Disolución antimicrobiana tamponada para el almacenamiento de sólidos cromatográficos,

comprendiendola disolución antimicrobiana tamponada desde el 1,5% hasta el 4% en peso de alcohol bencílico, del 0,5% al 4% enpeso de alcohol etílico y desde el 92% hasta el 98% en peso de tampón de 50 mM a 200 mM para proporcionar unadisolución a pH de 5,5 a 7,5.

Disoluciones para el almacenamiento de medios cromatográficos y equipo cromatográfico y uso de las mismas

Campo de la invención

Esta invención se refiere a una composición que es estable y adecuada para el almacenamiento de medios cromatográficos y equipo cromatográfico durante periodos de tiempo prolongados, por ejemplo, durante hasta aproximadamente dos años o más. La invención también se refiere a métodos de preparación y al uso de disoluciones novedosas para preparar suspensiones líquido-sólidas que inhiben el crecimiento bacteriano y destruyen bacterias. La invención también da a conocer una composición o disoluciones para preparar suspensiones líquido-sólidas y almacenar tales suspensiones.

Antecedentes de la invención

El análisis cromatográfico es una de las técnicas analíticas usadas comúnmente para determinar las propiedades, los componentes y/o las características de diversos materiales. Sin embargo, aunque se ha adoptado ampliamente el análisis cromatográfico, un problema que ha surgido es el problema de que los medios y el equipo utilizados en tal análisis cromatográfico se vuelvan impuros o se infecten con materia bacteriana, particularmente cuando los medios cromatográficos y el equipo cromatográfico se someten a almacenamiento, particularmente a almacenamiento a largo plazo cuando no están utilizándose. La técnica anterior no ha ofrecido ninguna solución eficaz al problema de seguridad y almacenamiento eficaz de medios cromatográficos y equipo cromatográfico, especialmente para el almacenamiento a largo plazo.

Se usan ampliamente diversas disoluciones tales como ácido fosfórico (0, 01-0, 5 N) , ácido clorhídrico (0, 1-0, 5 N) , NaOH (0, 1-2 N) y alcohol (etanol o isopropanol como mínimo al 20% v/v en agua) para la inhibición bacteriana. Sin embargo, estas disoluciones son altamente ácidas o básicas o conllevan algunos riesgos medioambientales y de manipulación y no son compatibles con medios cromatográficos y equipo cromatográfico. Según la práctica actual, si se usan hidróxido de sodio (0, 1 M-0, 5 M) o ácidos (0, 1 M-0, 5 M) , es necesario neutralizarlos en primer lugar o bien usando un ácido o bien una base, respectivamente, seguido por lavado con agua suficiente para eliminar la sal en exceso. Si se necesitan concentraciones de alcohol (etanol o alcohol isopropílico) del 20% o superiores para un efecto bactericida, se requiere el desecho y la manipulación orgánica apropiados. Además a las disoluciones anteriores, se han usado algunas composiciones de disoluciones que contienen tampón de pH 5, 0 o inferior y alcohol bencílico al 1, 0% para el almacenamiento de algunos medios cromatográficos. Sin embargo, debido a la estabilidad reducida de los medios cromatográficos a bajo pH, no son adecuadas formulaciones de bajo pH para el almacenamiento a largo plazo. El alcohol bencílico es un conservante antimicrobiano frente a bacterias grampositivas y se usa en cosméticos, alimentos y una amplia gama de formulaciones farmacéuticas aunque sólo tiene propiedades bactericidas modestas, conociéndose que se produce una actividad óptima por debajo de pH 5, 0 tal como se indica en Karabit, M. S., Juneskans, O. T. y Lundgren, P. Journal of Clinical and Hospital Pharmacy (1986) 11, 281-289; y R.C. Rowe, P.J. Sheskey y P.J. Weller, Handbook of Pharmaceutical Excipients, 4ª edición American Pharmaceutical Association, (2003) 53-55. Además, se ha demostrado que la actividad del alcohol bencílico se reduce por incompatibilidades con algunos materiales de relleno tales como metilcelulosa, polietileno, poliestireno, caucho natural, neopreno y caucho butílico y similares, tal como se afirma en R.C. Rowe, P.J. Sheskey y P.J. Weller, Handbook of Pharmaceutical Excipients, 4ª edición, American Pharmaceutical Association (2003) , 53-55 y M.S. Roberts et. al, Int. J. Pharm. (1979) 2, 295-306].

Por tanto, sigue habiendo una clara necesidad de una composición o disolución aceptable que permitirá el almacenamiento eficaz y seguro de medios cromatográficos y equipo cromatográfico sin riesgo o con un riesgo esencialmente minimizado de que se produzca una infección bacteriana de los medios o el equipo. Hay especialmente una necesidad de una composición o disolución que permitirá el almacenamiento eficaz y seguro de medios cromatográficos y equipo cromatográfico durante un periodo de tiempo prolongado, por ejemplo, aproximadamente un tiempo de dos años o más, sin riesgo o con un riesgo esencialmente minimizado de que se produzca una infección bacteriana de los medios o el equipo. El documento WO 2006/081002 describe la conservación de sólidos cromatográficos con cualquiera de los alcoholes etílico o bencílico.

Sumario de la invención

Se ha descubierto inesperadamente que empleando composiciones de disoluciones antimicrobianas, pueden proporcionarse disoluciones con un pH esencialmente neutro, generalmente desde aproximadamente pH 5, 5 hasta 7, 5, preferiblemente un pH de aproximadamente 6, 0 a aproximadamente 7, 5, que son compatibles con sólidos cromatográficos, tales como medios o soportes cromatográficos y equipo cromatográfico, y que tales disoluciones mantienen propiedades de inhibición y destrucción microbiana. Las composiciones o disoluciones de esta invención comprenden disoluciones antimicrobianas tamponadas de aproximadamente el 1, 5% hasta aproximadamente el 4% de alcohol bencílico, de aproximadamente el 0, 5% a aproximadamente el 4% de alcohol etílico y generalmente desde aproximadamente el 92% hasta aproximadamente el 98% de tampón de aproximadamente 50 mM a aproximadamente 200 mM para proporcionar disoluciones a un pH de aproximadamente 5, 5 a aproximadamente 7, 5, en las que los porcentajes son porcentaje en peso. En tales disoluciones los sólidos cromatográficos, tales como los medios, soportes y equipo; pueden almacenarse de manera segura durante periodos de tiempo cortos o prolongados sin un riesgo excesivo de que se produzca una infección bacteriana de los medios, soporte o equipo. Las disoluciones de esta invención pueden destruir bacterias e inhibir el crecimiento bacteriano en presencia de sólidos cuando se almacenan los medios, soportes o equipo cromatográficos en estas disoluciones durante periodos de tiempos cortos o prolongados. Otra característica de esta invención es que proporciona tales disoluciones que no son ni altamente básicas ni ácidas y que no contienen gran cantidad (alto porcentaje) de disolvente orgánico. Adicionalmente, las disoluciones de esta invención son inertes a los materiales de construcción para medios y equipo cromatográficos usados comúnmente. Además, las disoluciones de esta invención son de baja toxicidad y son respetuosas con el medio ambiente.

Una composición preferida incluye tampón de fosfato-acetato de sodio 100 mM para proporcionar una disolución de pH 6, 0-pH 7, 0 que contiene el 2% de alcohol bencílico y el 2% de etanol. Esta disolución puede usarse para el almacenamiento de medios cromatográficos basados en perlas poliméricas o sílice. Se muestra que la suspensión líquido-sólida preparada usando los medios cromatográficos y dicha disolución destruye E. coli y C. albicans en el plazo de 2 horas y A. niger en el plazo de 24 horas mientras que mantiene las disoluciones libres de bacterias durante tiempos prolongados. Además, se muestra también que esta disolución destruye diversos microorganismos presentes sobre el soporte sólido tal como medios cromatográficos y lo mantiene libre de bacterias a largo plazo. Puesto que esta disolución es altamente inerte y no tóxica, permite operaciones habituales tales como relleno de columnas cromatográficas o limpieza de equipos. Además, los componentes de la disolución pueden eliminarse fácilmente de superficies tales como superficies de medios o equipo cromatográficos lavando con agua, otros tampones o ácidos diluidos tales como ácido acético (al 1, 0%) que se usan normalmente en las operaciones cromatográficas.

Descripción detallada de la invención y realizaciones preferidas

Un fin de la invención es preparar disoluciones que puedan destruir bacterias e inhibir el crecimiento bacteriano en presencia de sólidos cromatográficos cuando se almacenan la disolución o sólidos cromatográficos en esta disolución de corto a largo plazo. Otro fin de la invención es proporcionar una disolución que no sea altamente ácida o básica, que no contenga altas cantidades de disolvente orgánico, sea inerte, es decir, no dañe los materiales de construcción de medios y equipo cromatográficos usados comúnmente, sea de baja toxicidad y respetuosa con el medio ambiente.

La invención se refiere a proporcionar... [Seguir leyendo]

1. Disolución antimicrobiana tamponada para el almacenamiento de sólidos cromatográficos, comprendiendo la disolución antimicrobiana tamponada desde el 1, 5% hasta el 4% en peso de alcohol bencílico, del 0, 5% al 4% en peso de alcohol etílico y desde el 92% hasta el 98% en peso de tampón de 50 mM a 200 mM para proporcionar una disolución a pH de 5, 5 a 7, 5.

2. Disolución antimicrobiana tamponada según la reivindicación 1, en la que el pH es pH 6, 0.

3. Disolución antimicrobiana tamponada según la reivindicación 1, en la que la cantidad de alcohol bencílico es del 2% en peso y la cantidad de alcohol etílico es del 2% en peso.

4. Disolución antimicrobiana tamponada según la reivindicación 1, en la que el tampón se selecciona de citrato de sodio, acetato de sodio, fosfato de sodio, trietanolamina, TRIS (tris (hidroxymetil) aminometano) , HEPES (N- (2hidroxietil) piperizina-N’- (2-etanosulfonato) y MES (4-morfolina-etanosulfonato) .

5. Disolución antimicrobiana tamponada según la reivindicación 1, que comprende el 2% en peso de alcohol bencílico, el 2% en peso de alcohol etílico y el 96% en peso de fosfato de sodio 100 mM, dibásico valorado hasta pH 6, 0.

6. Método de almacenamiento de un sólido cromatográfico mientras se impide la infección del sólido que comprende retener el sólido cromatográfico en una disolución antimicrobiana tamponada según cualquier reivindicación anterior.

7. Método según la reivindicación 6, en el que el sólido cromatográfico se selecciona de medios cromatográficos o equipo cromatográfico.

8. Método según la reivindicación 7, en el que el sólido cromatográfico son medios cromatográficos.

9. Método según la reivindicación 6, para almacenar el sólido cromatográfico durante un periodo de hasta dos años.

10. Método según la reivindicación 9, en el que el sólido cromatográfico son medios cromatográficos.

11. Método según la reivindicación 10, en el que el sólido cromatográfico son medios cromatográficos.

12. Producto que comprende un sólido cromatográfico y una disolución antimicrobiana tamponada, en el que la disolución antimicrobiana tamponada comprende desde el 1, 5% hasta el 4% en peso de alcohol bencílico, del 0, 5% al 4% en peso de alcohol etílico y desde el 92% hasta el 98% en peso de tampón de 50 mM a 200 mM para proporcionar una disolución un pH de 5, 5 a 7, 5.

13. Producto según la reivindicación 12, en el que el sólido cromatográfico se selecciona de medios cromatográficos o equipo cromatográfico.

14. Producto según la reivindicación 12, en el que la disolución antimicrobiana tamponada comprende el 2% en peso de alcohol bencílico, el 2% en peso de alcohol etílico y el 96% en peso de fosfato de sodio 100 mM, dibásico valorado hasta pH 6, 0.