación 5, en el que el segundo medicamento es tamoxifeno, letrozol, exemestano, anastrozol, irinotecan, cetuximab, fulvestrant, vinorelbina, erlotinib, bevacizumab, vincristina, imatinib, sorafenib, lapatinib, o trastuzumab.

7. Antagonista de KLº para utilizar o utilización, según la reivindicación 4, en el que el segundo medicamento se administra antes, simultáneamente o posteriormente a la administración del antagonista de KL.

8. Antagonista de KLº para utilizar, según la reivindicación 1, o utilización, según la reivindicación 2, en el que el anticuerpo contra KLº es un anticuerpo monoclonal, un anticuerpo quimérico, un anticuerpo humanizado, un anticuerpo madurado por afinidad, un anticuerpo humano o un anticuerpo biespecífico.

9. Antagonista de KLº para utilizar, según la reivindicación 1, o utilización, según la reivindicación 2, en el que el anticuerpo contra KLº es un fragmento de anticuerpo.

10. Antagonista de KLº para utilizar, según la reivindicación 1, o utilización, según la reivindicación 2, en el que el anticuerpo contra KLº es un inmunoconjugado.

11. Antagonista de KLº para utilizar o utilización, según cualquiera de las reivindicaciones 1-10, en el que además una muestra biológica del individuo expresa (i) KLº, (ii) KLº y FGF, (iii) KL y FGFR, opcionalmente FGFR4, o (iv) KLº, FGF y FGFR, opcionalmente KLº, FGF 19 y FGFR4.

12. Método de identificación de una sustancia inhibidora candidata que inhibe la unión de KLº a FGFR4, comprendiendo dicho método:

(a) poner en contacto una sustancia candidata con una primera muestra que comprende FGFR4, FGF 19 y KL º, y

(b) comparar la cantidad de actividad biológica de FGFR4 en la muestra con una cantidad de actividad biológica de FGFR4 en una muestra de referencia que comprende cantidades similares de KLº, FGF19 y FGFR4 como primera muestra, pero que no ha estado en contacto con dicha sustancia candidata, mediante lo cual una disminución en la cantidad de actividad biológica de FGFR4 en la primera muestra en comparación con la muestra de referencia indica que la sustancia candidata es capaz de inhibir la unión de KLº a FGFR4.

13. Método de determinación de si una sustancia candidata induce la actividad biológica de KL º, comprendiendo dicho método:

(a) poner en contacto una sustancia candidata con una primera muestra que comprende FGFR y KL º, y (b) comparar la cantidad de actividad biológica de FGFR en la muestra con una cantidad de actividad biológica de FGFR en una muestra de referencia que comprende cantidades similares de KL y FGFR como primera muestra, pero que no ha estado en contacto con dicha sustancia candidata, mediante lo cual un incremento en la cantidad de actividad biológica de FGFR en la primera muestra en comparación con la muestra de referencia indica que la sustancia candidata es capaz de inducir la unión de KLº a FGFR.