Fragmentos de enlace de antigeno de un anticuerpo para utilizar en el tratamiento y diagnóstico de enfermedades oculares.

Un fragmento de enlace del antígeno HSV completamente humano de un anticuerpo que incluye una secuenciacon 90 % de homología con la SEQ ID NO:

3 o SEQ ID NO:4 para utilizar en el tratamiento o diagnóstico de unaenfermedad ocular por administración tópica.

Fragmentos de enlace de antígeno de un anticuerpo para utilizar en el tratamiento y diagnóstico de enfermedades oculares La presente invención se relaciona con el uso de fragmentos de enlace de antígeno de un anticuerpo para la fabricación de un medicamento para el tratamiento o diagnóstico de una enfermedad ocular mediante administración tópica.

Estado de la técnica

HSV es un virus de ADN que comúnmente afecta los humanos. La infección ocurre por el contacto directo de la piel

o la membrana mucosa con lesiones o secreciones cargadas con el virus. HSV del tipo 1 (HSV-1) es principalmente responsable de infecciones oculares y orofaciales, mientras que el HSV del tipo 2 (HSV-2) generalmente se transmite sexualmente y causa enfermedad genital. HSV-2 puede infectar los ojos por medio de contacto orofacial con lesiones genitales y ocasionalmente se transmite a los recién nacidos a su paso a través del canal del parto de una madre con infección HSV-2 genital.

La infección primaria de HSV-1 ocurre más comúnmente en la distribución monocutánea del nervio trigeminal. Por lo general es asintomático pero se puede manifestar como una infección del tracto respiratorio superior no-específico. Después de la infección primaria, el virus se propaga de las células epiteliales infectadas a los terminales nerviosas sensoriales cercanos y se transporta entre el axón nervioso al cuerpo celular localizado en el ganglio trigeminal. Ahí, el genoma del virus entra al núcleo de una neurona, donde este persiste indefinidamente en un estado latente. La infección primaria de cualquiera de los 3 ramas (i.e. oftálmica, maxilar, mandibular) del nervio cranial V puede conducir a infección latente de células nerviosas en el ganglio trigémino. La propagación interneural de HSV dentro del ganglio permite que los pacientes desarrollen posteriormente una enfermedad ocular sin haber tenido la infección de HSV ocular primaria.

La infección de HSV ocular recurrente tradicionalmente se ha considerado como la reactivación del virus en el ganglio trigémino, que migra abajo del axón del nervio para producir una infección lítica en el tejido ocular. La evidencia sugiere que el virus también puede subsistir latentemente dentro del tejido corneal, sirviendo como otra fuente potencial de enfermedad recurrente y causando enfermedad de HSV derivada del donante en córneas trasplantadas.

La infección por HSV es masiva, con un estimado de un tercio de la población en el mundo que sufre de infecciones recurrentes. Solo en los Estados Unidos, aproximadamente 20, 000 nuevos casos de HSV ocular y más de 28, 000 reactivaciones ocurren anualmente.

Las infecciones por virus del herpes simplex de los ojos son la principal causa de ceguera debido a la enfermedad infecciosa en países desarrollados.

Las infecciones por virus del herpes simplex de los ojos en particular, se pueden dividir en 4 categorías: queratitis epitelial infecciosa, queratopatía neurotrófica, queratitis estromal, y endotelitis.

El diagnóstico por lo general se hace por motivos clínicos sobre la base de rasgos característicos de la lesión de la córnea y por exclusión. Los estudios de laboratorio pueden ayudar a confirmar la suposición clínica en los casos que carecen de hallazgos típicos, pero no son fácilmente disponibles en la mayoría de entornos clínicos. Los raspados epiteliales con tinción de Giemsa pueden mostrar células multinucleadas gigantes, que resultan de la coalescencia de las células epiteliales de la córnea infectadas e inclusiones virales intranucleares. Sin embargo, los resultados negativos de la citología no excluyen la infección por HSV. Los cultivos virales tienen una buena sensibilidad pero toman varios días en alcanzar un resultado. Las pruebas de detección del antígeno de HSV, tales como el sistema del virus ligado de enzima (ELVIS) , son específicas pero se limitan por su baja sensibilidad. El cultivo celular para la confirmación de HSV, por lo tanto es en cualquier caso recomendado cuando el resultado de la prueba de ELVIS es negativo de nuevo, lo que conduce a un procedimiento que consume tiempo. La reacción en cadena de la polimerasa utilizando muestras de lágrima, epitelio de la córnea, epitelio de la córnea, o botones cornéales pueden detectar ADN viral en casos de queratitis herpética o queratouveitis. Sin embargo, no distingue entre las infecciones por HSV activas o latentes. El diagnóstico es especialmente difícil en el caso de endotelitis disciforme o enfermedad estromal, como las partículas del virus por lo general no se encuentran en muestras de biopsias estromales y por lo tanto se pueden obtener sin cultivo.

En cuanto al tratamiento se refiere, a pesar de la disponibilidad de antivirales para terapia, esta enfermedad sigue siendo un problema significante. En Europa, el ungüento "Zovirax" (aciclovir) se aprueba para tratar infecciones oculares (aunque la aparición de cepas resistentes al fármaco es motivo de preocupación) . El daño de la córnea no se impide por el aciclovir. En los Estados Unidos, "Viroptic" (solución acuosa de trifluorotimidina al 1%) es el único fármaco aprobado para estas infecciones. Tanto el aciclovir como la trifluorotimidina han reducido la eficacia contra la enfermedad recurrente, que es la causa usual de la turbidez de la córnea que conduce a la ceguera. Efectos secundarios significantes pueden ocurrir con el uso de ambas preparaciones y debido a las formulaciones, existen problemas con la conformidad del paciente. Es evidente, que se necesitan estrategias de diagnóstico o terapéuticas mejoradas para enfermedades oculares por HSV.

Los anticuerpos se utilizan cada vez en diagnósticos y terapéuticos de varias enfermedades. El uso de anticuerpos sería extremadamente ventajoso en el diagnóstico y tratamiento de enfermedades tales como aquellas descritas anteriormente donde el tratamiento alternativo es altamente insatisfactorio.

Los anticuerpos se pueden administrar sistémicamente, aunque pueden causar serios efectos secundarios sistémicos cuando las concentraciones terapéuticas se alcanzan en el sitio de infección.

La administración tópica de los anticuerpos para modular las condiciones inmunopatológicas de la córnea o segmento anterior, sería ventajosa para evitar estos efectos secundarios, pero no es efectiva ya que los anticuerpos completos son muy grandes para penetrar rápidamente la córnea (Allansmith M, de Ramus A, Maurice D. The dynamics of IgG in the cornea. Invest Ophthalmol Vis Sci 1979; 18:947-55) .

Es un objeto de la presente invención proveer el uso de un fragmento de enlace completamente humano del antígeno de un anticuerpo que tiene una secuencia con al menos 90 % de homología con SEQ ID NO:3 y/o SEQ ID NO:4 para la fabricación de un medicamento para el tratamiento o diagnóstico de una enfermedad ocular por administración tópica.

Es otro objeto de la presente invención proveer el uso de un fragmento de enlace completamente humano del antígeno de un anticuerpo que tiene una secuencia con al menos 90 % de homología con SEQ ID NO:1 y SEQ ID NO:2 para la fabricación de un medicamento para el tratamiento o diagnóstico de una enfermedad ocular por administración tópica.

Es otro objeto de la presente invención proveer una composición farmacéutica para la administración tópica ocular para el tratamiento y/o el diagnóstico de una enfermedad ocular que comprende un fragmento de enlace completamente humano de un anticuerpo, caracterizado porque dicho fragmento de enlace completamente humano del antígeno tiene una secuencia con al menos 90 % de homología con SEQ ID NO:3 y/o SEQ ID NO:4 o una secuencia con al menos 90 % de homología con SEQ ID NO:1 y SEQ ID NO:2.

En particular, el anticuerpo neutraliza HSV1 y HSV2.

Definiciones A menos que se defina de otra manera, todos los términos técnicos y científicos utilizados en este documento tienen el mismo significado como se entiende comúnmente por un experto en la técnica a la cual esta invención pertenece. Aunque muchos métodos y materiales similares o equivalentes a aquellos descritos en este documento se pueden utilizar en la práctica o prueba de la presente invención, los métodos y materiales preferidos se describen a continuación. A menos que se mencione de otra manera, las técnicas descritas en este documento para utilizar con la invención son metodologías estándar bien conocidas por los expertos de la técnica.

Mediante el término "Fab" o "fragmento de enlace del antígeno" se entiende cualquier fragmento de anticuerpo que retiene la capacidad de unirse a su antígeno e incluye al menos un dominio variable de ya sea la cadena liviana o la cadena pesada.

Por el término "enfermedad ocular"... [Seguir leyendo]

1. Un fragmento de enlace del antígeno HSV completamente humano de un anticuerpo que incluye una secuencia con 90 % de homología con la SEQ ID NO:3 o SEQ ID NO:4 para utilizar en el tratamiento o diagnóstico de una enfermedad ocular por administración tópica.

2. Un fragmento de enlace del antígeno HSV completamente humano de un anticuerpo de acuerdo con la reivindicación 1, que consiste de SEQ ID NO:3 o SEQ ID NO:4 para utilizar en el tratamiento o diagnóstico de una enfermedad ocular por administración tópica.

3. Un fragmento de enlace del antígeno HSV completamente humano de un anticuerpo de acuerdo con la reivindicación 1, incluyendo una secuencia con 90 % de homología con SEQ ID NO:3 y SEQ ID NO:4 para utilizar en el tratamiento o diagnóstico de una enfermedad ocular por administración tópica.

4. Un fragmento de enlace del antígeno HSV completamente humano de un anticuerpo de acuerdo con la reivindicación 3, que consiste de SEQ ID NO: 3 y SEQ ID NO:4 para utilizar en el tratamiento o diagnóstico de una enfermedad ocular por administración tópica.

5. Un fragmento de enlace del antígeno HSV completamente humano de un anticuerpo que incluye una secuencia con 90 % de homología con SEQ ID NO:1 y SEQ ID NO:2 para utilizar en el tratamiento o diagnóstico de una enfermedad ocular por administración tópica.

6. Un fragmento de enlace del antígeno HSV completamente humano de un anticuerpo de acuerdo con la reivindicación 5, que consiste de SEQ ID NO: 1 y SEQ ID NO:2 para utilizar en el tratamiento o diagnóstico de una enfermedad ocular por administración tópica.

7. El fragmento de enlace del antígeno HSV completamente humano de un anticuerpo para utilizar en el tratamiento

o diagnóstico de una enfermedad ocular por administración tópica de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones precedentes, caracterizado porque dicho anticuerpo neutraliza HSV1 y HSV2.

8. El fragmento de enlace del antígeno HSV completamente humano de un anticuerpo para utilizar en el tratamiento o diagnóstico de una enfermedad ocular por administración tópica de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones precedentes, caracterizado porque el antígeno de superficie viral es gD.

9. El fragmento de enlace del antígeno HSV completamente humano de un anticuerpo para utilizar en el tratamiento o diagnóstico de una enfermedad ocular por administración tópica de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones precedentes, caracterizado porque el medicamento se formula con un potenciador de retención del fragmento de enlace del antígeno en el ojo.

10. El fragmento de enlace del antígeno HSV completamente humano de un anticuerpo, para utilizar en el tratamiento o diagnóstico de una enfermedad ocular por administración tópica de acuerdo con la reivindicación 9, caracterizado porque el potenciador de retención se elige en el grupo que consiste de hialuronato de sodio, hidroximetilcelulosa, hidroxietilcelulosa, hidroxietilmetilcelulosa, hidroxipropilmetilcelulosa, vinilpolialcohol, goma xantana, goma gellan, quitosano, ácido poliláctico y los derivados de estos.

11. El fragmento de enlace del antígeno HSV completamente humano de un anticuerpo para utilizar en el tratamiento o diagnóstico de una enfermedad ocular por administración tópica de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones precedentes, caracterizado porque el medicamento es en la forma de un colirio, ungüento, gel, crema oftálmica.

12. El fragmento de enlace del antígeno HSV completamente humano de un anticuerpo para utilizar en el tratamiento o diagnóstico de una enfermedad ocular por administración tópica de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones precedentes, caracterizado porque la enfermedad ocular es queratitis ocular, blefaritis, conjuntivitis, blefaroconjuntivitis, ulceraciones.

13. El fragmento de enlace del antígeno HSV completamente humano de un anticuerpo para utilizar en el tratamiento o diagnóstico de una enfermedad ocular por administración tópica de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones precedentes, caracterizado porque el fragmento de enlace completamente humano tiene un marcador detectable asociado con este.

14. Una composición farmacéutica para la administración tópica ocular, para utilizar en el tratamiento o diagnóstico de una enfermedad ocular por administración tópica para utilizar en el tratamiento o el diagnóstico de una enfermedad ocular que comprende un fragmento de enlace HSV completamente humano de un anticuerpo para

utilizar en el tratamiento o diagnóstico de una enfermedad ocular por administración tópica, de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones anteriores.