Composición de vacuna multivalente con dosis reducida de Haemophilus influenzae de tipo B.

Una composición inmunogénica multivalente que comprende Bordetella pertussis de células completasexterminadas,

toxoide tetánico, toxoide de difteria, antígeno de superficie de Hepatitis B y un conjugado de unaproteína portadora y el polisacárido u oligosacárido capsular de H. influenzae de tipo B, en el que la cantidad deconjugado por dosis de 0,5 ml de vacuna a 5 granel es 2-6 μg.

Composición de vacuna multivalente con dosis reducida de Haemophilus influenzae de tipo B

La presente invención se refiere a formulaciones de vacuna de combinación nuevas. Las vacunas de combinación (que proporcionan protección frente a patógenos múltiples) son muy deseables con el fin de minimizar el número de 5 inmunizaciones necesarias para conferir protección frente a patógenos múltiples, para reducir los costes de administración y para aumentar la aceptación y los índices de cobertura. El fenómeno bien documentado de competición antigénica (o interferencia) complica el desarrollo de vacunas multicomponente. La interferencia antigénica se refiere a la observación de que la administración de antígenos múltiples con frecuencia da como resultado una respuesta disminuida a determinados antígenos con relación a la respuesta inmune observada cuando tales antígenos se administran individualmente.

Se conocen vacunas de combinación que pueden prevenir Bordetella pertussis, Clostridium tetani, Cor y nebacterium diphtheriae y opcionalmente virus de la Hepatitis B y/o Haemophilus influenzae de tipo b (véanse, por ejemplo, los documentos WO 93/24148 y WO 97/00697) .

Fernández y col., Am J. Trop. Med. Hyg. 62, 485-490 (2000) , Bravo y col., Southeast Asian J. Trop. Med. Public 15 Health 29, 772-778 (1998) y Nolan y col., Vaccine 16, 2085-2089 (1998) revela vacunas DTP-Hib y DTP-Hib-Hepb.

La presente invención se refiere a la fabricación de las vacunas multivalentes más ambiciosas a datar, a la administración de las que pueden prevenir o tratar la infección por Bordetella pertussis, Clostridium tetani, Cor y nebacterium diphtheriae, virus de la Hepatitis B y Haemophilus influenzae, en la que los componentes de la vacuna no interfieren significativamente en la ejecución inmunológica de cualquier componente de la vacuna.

Por consiguiente, la presente invención proporciona la reivindicación 1.

Los procedimientos para preparar toxoide tetánico (TT) se conocen bien en la técnica. Por ejemplo, TT se produce preferentemente mediante purificación de la toxina a partir de un cultivo de Clostridium tetani seguido por destoxificación química, pero se prepara de forma alternativa mediante purificación de un análogo recombinante o destoxificado genéticamente de la toxina (por ejemplo, como se describe en el documento EP 209281) . “Toxoide 25 tetánico” también abarca fragmentos inmunogénicos de la proteína de longitud completa (por ejemplo Fragmento C

– véase el documento EP 478602) .

Los procedimientos para preparar toxoide de difteria (TD) también se conocen bien en la técnica. Por ejemplo, TD se produce preferentemente mediante purificación de la toxina a partir de un cultivo de Cor y nebacterium diphtheriae seguido por destoxificación química, pero se prepara de forma alternativa mediante purificación de un análogo recombinante o destoxificado genéticamente de la toxina (por ejemplo, CRM197 u otros mutantes como se describe en los documento US 4.709.017, US 5.843.711, US 5.601.827 y US 5.917.017) .

Los procedimientos para preparar Bordetella pertussis muerta de célula completa (Pw) adecuada para la presente invención se divulgan en el documento WO 93/24148, ya que son procedimientos de formulación adecuados para producir vacunas DT-TT-Pw-HepB y DT-TT-Pa-HepB.

Los conjugados de polisacárido capsular bacteriano pueden comprender cualquier péptido, polipéptido o proteína portadora que comprende al menos un epítopo T auxiliar. Preferentemente la proteína o proteínas portadoras usadas se seleccionan entre el grupo que comprende: toxoide tetánico, toxoide de difteria, CRM197, toxina de difteria recombinante (como se describe en cualquiera de los documentos 4.709.017, WO 93/25210, WO 95/33481, o WO 00/48638) , neumolisina (preferentemente destoxificada químicamente o un mutante destoxificado) a partir de S. pneumoniae, OMPC de N. meningitidis y proteína D (PD) de H. influenzae (documento EP 594610) . Debido al efecto conocido de la supresión de portador, es provechoso si en cada una de las composiciones de la invención los antígenos de polisacárido contenidos en la misma (antígenos “n”) se conjugan a más de un portador. Por tanto (n-1) de los polisacáridos se podrían portar (por separado) en un tipo de portador y 1 en un portador diferente o (n-2) en uno y 2 en dos portadores diferentes, etc. Por ejemplo, en una vacuna que contiene 4 conjugados de polisacáridos 45 bacterianos, 1, 2 o los cuatro se podrían conjugar a portadores diferentes) . Sin embargo, la proteína D se usa provechosamente como un portador en las composiciones de la invención ya que la misma se puede usar para diversos polisacáridos (2, 3, 4 o más) en una composición sin un efecto de supresión de portador marcado. Más preferentemente Hib está presente como un conjugado de TT y MenA, MenC, MenY y MenW son conjugados de TT

o PD. La proteína D también es un portador útil ya que proporciona un antígeno adicional que puede proporcionar 50 protección frente a H. influenzae.

El polisacárido se puede enlazar a la proteína portadora mediante cualquier procedimiento conocido (por ejemplo, por Likhite, Patente de los Estados Unidos 4.372.945 y Armor y col, Patente de los Estados Unidos 4.474.757) . Preferentemente, se lleva a cabo conjugación de CDAP (documento WO 95/08348) .

En CDAP, el reactivo cianilante tetrafluoroborato de 1-ciano-dimetilaminopiridinio (CDAP) se usa preferentemente 55 para la síntesis de conjugados de polisacárido-proteína. La reacción de cianilación se puede realizar en condiciones relativamente suaves, lo cual evita la hidrólisis de los polisacáridos sensibles alcalinos. Esta síntesis permite el acoplamiento directo a una proteína portadora.

La composición inmunogénica anterior puede comprender además uno, dos, tres, cuatro, cinco, seis o siete componentes seleccionados entre la siguiente lista: polisacárido de tipo Y de N. meningitidis [MenY] (preferentemente conjugado) , polisacárido de tipo W de N. meningitidis [MenW] (preferentemente conjugado) , el 5 polisacárido Vi de Salmonella typhi, vesículas de membrana exterior de N. meningitidis (preferentemente de serotipo B) , una o más proteínas de membrana exterior (expuesta en superficie) de N. meningitidis (preferentemente de serotipo B) , virus muerto atenuado de Hepatitis A (HepA - preferentemente el producto conocido como “Havrix™” [SmithKline Beecham Biologicals]) y virus de polio inactivado (IPV - preferentemente que comprende los tipos 1, 2 y 3 como es convencional en la técnica de vacunas, más preferentemente la vacuna de polio Salk) sin problemas de interferencia sustanciales para cualquiera de los antígenos de la composición.

Las composiciones inmunogénicas de la invención preferentemente se formulan como una vacuna para administración in vivo al huésped de una forma tal que los componentes individuales de la composición se formulan de forma que la inmunogenicidad de componentes individuales no esté deteriorada sustancialmente por otros componentes individuales de la composición. No deteriorada sustancialmente significa que tras la inmunización, se obtiene un título de anticuerpos frente a cada componente que es más del 60 %, preferentemente más del 70 %, más preferentemente más del 80 %, aún más preferentemente más del 90 % y lo más preferente es que sea más del 95-100 % del título obtenido cuando el antígeno se administra aislado.

Las composiciones inmunogénicas de la invención preferentemente se formulan como una vacuna para administración in vivo al huésped, de forma que las mismas confieren un título de anticuerpo superior al criterio de 20 seroprotección de cada componente antigénico para un porcentaje aceptable de sujetos humanos. Este es un ensayo importante en la evaluación de la eficacia de una vacuna en la población. Los antígenos con un título de anticuerpo asociado por encima del cual se considera que un huésped se seroconvierte frente al antígeno se conocen bien y tales títulos se publican por organizaciones tales como la OMS. Preferentemente más del 80 % de una muestra estadísticamente significativa de sujetos está seroconvertida, más preferentemente más del 90 %, aún más preferentemente más del 93 % y lo más preferente es que sea del 96-100 %.

La composición inmunogénica de la presente invención está preferentemente coadyuvada. Los coadyuvantes adecuados incluyen una sal de aluminio tal como un gel de hidróxido de aluminio (alumbre) o de fosfato... [Seguir leyendo]

1. Una composición inmunogénica multivalente que comprende Bordetella pertussis de células completas exterminadas, toxoide tetánico, toxoide de difteria, antígeno de superficie de Hepatitis B y un conjugado de una proteína portadora y el polisacárido u oligosacárido capsular de H. influenzae de tipo B, en el que la cantidad de conjugado por dosis de 0, 5 ml de vacuna a granel es 2-6 !g.

2. La composición inmunogénica de la reivindicación 1, en la que la proteína portadora usada está seleccionada del grupo que comprende: toxoide tetánico, toxoide de difteria, CRM197, OMPC de N. meningitidis y proteína D de H. influenzae.

3. La composición inmunogénica de la reivindicación 1 o 2 en la que la proteína portadora usada es toxoide tetánico 10 o CRM197.

4. La composición inmunogénica de las reivindicaciones 1-3 en la que la cantidad de polisacárido en el conjugado por dosis de 0, 5 ml de vacuna en bruto es 2, 5 !g.

5. La composición inmunogénica de las reivindicaciones 1-3 en la que la cantidad de polisacárido en el conjugado por dosis de 0, 5 ml de vacuna en bruto es 3 !g.

6. La composición inmunogénica de las reivindicaciones 1-3 en la que la cantidad de polisacárido en el conjugado por dosis de 0, 5 ml de vacuna en bruto es 4 !g.

7. La composición inmunogénica de las reivindicaciones 1-3 en la que la cantidad de polisacárido en el conjugado por dosis de 0, 5 ml de vacuna en bruto es 5 !g.

8. La composición inmunogénica de las reivindicaciones 1-7, en la que el conjugado de una proteína transportadora 20 y el polisacárido capsular de H. influenzae de tipo B no están adsorbidos sobre una sal coadyuvante de aluminio.

9. Las composiciones inmunogénicas de las reivindicaciones 1-8, en las que el contenido de antígeno proteico es 1100 !g, 5-50 !g, o 5-25 !g.

10. Una vacuna que comprende la composición inmunogénica de las reivindicaciones 1-9 y un excipiente farmacéuticamente aceptable.

11. Un procedimiento para producir la vacuna de la reivindicación 10, que comprende la etapa de mezclar la composición inmunogénica de cualquiera de las reivindicaciones 1-9 conjuntamente con un excipiente farmacéuticamente aceptable.

12. La composición inmunogénica de las reivindicaciones 1-9 para su uso en un medicamento.

13. La vacuna de la reivindicación 10 para su uso en proteger o tratar un mamífero susceptible de infección, por 30 medio de administrar la vacuna mediante vía sistémica o vía mucosal.

14. La vacuna para su uso en proteger o tratar un mamífero susceptible de infección de acuerdo con la reivindicación 13, en la que la vacuna se administra por inyección mediante las vías intramuscular, intraperitoneal, intradérmica o subcutánea; o por administración mucosal a los tractos oral/alimentario, respiratorio, genitourinario.

15. La vacuna para su uso en proteger o tratar un mamífero susceptible de infección de acuerdo con la 35 reivindicación 13 o 14, en la que la vacunación inicial está seguida por una o varias inmunizaciones de recuerdo.