Uso de un complejo de lípido-agente activo que comprende el agente activo y que comprende además al menosun ligando de direccionamiento en la superficie externa del complejo de lípido-agente activo que se une a ungrupo/familia de marcadores en la superficie de una célula reservorio para la preparación de una composiciónfarmacéutica para la prevención o el tratamiento de una infección provocada por un agente infeccioso,

o para laprevención o el tratamiento de una enfermedad crónica degenerativa o maligna no infecciosa, en el que dicholigando de direccionamiento es fucosa, polifucosa o un derivado de polifucosa, en el que la célula reservorio es unacélula dendrítica, una célula precursora asociada al linaje mieloide premonocítico, un monocito, un macrófago o unacélula T, y en el que la composición farmacéutica es para su administración por una vía transvascular, una víasubcutánea, una vía intradérmica, una vía dirigida a la médula ósea, una vía intraplacentaria, una vía intrauterina,vía intrahepática, una vía intraperitoneal o una vía parenteral.

Liposomas derivatizados con hidratos de carbono para la selección como diana de dominios de reconocimiento de hidratos de carbono celulares de lectinas CTL/CTLD, y suministro intracelular de compuestos terapéuticamente activos

Antecedentes de la invención

1. Campo de la Invención

La presente invención se refiere a las técnicas médicas, y en particular, al suministro liposómico dirigido de agentes activos.

2. Discusión de la técnica relacionada

I. Enfermedades infecciosas crónicas: VIH/SIDA y otras enfermedades infecciosas

Los agentes infecciosos llaman a la acción a un sistema inmunitario. En un sistema avanzado evolutivamente tal como el de un ser humano o un animal vertebrado, esto implica normalmente que se active la inmunidad específica de antígeno, y se conforme en y se dirija contra, el invasor. En este sentido, las células presentadoras de antígenos profesionales (CPA) son las primeras células inmunitarias que reconocen y procesan el agente infeccioso, de modo que inician respuestas específicas de antígeno primarias. Tal como se comenta en el presente documento, tales CPA también portan receptores de lectinas CRD que se unen (e internalizan) al invasor. Por una parte, tal acoplamiento es un medio poderoso para ayudar a que una CPA conforme la respuesta protectora requerida; por otra parte, un patógeno también puede aprovecharse de este mecanismo en beneficio propio.

En el sentido específico comentado en el presente documento, esto puede significar que el agente infeccioso utiliza el receptor integrador para entrar en la CPA, paraliza o dirige erróneamente las funciones reguladoras del sistema inmunitario de las CPA, y reside además dentro de compartimentos intracitoplasmáticos, tales como endosomas, en forma intacta. Una CPA de este tipo, normalmente ubicada dentro de un órgano linfoide, se acopla físicamente de manera continua por multitud de células T que solicitan instrucciones. Esto significa que una célula T, una vez que establece contacto, corre un alto riesgo de llegar a infectarse por patógenos liberados desde la CPA. En esencia, esta es la naturaleza de un reservorio de patógenos (es decir, en el ejemplo de una CPA como célula reservorio) .

En efecto, puesto que las CPA presentan determinadas partículas procesadas del agente en su superficie, parece muy probable que una CPA alterada por un agente de formación de reservorio se acoplará, con probabilidad aumentada, por células T específicas para este agente. Como consecuencia, podría esperarse además que tales células T llegasen a infectarse más probablemente y, como en el caso de enfermedad por VIH, se destruyeran más frecuentemente. En efecto, Douek y colaboradores han mostrado que las células T cooperadoras de memoria específicas de VIH contienen más ADN proviral de VIH que aquellas células de memoria no específicas para VIH (Douek, D.C. et al. HIV preferentially infects HIV-specific CD4+ T cells. Nature 2002; 417:95-8) . Estos resultados destacan que el mayor peligro de un reservorio de patógenos, además de establecer un estado crónico de enfermedad, pueden ser la desactivación completa de la inmunidad protectora frente al invasor. Esto puede ser mortal.

Según el conocimiento actual, las CPA profesionales comprenden cuatro clases principales de células, es decir, (i) células dendríticas mieloides (CDm) ; (ii) células dendríticas plasmocitoides (CDp) ; (iii) células dendríticas foliculares (CDF) ; y (iv) macrófagos (MF) . En el organismo de mamíferos, estas células se ubican tanto en órganos como tejidos no linfoides (determinados subconjuntos de CDm inmaduras; determinados subconjuntos de CDp; y determinados subconjuntos de MF) , así como tejidos y órganos linfoides (determinados subconjuntos de CDm maduras [también denominadas CD interdigitantes, o CDI]; determinados subconjuntos de CDp; determinados subconjuntos de MF; y CDF) (Imai Y, Yamakawa M, Kasajima T. The lymphocyte-dendritic cell system. Histol Histopathol 1998; 13:469-510; y Cella M, Jarrossay D, Facchetti F, Alebardi O, Nakajima H, Lanzavecchia A, Colonna M. Plasmacytoid monocytes migrate to inflamed lymph nodes and produce large amounts of type I interferon. Nat Med 1999; 5:919-23) .

Entre las CPA profesionales, las CDm son los estimuladores más potentes de inmunidad específica de antígeno, y también tienen la capacidad única para inducir respuestas inmunitarias humorales y celulares primarias (por ejemplo, en la mucosa intestinal, tal como se revisa en Telemo E, Korotkova M, Hanson LA. Antigen presentation and processing in the intestinal mucosa and lymphocyte homing. Ann Allergy Asthma Immunol 2003; 90 (Supl. 3) :2833, o en el microentorno del ojo Novak N, Siepmann K, Zierhut M, Bieber T. The good, the bad and the ugly – APCs of the eye. Trends Immunol 2003; 24:570-4) .

En cuanto a los MF, la presentación de antígenos es una de las varias funciones de estas células. Los MF pueden desencadenar respuestas específicas de antígeno secundarias iniciadas con más antelación por las CDm (tales como, por ejemplo, en el cerebro, tal como se revisa en Thomas WE. Brain macrophages: on the role of pericytes and perivascular cells. Brain Res Brain Res Rev 1999; 31:42-57) .

La principal función conocida de las CDp es producir potentes interferones de tipo I antivirales (Cella M, Jarrossay D, Facchetti F, Alebardi O, Nakajima H, Lanzavecchia A, Colonna M. Plasmacytoid monocytes migrate to inflamed lymph nodes and produce large amounts of type I interferon. Nat Med 1999; 5:919-23) .

Finalmente, al menos en condiciones sanas, la presencia de las CDF se limita estrictamente a los folículos dentro de tejidos y órganos linfoides en los que instruyen a células B para la producción de inmunoglobulinas específicas de antígeno. De manera importante, las CDF proporcionan una potente memoria a largo plazo para antígenos, o patógenos intactos completos tales como virus, reteniendo estas estructuras dentro de sus abundantes proyecciones citoplasmáticas (revisado en van Nierop K, de Groot C. Human follicular dendritic cells: function, origin and development. Semin Immunol 2002; 14:251-7) .

Es digno de mención que las CDm y los MF median la inmunidad de células T (o celular) y su memoria (Steinman RM. The dendritic cell system and its role in immunogeneicity. Annu Rev Immunol 1991; 9:271-96; y Banchereau J, Paczesny S, Blanco P et. al. Dendritic cells: controllers of the immune system and a new promise for immunotherapy. Ann N Y Acad Sci 2003; 987:180-7) , mientras que las CDF realizan la inmunidad de células B (o humoral) y su memoria (Burton G F, Conrad DH, Szakal AK, Tew JG. Follicular dendritic cells (FDC) and B cell co-stimulation. J Immunol 1993; 150:31; y Qin D, Wu J, Carroll MC, Burton GF, Szakal AK, Tew JG. Evidence for an important interaction between a complement-derived CD21 ligand on follicular dendritic cells and CD21 on B cells in the initiation of IgG responses. J. Immunol 1988; 161:4549) .

En el contexto de la invención descrita en el presente documento ha de hacerse hincapié en que las CPA profesionales pueden proporcionar un reservorio a largo plazo para agentes infecciosos, tales como el virus de la inmunodeficiencia humana 1 (VIH) , el virus de la hepatitis C (VHC) y bacterias persistentes de manera intracelular, tales como Mycobacterium tuberculosis (Cambi A, Figdor CG. Dual function of C-type lectin-like receptors in the immune system. Curr Opin Cell Biol 2003; 15:539-46; y Kaufmann SHE, Schaible UE. A Dangerous liaison between two major killers: Mycobacterium tuberculosis and HIV target dendritic cells through DC-SIGN. J Exp Med 2003; 197; 1-5) . Además, tras la infección, también pueden establecerse reservorios de patógenos latentes similares en linfocitos T distintos de las CPA, tales como de memoria, en reposo y/o senescentes (Voehringer D, Blaser C, Brawand P, Raulet DH, Hanke T, Pircher H. Viral infections induce abundant numbers of senescent CD8 T cells. J Immunol 2001; 167:4838-43; Douek, D.C. et al. HIV preferentially infects HIV-specific CD4+ T cells. Nature 2002; 417:95-8) .

Por definición, diversos términos, es decir, reservorio, santuario, latencia y dormancia, se utilizan actualmente en la bibliografía para describir el fenómeno patológico de que pueden almacenarse agentes infecciosos intactos durante tiempos indefinidos en células y sitios anatómicos diferenciados (por ejemplo, Schrager LK, D’Souza MP. Cellular and anatomical reservoirs of HIV-1 in patients receiving potent antiretroviral combination therapy. JAMA 1998; 280:67-71;... [Seguir leyendo]

1. Uso de un complejo de lípido-agente activo que comprende el agente activo y que comprende además al menos un ligando de direccionamiento en la superficie externa del complejo de lípido-agente activo que se une a un grupo/familia de marcadores en la superficie de una célula reservorio para la preparación de una composición farmacéutica para la prevención o el tratamiento de una infección provocada por un agente infeccioso, o para la prevención o el tratamiento de una enfermedad crónica degenerativa o maligna no infecciosa, en el que dicho ligando de direccionamiento es fucosa, polifucosa o un derivado de polifucosa, en el que la célula reservorio es una célula dendrítica, una célula precursora asociada al linaje mieloide premonocítico, un monocito, un macrófago o una célula T, y en el que la composición farmacéutica es para su administración por una vía transvascular, una vía subcutánea, una vía intradérmica, una vía dirigida a la médula ósea, una vía intraplacentaria, una vía intrauterina, vía intrahepática, una vía intraperitoneal o una vía parenteral.

2. Uso según la reivindicación 1, en el que el agente infeccioso es un virus, bacteria, hongo o protozoo.

3. Uso según la reivindicación 2, en el que el virus se selecciona del grupo que consiste en VIH-I, VIH-2, VHC, CMV, VHS, VEB, VPH, virus influenza y virus del Ébola.

4. Uso según la reivindicación 2, en el que la bacteria se selecciona del grupo que consiste en Mycobacterium tuberculosis y Mycobacterium spec.

5. Uso según la reivindicación 2, en el que el protozoo se selecciona del grupo que consiste en Leishmania amastigotes y las fases de maduración diferenciadas del ciclo de vida de Plasmodium.

6. Uso según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, en el que el complejo de lípido-agente activo es un complejo de agente activo frente a liposomas.

7. Uso según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, en el que el agente activo es una lectina vegetal, un fármaco antiviral, un fármaco anti-VIH, un fármaco anticancerígeno, un agente citotóxico, un inhibidor de la apoptosis, un fármaco antifúngico, un fármaco antibacteriano o un agente inmunomodulador.

8. Uso según la reivindicación 7, en el que el agente activo es indinavir, saquinavir, nelfinavir, o tenofovir disoproxil fumarato.

9. Uso según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8, en el que el complejo de lípido-agente activo comprende además uno o más agente activos secundarios.

10. Uso según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8, en el que el complejo de lípido-agente activo comprende además uno o más factores auxiliares, siendo los factores auxiliares cationes bivalentes, coenzimas, activadores de enzima o agentes de modificación del pH.

11. Uso según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, en el que el agente activo es un ARN de interferencia pequeño (ARNip) .

12. Uso según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, en el que el agente activo es un ARN sentido o uno antisentido.

13. Uso según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, en el que el agente activo es un vector de expresión adecuado para vacunación mediada por células dendríticas, tal como vacunación tumoral.

14. Uso según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, en el que el agente activo es una proteína o péptido procesado previamente adecuado para vacunación mediada por células dendríticas, tal como vacunación tumoral.

15. Uso según la reivindicación 7, en el que el agente inmunomodulador es un agente inmunosupresor o inmunoactivante.

16. Uso según la reivindicación 6, en el que el agente activo se encapsula en el liposoma del complejo de agente activo frente a liposomas.

17. Uso según la reivindicación 1, en el que la administración por la vía intrahepática es mediante infusión en la arteria hepática.

18. Uso según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 17, en el que la célula dendrítica es una célula dendrítica mieloide, una célula dendrítica folicular o una célula dendrítica plasmocitoide.

19. Uso según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 17, en el que la célula T es una célula T cooperadora

CD4+, una célula T de memoria CD4+, una célula T de memoria CD8+ o una célula T reguladora CD4+.

20. Uso según la reivindicación 7, en el que la lectina vegetal es Con-A o MHL.

21. Uso según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 20, en el que el derivado de polifucosa es un derivado de fucosil-colesterol.

22. Uso según la reivindicación 20, en el que el complejo de lípido-lectina vegetal comprende además Ca2+ y iones de metales de transición.

23. Uso según una cualquiera de las reivindicaciones 20 a 22, en el que la MHL es una variante dimérica o multimérica de MHL.

24. Uso según una cualquiera de las reivindicaciones 7 a 23, en el que el complejo de lípido-lectina vegetal comprende una razón de lípido con respecto a lectina vegetal de entre 5:1 y 7:1.

25. Uso según una cualquiera de las reivindicaciones 7 a 24, en el que el complejo de lípido-lectina vegetal tiene entr.

3. 250 nm de diámetro.

26. Uso según la reivindicación 1, en el que el complejo de lípido-agente activo es un complejo de liposoma-lectina vegetal, en el que la superficie externa del liposoma comprende un derivado de fucosa y en el que el agente infeccioso es VIH.

27. Uso según la reivindicación 26, en el que la fucosa es Fuc-4C-Col.

28. Uso según la reivindicación 26 ó 27, en el que la lectina vegetal es Con-A.

29. Uso según una cualquiera de las reivindicaciones 26 a 28, en el que la composición farmacéutica es para su administración por una vía subcutánea.

30. Uso según la reivindicación 27, en el que la lectina vegetal es Con-A y en el que la superficie externa del liposoma comprende un Fuc-4C-Col.

31. Complejo de lípido-agente activo adecuado para un suministro dirigido de un agente activo a una célula reservorio para su uso en un método de prevención o tratamiento de una infección provocada por un agente infeccioso, o prevención o tratamiento de una enfermedad crónica degenerativa o maligna no infecciosa, en el que dicho complejo de lípido-agente activo comprende el agente activo, y comprende además un ligando de direccionamiento en la superficie externa del complejo de lípido-agente activo, en el que dicho ligando de direccionamiento es fucosa, polifucosa o un derivado de polifucosa, en el que la célula reservorio es una célula dendrítica, una célula precursora asociada al linaje mieloide premonocítico, un monocito, un macrófago o una célula T, y en el que el complejo de lípido-agente activo es para su administración por una vía transvascular, una vía subcutánea, una vía intradérmica, una vía dirigida a la médula ósea, una vía intraplacentaria, una vía intrauterina, vía intrahepática, una vía intraperitoneal o una vía parenteral.

32. Complejo de lípido-agente activo para su uso según la reivindicación 31, siendo el complejo de lípido-agente activo un complejo de agente activo frente a liposomas.

33. Complejo de lípido-agente activo para su uso según la reivindicación 32, en el que el agente activo es una lectina vegetal.

34. Complejo de lípido-agente activo para su uso según la reivindicación 33, en el que la lectina vegetal es Con-A o MHL.

35. Complejo de lípido-agente activo para el uso según una cualquiera de las reivindicaciones 32 a 34, en el que el complejo de agente activo frente a liposomas comprende además Ca e iones de metales de transición.

36. Complejo de lípido-agente activo para el uso según una cualquiera de las reivindicaciones 31 a 35, en el que el complejo de agente activo frente a liposomas comprende además uno o más factores auxiliares, siendo los factores auxiliares cationes bivalentes, coenzimas, activadores de enzima o agentes de modificación del pH.

37. Complejo de lípido-agente activo para el uso según una cualquiera de las reivindicaciones 31 a 36, en el que el complejo de agente activo frente a liposomas comprende una razón de lípido con respecto a agente activo de entre

5:1 y 7:1, 3:1 y 10:1 o 3:1 y 100:1.

38. Complejo de lípido-agente activo para el uso según una cualquiera de las reivindicaciones 31 a 37, en el que el complejo de agente activo frente a liposomas tiene entr.

3. 250 nm de diámetro.