Una cepa de Bifidobacterium globosum NCIMB 41198, que puede obtenerse mediante aislamiento de tractogastrointestinal canino extirpado y lavado que tiene actividad probiótica.

Bifidobacteria globosum probiótica canina

Campo de la invención

La presente invención se refiere al campo de los microorganismos probióticos, más específicamente bacterias ácido lácticas probióticas caninas y métodos de uso.

Antecedentes de la invención

Los mecanismos de defensa de protección del tracto gastrointestinal (GI) de mamíferos frente a la colonización por bacterias patógenas son muy complejos. El tracto GI de la mayoría de los mamíferos es colonizado por microflora natural y por microorganismos patógenos invasivos. En un individuo saludable, esta microflora competitiva está en estado de equilibrio. La modificación del equilibrio de la microflora intestinal puede conducir a muchos trastornos GI, o bien prevenirlos, tanto en humanos como en otras especies de mamíferos, tales como animales de compañía, incluyendo gatos, perros y conejos. El bienestar de los animales de compañía está estrechamente relacionado con su alimentación y salud GI, y el mantenimiento del equilibrio de la microflora intestinal en estos animales puede dar como resultado animales domésticos más sanos.

La cantidad y la composición de la microflora intestinal tiende a ser estable, si bien la edad y la dieta la puede modificar. Se considera que la acidez gástrica, la bilis, el movimiento peristáltico intestinal y la inmunidad local son factores importantes de la regulación de la flora bacteriana en el intestino delgado de los seres humanos y de otros diversos mamíferos. A menudo los trastornos GI de los animales domésticos, incluidos los que se encuentran en perros y gatos, están relacionados con un crecimiento bacteriano excesivo y la producción de enterotoxinas mediante bacterias patógenas. Estos factores afectan al equilibrio de la microflora intestinal y pueden producir inflamaciones y enfermedades autoinmunes.

Durante los últimos años la investigación ha comenzado a descubrir algunas cepas valiosas de bacterias y su empleo potencial como agentes probióticos. Los probióticos son preparados de bacterias, viables o muertas, constituyentes de las mismas como, por ejemplo, proteínas o carbohidratos, o bien fracciones purificadas de fermentos bacterianos que estimulan la salud de los mamíferos preservando y promoviendo el desarrollo de la microflora natural del tracto GI y reforzando los controles de enfermedades autoinmunes. Hay quienes consideran que las bacterias probióticas son más eficaces cuando se derivan de la especie del individuo a tratar, o especies estrechamente relacionadas con la misma. Por ello, para su uso en animales de compañía, son necesarias cepas probióticas obtenidas de animales de compañía, diferentes de las que se obtienen de los humanos.

En WO 01/90311 se describen microorganismos probióticos aislados de muestras fecales obtenidas de gatos y perros que tienen actividad probiótica. Sin embargo, dichas bacterias se obtuvieron de muestras fecales y pueden no formar parte de la microflora intestinal natural presente en la parte superior del tracto GI.

Por consiguiente, es necesario proporcionar cepas de bacterias que puedan obtenerse mediante aislamiento de la microflora intestinal natural presente en la parte superior del tracto gastrointestinal que estén adaptadas especialmente para animales de compañía y se hayan seleccionado por sus propiedades probióticas y capacidad para sobrevivir el procesamiento, e incorporar dichas cepas en composiciones que son adecuadas para su uso.

Sumario de la invención

La presente invención se refiere a una cepa de Bifidobacterium globusum NCIMB 41198 que puede obtenerse mediante aislamiento a partir de tracto gastrointestinal canino extirpado y lavado que tiene actividad probiótica.

La presente invención comprende además una composición que comprende una cepa de Bifidobacterium globusum NCIMB 41198 que puede obtenerse aislando tracto gastrointestinal canino extirpado y lavado que tiene actividad probiótica.

Breve descripción de las figuras

La Figura 1 demuestra la inhibición del crecimiento in vitro de Salmonella typhimurium ocasionado por las bacterias Bifidobacteria globosum de la presente invención según la metodología expuesta en el Ejemplo 2.

La Figura 2 demuestra la inhibición del crecimiento in vitro de Listeria monocytogenes por parte de las bacterias Bifidobacteria globosum de la presente invención según la metodología expuesta en el Ejemplo 2.

La Figura 3 demuestra la inhibición del crecimiento in vitro de Listeria innocua por parte de las bacterias Bifidobacteria globosum de la presente invención según la metodología expuesta en el Ejemplo 2.

La Figura 4 demuestra la inhibición del crecimiento in vitro de Escherichia coli 0157H45 por parte de las bacterias Bifidobacteria globosum de la presente invención según la metodología expuesta en el Ejemplo 2.

La Figura 5 demuestra la estabilidad en medio ácido in vitro de las bacterias Bifidobacteria globosum de la presente

invención según la metodología expuesta en el Ejemplo 3. La Figura 6 demuestra las características del crecimiento de las bacterias Bifidobacteria globosum de la presente invención en presencia de sales biliares porcinas en una cantidad de 0, 5%, 1% y 5%.

La Figura 7 demuestra la capacidad in vitro de las bacterias Bifidobacteria globosum de la presente invención para adherirse a células epiteliales estomacales HT-29. Descripción detallada de la invención

Secuencias SEC. n.° 1 – Secuencia de nucleótidos del espaciador intergénico 16s-23s de Bifidobacterias globosum AHCF (NCIMB 41198) .

SEC. n.° 2 – Izquierda 16s-23s PCR secuencia de cebador para secuenciación. SEC. n.° 3 – Derecha 16s-23s PCR secuencia de cebador para secuenciación. Números de depósito bacteriano La tabla siguiente indica que la cepa Bifidobacteria globosum es ilustrativa de la presente invención. La cepa bacteriana

está depositada en National Collections of Industrial Food and Marine Bacteria (NCIMB) , Aberdeen, Reino Unido.

Cepa Número de depósito Secuencia 16s-23s Bifidobacteria globosum AHCF NCIMB 41198 SEC. n.° 1

Todos los pesos, medidas y concentraciones en la presente memoria se miden a 25 °C en la totalidad de la composición, salvo que se indique lo contrario.

Salvo que se indique lo contrario, todos los porcentajes de composiciones referidas en la presente memoria son porcentajes en peso y todas las relaciones son relaciones en peso.

Salvo que se indique lo contrario, todos los pesos moleculares son pesos moleculares promedios en peso.

Excepto en los casos en los que se detallan los valores de medición reales de ejemplos específicos, los valores numéricos a los que se hace referencia en la presente memoria deberán considerarse acompañados por la palabra “aproximadamente”.

En la siguiente descripción la abreviatura UFC (“unidades formadoras de colonias”) designa el número de células bacterianas obtenido por recuento microbiano sobre placas de agar, del modo generalmente entendido en la técnica.

El término “mutantes de los mismos”, tal y como se utiliza en la presente memoria, incluye cepas bacterianas derivadas que tienen al menos 93% de homología, preferiblemente al menos 96% de homología, más preferiblemente 98% de homología con la secuencia polinucleótida del espaciador intergénico 16s-23s de una cepa mencionada, pero que comprende mutaciones de ADN en otras secuencias de ADN en el genoma bacteriano.

Tal como se emplea en la presente memoria, el término “mutaciones de ADN” incluye mutaciones naturales o inducidas que comprenden, como mínimo, alteraciones únicas de base incluyendo supresiones, inserciones, transversiones, y otras modificaciones del ADN conocidas por los expertos en la técnica, incluyendo modificaciones genéticas introducidas en un nucleótido precursor o secuencia de aminoácidos mientras se mantiene, como mínimo, un 50% de homología respecto a la secuencia precursora. Preferiblemente, la secuencia que comprende la mutación o mutaciones de ADN tiene, al menos, 60%, más preferiblemente, al menos, 75%, más preferiblemente aún 85% de homología con la secuencia precursora. Tal como se utiliza en la presente memoria, la “homología” de... [Seguir leyendo]

1. Una cepa de Bifidobacterium globosum NCIMB 41198, que puede obtenerse mediante aislamiento de tracto gastrointestinal canino extirpado y lavado que tiene actividad probiótica.

2. La cepa según la reivindicación 1, para mantener o mejorar la salud de un animal de compañía.

3. La cepa según la reivindicación 2, en donde la cepa se selecciona por su capacidad para sobrevivir y colonizar el tracto gastrointestinal del animal de compañía.

4. La cepa según la reivindicación 2 o reivindicación 3, para tratar uno o más estados seleccionados de la regulación del sistema inmunológico del animal de compañía, mantener o mejorar la salud de la piel y/o sistema de recubrimiento del animal de compañía, mejorar o reducir los efectos del envejecimiento en el animal de compañía, prevenir la pérdida de peso durante y después de infecciones en el animal de compañía, tratar o prevenir la infección gastrointestinal en el animal de compañía, o tratar o prevenir una afección del tracto urinario en el animal de compañía.

5. La cepa según la reivindicación 4, para la regulación del sistema inmunológico del animal de compañía, comprendiendo el tratamiento: tratar o prevenir la enfermedad autoinmune en el animal de compañía, tratar o prevenir inflamaciones en el animal de compañía o mezclas de los mismos.

6. La cepa según la reivindicación 4, para mantener o mejorar la salud de la piel y/o sistema de recubrimiento del animal de compañía, comprendiendo el tratamiento tratar o prevenir la enfermedad atópica de la piel del animal de compañía.

7. La cepa según la reivindicación 4, para tratar o prevenir la infección gastrointestinal en el animal de compañía, comprendiendo el tratamiento mejorar la ecología microbiana del animal de compañía, reducir el nivel de bacterias patógenas en las heces del animal de compañía, y mezclas de los mismos.

8. La cepa según la reivindicación 7, en donde las bacterias patógenas se seleccionan de Clostridia, Escherichia, Salmonella, o mezclas de los mismos.

9. La cepa según la reivindicación 4, para tratar o prevenir una afección del tracto urinario en el animal de compañía, en donde la afección del tracto urinario comprende infección del tracto urinario, piedras en el riñón o mezclas de los mismos.

10. La cepa según la reivindicación 9, en donde el probiótico Bifidobacteria globosum incrementa la degradación de ácido oxálico in vitro.

11. La cepa según cualquiera de las reivindicacione.

4. 10, en donde la cepa se suministra a un animal en una cantidad de 1, 0E+04 a 1, 0E+12 UFC/animal al día.

12. La cepa según cualquiera de las reivindicacione.

4. 10, en donde el animal de compañía es un perro o un gato.

13. Una composición que comprende una cepa según cualquiera de las reivindicaciones anteriores y un vehículo.

14. La composición según la reivindicación 13 en forma de una croqueta, un producto para mascar, una galleta, un suplemento alimentario para animales de compañía, jugo, un producto lácteo, una cápsula, una pastilla o un comprimido.

15. La composición según la reivindicación 13 o la reivindicación 14, que comprende al menos 0, 001% de 1, 0E+04 UFC/g a 1, 0E+12 UFC/g de las bacterias ácido lácticas.

16. La composición según cualquiera de las reivindicaciones 13-15, en donde las bacterias Bifidobacterium globosum están en forma de células viables o de células no viables.