Una composición antigénica liofilizada que comprende un polisacárido capsular de Streptococcus pneumoniae del serotipo 6B conjugado con 3D-MPL y sustancialmente desprovista de adyuvante basado en aluminio

Vacuna contra polisacáridos capsulares de Streptococcus pneumoniae.

Campo de la invención

La presente invención se refiere a vacunas antigénicas de polisacáridos bacterianos, a su fabricación y al uso de tales polisacáridos en medicamentos.

En particular la presente descripción se refiere a tres aspectos interrelacionados: A - vacunas que comprenden un antígeno de polisacárido de neumococos, típicamente un antígeno conjugado de polisacárido de neumococos, formulado con un antígeno proteico de Streptococcus pneumoniae y opcionalmente un adyuvante inductor de respuesta Th1; B - conjugados de polisacáridos de neumococos específicos y ventajosos a los que se les agrega un adyuvante Th1; y C - conjugados de polisacáridos de bacteria conjugados en general a la proteína D de H. influenzae.

Antecedentes de la invención

Streptococcus pneumoniae es una bacteria Gram-positiva responsable de una morbilidad y mortalidad considerables (particularmente en jóvenes y ancianos), que causa enfermedades invasivas tales como neumonía, bacteriemia y meningitis y enfermedades asociadas a colonización, tal como la otitis media aguda. Se estima que la tasa de neumonía neumocóccica en EE.UU. para personas con más de 60 años de edad es de 3 a 8 por cada 100.000. En el 20% de los casos da lugar a bacteriemia y otras manifestaciones tal como meningitis, con una tasa de mortalidad cercana al 30% incluso con tratamiento antibiótico.

El neumococo está encapsulado con un polisacárido unido químicamente que le confiere especificidad de serotipo. Existen 90 serotipos conocidos de neumococo y la cápsula es el principal determinante de virulencia para los neumococos, ya que la cápsula no sólo protege la superficie interna de la bacteria del complemento, sino que es por sí misma muy poco inmunógena. Los polisacáridos son antígenos T independientes y no pueden ser procesados o presentados en moléculas del CMH para interactuar con los linfocitos T. Pueden sin embargo, estimular el sistema inmunitario a través de un mecanismo alternativo que incluye el entrecruzamiento de receptores de superficie en células B.

Se ha demostrado en varios experimentos que la protección contra las enfermedades invasivas por neumococos está correlacionada más fuertemente con la especificidad de anticuerpo para la cápsula y la protección es específica de serotipo.

Las vacunas antigénicas basadas en polisacáridos son bien conocidas en la técnica. Cuatro de las que se autorizaron para uso en seres humanos incluyen el polisacárido Vi de Salmonella typhi, el polisacárido PRP de Haemophilus influenzae, la vacuna tetravalente para meningococo compuesta de serotipos A, C, W135 e Y, y la vacuna 23-valente neumocóccica compuesta de los polisacáridos correspondientes a los serotipos 1, 2, 3, 4, 5, 6B, 7F, 8, 9N, 9V, 10A, 11A, 12F, 14, 15B, 17F, 18C, 19A, 19F, 20, 22F, 23F y 33 (que suman al menos el 90% de los aislamientos de neumococos en sangre).

Las tres últimas vacunas confieren protección contra bacterias que causan infecciones respiratorias que dan como resultado morbilidad y mortalidad graves en lactantes, aunque estas vacunas aún no han sido autorizadas para el uso en niños de menos de dos años de edad porque son inadecuadamente inmunógenas en este grupo de edad. [Peltola y col. (1984), N. Engl. J. Med. 310:1561-1566]. Streptococcus pneumoniae es la causa más común de enfermedad bacteriana invasiva y otitis media en lactantes y niños de corta edad. Asimismo, los ancianos producen respuestas muy pobres a las vacunas neumocóccicas [Roghmann y col., (1987), J. Gerontol. 42:265-270], de ahí la incidencia aumentada de neumonía bacteriana en esta población [Verghese y Berk, (1983) Medicine (Baltimore) 62:271-285].

Las estrategias, que han sido diseñadas para solucionar esta falta de inmunogenicidad en lactantes, incluyen la unión del polisacárido a proteínas inmunógenas grandes, que proveen ayuda a la célula T presenciales y que inducen memoria inmunológica contra el antígeno polisacárido con el que está conjugado. Actualmente se están evaluando las vacunas para neumococos de conjugados de glicoproteínas con respecto a la seguridad, inmunogenicidad y eficacia en diversos grupos de edad.

A) Vacunas de Polisacáridos de Neumococos

La vacuna para neumococos no conjugada 23-valente demostró una amplia variación en la eficacia clínica, desde 0% hasta 81% (Fedson y col. (1994) Arch Intern Med. 154: 2531-2535). La eficacia parece estar relacionada con el grupo de riesgo que está siendo inmunizando, tal como ancianos, enfermedad de Hodgkin, esplenectomía, enfermedad de células falciformes y agammaglobulinémicos (Fine y col. (1994) Arch Intern Med. 154:2666-2677), y también con la manifestación de la enfermedad. La vacuna 23-valente no demuestra protección contra la neumonía neumocóccica (en ciertos grupos de alto riesgo tal como los ancianos) y otitis media.

Existe por lo tanto una necesidad de composiciones de vacunas para neumococos mejoradas, particularmente unas que puedan ser más eficaces en la prevención o alivio de la enfermedad neumocóccica (particularmente neumonía) en los ancianos y niños de corta edad.

B) Composiciones de Conjugado de Polisacárido Seleccionado de Neumococo + 3D-MPL

Se acepta generalmente que la eficacia protectora de la vacuna para neumococos no conjugada comercializada está más o menos relacionada con la concentración de anticuerpos inducidos tras la vacunación; de hecho, los 23 polisacáridos fueron aceptados para aprobación solamente en base a la inmunogenicidad de cada componente polisacárido (Ed. Williams y col. New York Academy of Sciences 1995 págs. 241-249). Por consiguiente otra potenciación de las respuestas de anticuerpos contra los polisacáridos del neumococo podrían aumentar el porcentaje de lactantes y ancianos que responden con niveles protectores de anticuerpo a la primera inyección de polisacárido o conjugado de polisacárido y podría reducir la dosificación y número de inyecciones necesarias para inducir una inmunidad protectora contra infecciones causadas por Streptococcus pneumoniae.

Desde principios del siglo XX, los investigadores han experimentado con una gran cantidad de compuestos que pueden agregarse a los antígenos para mejorar su inmunogenicidad en composiciones de vacunas [recapitulación por M. F. Powell & M. J. Newman, Plenum Press, NY, "Vaccine Design - the Subunit and Adjuvant Approach" (1995) Capítulo 7 "A Compendium of Vaccine Adjuvants and Excipients"]. Muchos son muy eficaces, pero causan reacciones adversas locales y sistémicas significativas que impiden su uso en composiciones de vacunas para seres humanos. Los adyuvantes basados en aluminio (tales como alumbre hidróxido de aluminio o fosfato de aluminio), descritos por primera vez en 1926, siguen siendo los únicos adyuvantes inmunológicos usados en vacunas autorizadas para uso en seres humanos en los Estados Unidos.

Los adyuvantes basados en aluminio son ejemplos de la clase de adyuvante portador que trabaja a través del "efecto depósito" que induce. El antígeno se adsorbe en su superficie y cuando se inyecta la composición, el adyuvante y el antígeno no se dispersan inmediatamente en el torrente sanguíneo - por el contrario la composición persiste en el medio local de la inyección y da como resultado una respuesta inmunitaria más pronunciada. Tales adyuvantes portador tienen la ventaja adicional conocida de ser adecuados para estabilizar antígenos que son propensos a romperse, por ejemplo algunos antígenos polisacáridos.

3D-MPL es un ejemplo de un adyuvante no portador. Su nombre completo es monofosforil lípido A 3-O-desacilado (o monofosforil lípido A 3 des-O-acilado o 3-O-desacil-4' monofosforil lípido A) y se lo nombra como 3D-MPL para indicar que la posición 3 del extremo reductor de glucosamina está des-O-acilado. Véase el documento GB 2220211 A y el documento US4912094 (Myers, Kent R y col.) que describen lipopolisacáridos modificados y procedimiento preparación. Químicamente es una mezcla de monofosforil lípido A 3-desacilado con 4, 5 ó 6 cadenas aciladas. Se preparó originalmente a principios de la década de 1990 cuando el procedimiento para 3-O-desacilar el derivado 4'-monofosforil del lípido A (MPL) dio una molécula con toxicidad más atenuada sin cambio en la actividad inmunoestimulante. Dermody y col., describen la evaluación de monofosforil lípido A como adyuvante de vacuna, para una vacuna glicoconjugada de neumococo multivalente en ratones (FASEB JOURNAL, vol 12 Nº 4, 17 de marzo...

1. Una composición antigénica liofilizada que comprende un polisacárido capsular de Streptococcus pneumoniae del serotipo 6B conjugado con 3D-MPL y sustancialmente desprovista de adyuvante basado en aluminio.

2. La composición antigénica liofilizada de la reivindicación 1 que comprende adicionalmente los conjugados de polisacáridos de neumococo de:

serotipo 4;
serotipo 18C;
serotipo 19F; y
serotipo 23F.

3. La composición antigénica liofilizada de las reivindicaciones 1 ó 2, en la que los polisacáridos capsulares de Streptococcus pneumoniae están conjugados a una proteína seleccionada del grupo constituido por:

toxoide del Tetanos;
OMPC de Neisseria meningitidis;
toxoide de la Difteria;
pneumolisina de Streptococcus pneumoniae, o
CRM197.

4. La composición antigénica de las reivindicaciones 1 ó 2, en la que los polisacáridos capsulares de Streptococcus pneumoniae están conjugados a una proteína D de Haemophilus influenzae.

5. La composición antigénica liofilizada de la reivindicación 1 ó 2, que contiene conjugados de polisacáridos capsulares de Streptococcus pneumoniae de los serotipos 6B, 14, 19F y 23F.

6. La composición antigénica liofilizada de la reivindicación 1, que contiene conjugados de polisacáridos capsulares de Streptococcus pneumoniae de los serotipos 4, 6B, 9V, 14, 18C, 19F y 23F.

7. La composición antigénica liofilizada de la reivindicación 1, que contiene conjugados de polisacáridos capsulares de Streptococcus pneumoniae de los serotipos 1, 3, 4, 5, 6B, 7F, 9V, 14, 18C, 19F y 23F.

8. La composición antigénica liofilizada de la reivindicación 1, que contiene conjugados de polisacáridos capsulares de Streptococcus pneumoniae de los serotipos 1, 3, 4, 5, 6B, 7F, 8, 9V, 12F, 14, 18C, 19F y 23F.

9. La composición antigénica liofilizada de la reivindicación 1, que contiene conjugados de polisacáridos capsulares de Streptococcus pneumoniae de los serotipos 1, 3, 4, 5, 6A, 6B, 7F, 9V, 14, 18C, 19A, 19F y 23F.

10. La composición antigénica liofilizada de la reivindicación 1, que contiene conjugados de polisacáridos capsulares de Streptococcus pneumoniae de los serotipos 1, 2, 3, 4, 5, 6B, 7F, 8, 9N, 9V, 10A, 11A, 12F, 14, 15B, 17F, 18C, 19A, 19F, 20, 22F, 23F, y 33F.

11. La composición antigénica liofilizada de las reivindicaciones 1-10, que es una composición de vacuna.

12. Una composición antigénica que comprende la composición antigénica liofilizada de las reivindicaciones 1-11 reconstituida con un diluyente.

13. Un procedimiento de preparación de una composición antigénica que comprende la etapa de reconstitución de la composición antigénica liofilizada de las reivindicaciones 1-11 con un diluyente.

14. Un uso de la composición antigénica de la reivindicación 1 en la fabricación de un medicamento para la prevención de una enfermedad por neumococo.