COMPOSICIÓN DE VACUNA MULTIVALENTE.

Una composición inmunogénica multivalente que comprende un conjugado de una proteína portadora y el polisacárido u oligosacárido capsular de H.

influenzae de tipo B en una dosis de 1-5 µg de polisacárido u oligosacárido, en la que dicha composición comprende además dos o más polisacáridos u oligosacáridos bacterianos adicionales capaces de conferir protección a un huésped frente a infección por las bacterias a partir de las cuales derivan y en la que el polisacárido de Hib y los 2 o más polisacáridos u oligosacáridos adicionales no están adsorbidos en un adyuvante.

Composición de vacuna multivalente Composición de vacuna La presente invención se refiere a formulaciones de vacuna de combinación nuevas. Las vacunas de combinación (que proporcionan protección frente a patógenos múltiples) son muy deseables con el fin de minimizar el número de inmunizaciones necesarias para conferir protección frente a patógenos múltiples, para reducir los costes de administración y para aumentar la aceptación y los índices de cobertura. El fenómeno bien documentado de competición antigénica (o interferencia) complica el desarrollo de vacunas multicomponente. La interferencia antigénica se refiere a la observación de que la administración de antígenos múltiples con frecuencia da como resultado una respuesta disminuida a determinados antígenos con relación a la respuesta inmune observada cuando tales antígenos se administran individualmente.

Se conocen vacunas de combinación que pueden prevenir Bordetella pertussis, Clostridium tetani, Cor y nebacterium diphtheriae y opcionalmente virus de la Hepatitis B y/o Haemophilus influenzae de tipo b (véanse, por ejemplo, los documentos WO 93/24148 y WO 97/00697) .

Paradiso y Lindberg, Dev Biol. Stand. (1996) vol. 87, páginas 269-275 divulgan combinaciones futuras que incluyen vacunas de glicoconjugado. Granhoff y col., Infection & Immunity (1997) , vol. 65 (5) , páginas 1710-1715 divulgan inmunización frente a Haemophilus influenzae de tipo b y Nesseiria meningitidis de tipo C mediante inmunización primaria con una dosis convencional de 10 !g de cada oligosacárido conjugado a CRM197 seguido por una inmunización de refuerzo con dosis bajas de 5 !g de oligosacáridos no conjugados.

Por consiguiente, la presente invención proporciona la reivindicación 1.

Los procedimientos para preparar toxoide tetánico (TT) se conocen bien en la técnica. Por ejemplo, TT se produce preferentemente mediante purificación de la toxina a partir de un cultivo de Clostridium tetani seguido por destoxificación química, pero se prepara de forma alternativa mediante purificación de un análogo recombinante o destoxificado genéticamente de la toxina (por ejemplo, como se describe en el documento EP 209281) . “Toxoide tetánico” también abarca fragmentos inmunogénicos de la proteína de longitud completa (por ejemplo Fragmento C

– véase el documento EP 478602) .

Los procedimientos para preparar toxoide de difteria (TD) también se conocen bien en la técnica. Por ejemplo, TD se produce preferentemente mediante purificación de la toxina a partir de un cultivo de Cor y nebacterium diphtheriae seguido por destoxificación química, pero se prepara de forma alternativa mediante purificación de un análogo recombinante o destoxificado genéticamente de la toxina (por ejemplo, CRM197 u otros mutantes como se describe en los documento US 4.709.017, US 5.843.711, US 5.601.827 y US 5.917.017) .

En la técnica se conocen bien los componentes de pertusis acelulares (Pa) . Los ejemplos incluyen toxoide de pertusis (TP) , hemaglutinina filamentosa (FHA) , pertactina (PRN) y los aglutinógenos 2 y 3. Estos antígenos se purifican parcialmente o en grado elevado. Preferentemente se usan 2 o más componentes de pertusis acelulares en la vacuna. Más preferentemente, 2, 3, 4 o los 5 componentes de pertusis acelulares del ejemplo anterior se incluyen en la vacuna. Más preferentemente se incluyen TP, FHA y PRN. TP se puede producir mediante una diversidad de maneras, por ejemplo mediante purificación de la toxina a partir de un cultivo de B. pertussis seguido por destoxificación química o como alternativa mediante purificación de un análogo destoxificado genéticamente de TP (por ejemplo, como se describe en el documento US 5.085.862) .

Los procedimientos para preparar Bordetella pertussis muerta de célula completa (Pw) adecuada para la presente invención se divulgan en el documento WO 93/24148, ya que son procedimientos de formulación adecuados para producir vacunas DT-TT-Pw-HepB y DT-TT-Pa-HepB.

Los conjugados de polisacárido capsular bacteriano pueden comprender cualquier péptido, polipéptido o proteína portadora que comprende al menos un epítopo T auxiliar. Preferentemente la proteína o proteínas portadoras usadas se seleccionan entre el grupo que comprende: toxoide tetánico, toxoide de difteria, CRM197, toxina de difteria recombinante (como se describe en cualquiera de los documentos 4.709.017, WO 93/25210, WO 95/33481,

o WO 00/48638) , neumolisina (preferentemente destoxificada químicamente o un mutante destoxificado) a partir de

S. pneumoniae, OMPC de N. meningitidis y proteína D (PD) de H. influenzae (documento EP 594610) . Debido al efecto conocido de la supresión de portador, es provechoso si en cada una de las composiciones de la invención los antígenos de polisacárido contenidos en la misma (antígenos “n”) se conjugan a más de un portador. Por tanto (n-1) de los polisacáridos se podrían portar (por separado) en un tipo de portador y 1 en un portador diferente o (n-2) en uno y 2 en dos portadores diferentes, etc. Por ejemplo, en una vacuna que contiene 4 conjugados de polisacáridos bacterianos, 1, 2 o los cuatro se podrían conjugar a portadores diferentes) . Sin embargo, la proteína D se usa provechosamente como un portador en las composiciones de la invención ya que la misma se puede usar para diversos polisacáridos (2, 3, 4 o más) en una composición sin un efecto de supresión de portador marcado. Más preferentemente Hib está presente como un conjugado de TT y MenA, MenC, MenY y MenW son conjugados de TT

o PD. La proteína D también es un portador útil ya que proporciona un antígeno adicional que puede proporcionar

protección frente a H. influenzae.

El polisacárido se puede enlazar a la proteína portadora mediante cualquier procedimiento conocido (por ejemplo, por Likhite, Patente de los Estados Unidos 4.372.945 y Armor y col, Patente de los Estados Unidos 4.474.757) . Preferentemente, se lleva a cabo conjugación de CDAP (documento WO 95/08348) .

En CDAP, el reactivo cianilante tetrafluoroborato de 1-ciano-dimetilaminopiridinio (CDAP) se usa preferentemente para la síntesis de conjugados de polisacárido-proteína. La reacción de cianilación se puede realizar en condiciones relativamente suaves, lo cual evita la hidrólisis de los polisacáridos sensibles alcalinos. Esta síntesis permite el acoplamiento directo a una proteína portadora.

La composición inmunogénica anterior puede comprender además uno, dos, tres, cuatro, cinco, seis o siete componentes seleccionados entre la siguiente lista: polisacárido de tipo Y de N. meningitidis [MenY] (preferentemente conjugado) , polisacárido de tipo W de N. meningitidis [MenW] (preferentemente conjugado) , el polisacárido Vi de Salmonella typhi, vesículas de membrana exterior de N. meningitidis (preferentemente de serotipo B) , una o más proteínas de membrana exterior (expuesta en superficie) de N. meningitidis (preferentemente de serotipo B) , virus muerto atenuado de Hepatitis A (HepA -preferentemente el producto conocido como “Havrix™” [SmithKline Beecham Biologicals]) y virus de polio inactivado (IPV -preferentemente que comprende los tipos 1, 2 y 3 como es convencional en la técnica de vacunas, más preferentemente la vacuna de polio Salk) sin problemas de interferencia sustanciales para cualquiera de los antígenos de la composición.

Las composiciones inmunogénicas de la invención preferentemente se formulan como una vacuna para administración in vivo al huésped de una forma tal que los componentes individuales de la composición se formulan de forma que la inmunogenicidad de componentes individuales no esté deteriorada sustancialmente por otros componentes individuales de la composición. No deteriorada sustancialmente significa que tras la inmunización, se obtiene un título de anticuerpos frente a cada componente que es más del 60 %, preferentemente más del 70 %, más preferentemente más del 80 %, aún más preferentemente más del 90 % y lo más preferente es que sea más del 95-100 % del título obtenido cuando el antígeno se administra aislado.

Las composiciones inmunogénicas de la invención preferentemente se formulan como una vacuna para administración in vivo al huésped, de forma que las mismas confieren un título de anticuerpo superior al criterio de seroprotección de cada componente antigénico para un porcentaje aceptable de sujetos humanos. Este es un ensayo importante en la evaluación de la eficacia de una vacuna en la población. Los antígenos con... [Seguir leyendo]

1. Una composición inmunogénica multivalente que comprende un conjugado de una proteína portadora y el polisacárido u oligosacárido capsular de H. influenzae de tipo B en una dosis de 1-5 !g de polisacárido u oligosacárido, en la que dicha composición comprende además dos o más polisacáridos u oligosacáridos bacterianos adicionales capaces de conferir protección a un huésped frente a infección por las bacterias a partir de las cuales derivan y en la que el polisacárido de Hib y los 2 o más polisacáridos u oligosacáridos adicionales no están adsorbidos en un adyuvante.

2. La composición inmunogénica multivalente de la reivindicación 1, en la que los polisacáridos u oligosacáridos bacterianos adicionales se conjugan a una proteína portadora.

3. La composición inmunogénica multivalente de la reivindicación 1, en la que los 2 o más polisacáridos u oligosacáridos bacterianos adicionales incluyen polisacárido capsular de serogrupo A de N. meningitidis u oligosacárido conjugado a una proteína portadora y polisacárido u oligosacárido capsular de serogrupo C de N. meningitidis conjugado a una proteína portadora.

4. La composición inmunogénica multivalente de la reivindicación 1, en la que los 2 o más polisacáridos u oligosacáridos bacterianos adicionales incluyen polisacárido u oligosacárido capsular de serogrupo C de N. meningitidis conjugado a una proteína portadora y polisacárido u oligosacárido capsular de serogrupo Y de N. meningitidis conjugado a una proteína portadora.

5. La composición inmunogénica multivalente de la reivindicación 1 ó 2, que comprende más de 7 polisacáridos u oligosacáridos bacterianos adicionales.

6. La composición inmunogénica multivalente de la reivindicación 5, en la que los polisacáridos u oligosacáridos bacterianos adicionales son polisacáridos u oligosacáridos capsulares neumocócicos.

7. Una composición inmunogénica multivalente que comprende in conjugado de una proteína portadora y el polisacárido u oligosacárido capsular de H. influenzae de tipo B en una dosis de 1-5 !g de polisacárido u oligosacárido, en la que dicha composición comprende adicionalmente 1 o más polisacáridos u oligosacáridos bacterianos adicionales capaces de conferir protección a un huésped frente a infección por las bacterias a partir de las cuales derivan, en la que el 1 o más polisacáridos u oligosacáridos bacterianos adicionales incluyen polisacárido u oligosacárido capsular de serogrupo C de N. meningitidis conjugado a una proteína portadora y en la que el polisacárido capsular de H. influenzae de tipo B de y todo (s) el (los) polisacárido (s) u oligosacárido (s) no está (n) adsorbido (s) en un adyuvante.

8. La composición inmunogénica multivalente de las reivindicaciones 1-7, en la que los polisacáridos u oligosacáridos bacterianos adicionales se seleccionan entre un grupo que consiste en: polisacárido capsular de serogrupo A de N. meningitidis, polisacárido capsular de serogrupo C de N. meningitidis, polisacárido capsular de serogrupo Y de N. meningitidis, polisacárido capsular de serogrupo W de N. meningitidis, polisacárido capsular de serotipo 1 de Streptococcus pneumoniae, polisacárido capsular de serotipo 2 de S. pneumoniae, polisacárido capsular de serotipo 3 de S. pneumoniae, polisacárido capsular de serotipo 4 de S. pneumoniae, polisacárido capsular de serotipo 5 de S. pneumoniae, polisacárido capsular de serotipo 6A de S. pneumoniae, polisacárido capsular de serotipo 6B de S. pneumoniae, polisacárido capsular de serotipo 7F de S. pneumoniae, polisacárido capsular de serotipo 8 de S. pneumoniae, polisacárido capsular de serotipo 9N de S. pneumoniae, polisacárido capsular de serotipo 9V de S. pneumoniae, polisacárido capsular de serotipo 10A de S. pneumoniae, polisacárido capsular de serotipo 11A de S. pneumoniae, polisacárido capsular de serotipo 12F de S. pneumoniae, polisacárido capsular de serotipo 14 de S. pneumoniae, polisacárido capsular de serotipo 15B de S. pneumoniae, polisacárido capsular de serotipo 17F de S. pneumoniae, polisacárido capsular de serotipo 18C de S. pneumoniae, polisacárido capsular de serotipo 19A de S. pneumoniae, polisacárido capsular de serotipo 19F de S. pneumoniae, polisacárido capsular de serotipo 20 de S. pneumoniae, polisacárido capsular de serotipo 22F de S. pneumoniae, polisacárido capsular de serotipo 23F de S. pneumoniae, polisacárido capsular de serotipo 33F de S. pneumoniae, polisacárido capsular de grupo I de Estreptococos de Grupo B, polisacárido capsular de grupo II de Estreptococos de Grupo B, polisacárido capsular de grupo III de Estreptococos de Grupo B, polisacárido capsular de grupo IV de Estreptococos de Grupo B, polisacárido capsular de grupo V de Estreptococos de Grupo B, polisacárido capsular de tipo 5 de Staphylococcus aureus, polisacárido capsular de tipo 8 de Staphylococcus aureus, polisacárido Vi de Salmonella typhi, LPS de N. meningitidis, LPS de M. catarrhalis y LPS de H. influenzae, u oligosacáridos de los mismos.

9. La composición inmunogénica multivalente de las reivindicaciones 1-8, en la que la proteína o proteínas portadoras usadas se seleccionan entre el grupo que comprende: toxoide tetánico, toxoide de difteria, CRM197, toxina de difteria recombinante, OMPC de N. meningitidis, neumolisina de S. pneumoniae y proteína D de H. influenzae.

10. La composición inmunogénica multivalente de las reivindicaciones 1-9, en la que la proteína portadoras usada es toxoide tetánico.

11. La composición inmunogénica multivalente de la reivindicación 9, en la que el polisacárido u oligosacárido

capsular de H. influenzae de tipo B y los polisacáridos u oligosacáridos adicionales no están conjugados al mismo portador.

12. La composición inmunogénica multivalente de la reivindicación 11, en la que el polisacárido u oligosacárido

capsular de H. influenzae de tipo B y los polisacáridos u oligosacáridos adicionales no están todos conjugados a 5 CRM197.

13. El uso de la composición inmunogénica multivalente de las reivindicaciones 1-12 en la preparación de un medicamento para el tratamiento y la prevención de enfermedades causadas por infección por Haemophilus influenzae.

14. La composición inmunogénica multivalente de las reivindicaciones 1-12, para su uso en un medicamento.

15. Un procedimiento para preparar la composición inmunogénica multivalente de las reivindicaciones 1-12 que comprende la etapa de mezclar los componentes individuales en conjunto.