Sal de ácido tartárico de isofagomina (tartrato de isofagomina) con la estructura química representativa siguiente: en donde n es 1 ó 2

Antecedentes de la invención

La enfermedad de Gaucher es un trastorno de almacenamiento de lisosomas que está asociado con la acumulación de glicoesfingolípidos (GSL) en las células, particularmente monocitos y macrófagos, de los individuos afligidos. Esta acumulación aberrante de GSL es resultado de una deficiencia genética (mutación) en el gen que codifica la enzima lisosómica β-glucosidasa ácida (glucocerebrosidasa; GCasa), la hidrolasa lisosómica que descompone la GSL glucosilceramida (GluCer). La mayoría de las mutaciones del gen de glucocerebrosidasa (Gba) hacen que la proteína GCasa se pliegue erróneamente en el retículo endoplásmico (ER). La GCasa plegada erróneamente es reconocida por el sistema de control de calidad del ER y degradada subsiguientemente en lugar de ser procesada y transportada al lisosoma.

La enfermedad de Gaucher es pan-étnica, con una frecuencia global de la enfermedad de aproximadamente 1 en 50.000-100.000 nacimientos. Ciertas poblaciones tienen una prevalencia mayor. En la población de los judíos Ashkenazi, por ejemplo, aproximadamente una de cada 15 personas son portadores de una mutación Gba. De acuerdo con la National Gaucher Foundation, aproximadamente 2500 americanos padecen la enfermedad de Gaucher.

La enfermedad de Gaucher es un trastorno autosómico recesivo y es la enfermedad más común de almacenamiento de lisosomas. La enfermedad se ha clasificado en tres tipos clínicos, dependiendo de la complicación neurológica y la gravedad de la enfermedad. El Tipo 1 es el más común y se caracteriza por ausencia de implicación neurológica. Los pacientes exhiben un amplio espectro de gravedad; algunos pueden permanecer asintomáticos a lo largo de toda su vida. La mayoría de los pacientes del Tipo 1 exhiben engrosamiento del bazo y el hígado, anormalidades esqueléticas y lesiones óseas, así como reacciones inflamatorias prolongadas. Los niveles de glucocerobrósidos hepáticos se elevan desde 23 veces a 389 veces por encima de los niveles normales en los pacientes Gaucher de Tipo 1.

La enfermedad de Gaucher Tipo 2 es la forma más rara y más grave. Está asociada con una aparición temprana de enfermedad neurológica aguda. El rasgo característico de la enfermedad de Gaucher neuronopática es una anormalidad de mirada horizontal fija. Los pacientes afligidos contraen encefalopatía progresiva y síntomas extrapiramidales tales como rigidez y movimientos semejantes al Parkinson (parkinsonismo). La mayoría de los pacientes de la enfermedad de Gaucher Tipo 2 mueren en la infancia temprana de apnea o aspiración debida a deterioro neurológico.

La enfermedad de Gaucher Tipo 3 tiene también implicación neurológica, aunque en menor grado que el Tipo 2. Estos pacientes presentan también los defectos de hepatoesplenomegalia y esqueléticos característicos del Tipo 1, así como síntomas del sistema nervioso central que incluyen mala coordinación de los movimientos (ataxia), ataques, parálisis de los músculos oftálmicos, epilepsia, y demencia). Los pacientes con enfermedad de Gaucher Tipo 3 pueden vivir hasta la edad adulta, pero pueden tener una duración de vida acortada. Se han consignado tres sub-clasificaciones del Tipo 3: Tipo 3a, que está asociado con hepatoesplenomegalia prominente y enfermedad de la médula ósea; Tipo 3b, que está asociado con síntomas sistémicos limitados; y Tipo 3c, que está asociado con hepatoesplenomegalia, opacidades corneales, ataxia y demencia progresivas, y calcificación de las válvulas cardíacas y la raíz aórtica.

Los métodos para el tratamiento de la enfermedad de Gaucher incluyen terapia de reemplazamiento enzimático (ERT), trasplantes de médula ósea (BMT), terapia de reducción de sustrato (SRT), terapia génica, y tratamiento farmacológico con chaperonas. La isofagomina es un inhibidor potente de la β-glucosidasa (GCasa) ácida humana recombinante. Métodos farmacológicos de chaperonas para intensificación de las actividades de las enzimas mutantes en los trastornos de almacenamiento de lisosomas que utilizan inhibidores enzimáticos tales como isofagomina se describen en las Patentes U.S. del mismo propietario 6.916.829; 6.599.919; 3.589.964; 6.583.158 y 7.141.582, cada una de las cuales se incorpora en esta memoria por referencia en su totalidad. Por ejemplo, se ha demostrado que la adición de un inhibidor de GCasa a un medio de cultivo de fibroblastos conduce a una intensificación en la actividad de transporte y lisosómica de GCasa, indicando que dicho inhibidor puede presentar interés terapéutico en el tratamiento de la enfermedad de Gaucher.

Se ha descubierto recientemente que existe un enlace entre las mutaciones en el gen Gba y la enfermedad de Parkinson. En un estudio, se encontró que un grupo de 17 pacientes con Parkinsonismo raro, de comienzo precoz, y resistente al tratamiento tenían al menos un alelo con una mutación Gba de sentido erróneo, incluyendo individuos homocigóticos y heterocigóticos para N370S, una mutación asociada típicamente con la enfermedad noneuronopática Tipo 1 (Tayebi et al., Mol. Genet. Metab. 2003; 79; 104-109). En otro estudio, se evaluó una población de 99 judíos Ashkenazi con enfermedad de Parkinson idiopática se evaluaron respecto a seis mutaciones de Gba (N370S, L444P, 84GG, V394L y R496H). Treinta y un pacientes de Parkinson tenían uno o dos alelos Gba mutantes: 23 eran heterocigóticos para N1370S; 3 eran homocigóticos para W370S; 4 eran heterocigóticos para 84GG, y 1 era heterocigótico para R496H (Aharon-Perezt et al., New Engl. J. Med. 2004; 351: 1972-77). La frecuencia de un alelo N370S mutante era 5 veces la existente entre 1573 individuos normales, y la de 84GG era 21 veces la de los

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individuos normales. Entre los pacientes con enfermedad de Parkinson, los pacientes que llevaban una mutación Gba eran también más jóvenes que aquéllos que no eran portadores. Este estudio sugiere que la heterocigosidad para una mutación Gba puede predisponer a los judíos Ashkenazi a la enfermedad de Parkinson. Dado que se ha demostrado que la isofagomina atraviesa la barrera hematoencefálica en animales y aumenta la actividad tanto de la GCasa mutante como de la de tipo salvaje, la misma puede utilizarse para tratar tanto a los pacientes de Parkinson que tienen una mutación heterocigótica en GCasa, como a los que se encuentran en riesgo de contraer enfermedad de Parkinson debido a otros factores, pero que pueden beneficiarse de los niveles incrementados de GCasa de tipo salvaje.

Aunque el compuesto de isofagomina es un inhibidor potente y selectivo de la β-glucosidasa (GCasa) ácida humana recombinante, su uso en productos farmacéuticos tiene que hacer frente a varios retos. Por ejemplo, la sal hidrocloruro de isofagomina (isofagomina.HCl) se describe en la Patente U.S. 5.844.102. Sin embargo, la isofagomina-HCl así como la base libre de isofagomina no se purifican fácilmente en gran escala y tienen propiedades deficientes en estado sólido para uso en procesos de fabricación y formulaciones farmacéuticas a escala industrial.

Sumario de la invención

En una realización, la presente invención proporciona una sal de ácido tartárico de isofagomina o tartrato de isofagomina, representada por la estructura química siguiente:

**(Ver fórmula)**

en donde n es 1 o 2. La invención proporciona también tartrato de isofagomina con alta pureza y en forma cristalina.

En otra realización, la invención proporciona una composición que contiene tartrato de isofagomina, preferiblemente al menos 50%, preferiblemente 90%, y aún más preferiblemente, 99%. La invención proporciona también una composición que contiene al menos 90% o más de tartrato de isofagomina en donde 90% del tartrato de isofagomina tiene un tamaño de partícula de 1200 µm.

En otra realización, la invención proporciona una composición farmacéutica que contiene tartrato de isofagomina y uno o más excipientes farmacéuticamente aceptables.

En otra realización, la invención proporciona un método para la preparación de un tartrato de isofagomina. se proporciona también Un método para preparar un tartrato de isofagomina altamente purificado.

Todavía en otra realización, la invención proporciona el uso de un compuesto de la presente invención para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de la enfermedad de Gaucher.

En otra realización, la invención proporciona la sal del ácido L-(+)-tartárico de isofagomina. La invención proporciona también un complejo de ácido... [Seguir leyendo]

1. Sal de ácido tartárico de isofagomina (tartrato de isofagomina) con la estructura química representativa siguiente:

**(Ver fórmula)**

en donde n es 1 ó 2.

10 2. Tartrato de isofagomina de la reivindicación 1, en donde la pureza es al menos 50%.

3. Tartrato de isofagomina de la reivindicación 1, en donde la pureza es al menos 95%.

4. Tartrato de isofagomina de la reivindicación 1, en donde la pureza es al menos 98%.

5. Tartrato de isofagomina de la reivindicación 1, en donde la pureza es al menos 99%.

6. Tartrato de isofagomina de la reivindicación 1, en donde n = 1.

20 7. Tartrato de isofagomina de la reivindicación 1, en donde n = 2.

8. Tartrato de isofagomina de la reivindicación 1, en donde el tartrato de isofagomina es la sal del ácido L-(+)tartárico de isofagomina y n = 1.

25 9. Una composición que comprende tartrato de isofagomina de la reivindicación 1, en donde la composición contiene al menos 50% en peso de tartrato de isofagomina.

10. La composición de la reivindicación 8, en donde la composición contiene al menos 90% en peso de tartrato de isofagomina.

11. La composición de la reivindicación 10, en donde 90% o más del tartrato de isofagomina tiene un tamaño de partícula de 1200 μm o menos.

12. La composición de la reivindicación 8, en donde la composición contiene al menos 99% en peso de tartrato 35 de isofagomina.

13. Un método para la preparación de tartrato de isofagomina que comprende:

(a) hacer reaccionar isofagomina base libre o su forma ionizada y ácido tartárico en un disolvente; y

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(b) aislar el tartrato de isofagomina.

14. El método de la reivindicación 13, en donde el ácido tartárico es ácido L-(+)-tartárico. 45 15. El método de la reivindicación 13, en donde se forma al menos un kilogramo de tartrato de isofagomina.

16. El método de la reivindicación 13, en donde el disolvente es alcohol acuoso.

17. El método de la reivindicación 13, en donde el alcohol se selecciona de metanol, etanol, propanoles, buta50 noles o mixturas de los mismos.

18. El método de la reivindicación 13, en donde el alcohol es etanol.

19. El método de la reivindicación 13, en donde el paso de tratamiento incluye recristalización.

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20. El método de la reivindicación 19, en donde 90% o más del tartrato de isofagomina tiene un tamaño de partícula de 1200 μm o menos.

21. El método de la reivindicación 19, en donde la recristalización se realiza en agua con ayuda de un disolvente secundario.

22. El método de la reivindicación 19, en donde el disolvente secundario es un disolvente prótico.

23. El método de la reivindicación 19, en donde el disolvente prótico es un alcohol.

24. Un método para preparar tartrato de isofagomina de alta pureza en escala industrial, comprendiendo el método:

(a) hacer reaccionar aproximadamente 1 kg de isofagomina base libre o su forma ionizada y ácido tartárico en un disolvente;

(b) obtener un tartrato de isofagomina bruto;

(c) recristalizar el tartrato de isofagomina bruto utilizando una solución acuosa; y

(d) aislar el tartrato de isofagomina de alta pureza.

25. El método de la reivindicación 24 en donde la solución acuosa es agua.

26. El método de la reivindicación 24, en donde la solución acuosa es una mixtura de agua y un alcohol en donde el agua y el alcohol se utilizan al mismo tiempo o con un intervalo.

27. El método de la reivindicación 24, en donde la alta pureza es al menos 84% de pureza en peso.

28. El método de la reivindicación 24, en donde la alta pureza es al menos 98% de pureza en peso.

29. El método de la reivindicación 24, en donde la alta pureza es al menos 99% de pureza en peso.

30. El método de la reivindicación 24, en donde 90% o más del tartrato de isofagomina de alta pureza tiene un tamaño de partícula de 1200 μm o menos.

31. Una composición farmacéutica que comprende una cantidad farmacéuticamente eficaz de tartrato de isofagomina de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-8 y un excipiente farmacéuticamente aceptable.

32. La composición farmacéutica de la reivindicación 31 en donde la cantidad farmacéuticamente eficaz está comprendida entre aproximadamente 5 y 300 mg por dosis.

33. La composición farmacéutica de la reivindicación 31 en donde la cantidad farmacéuticamente eficaz está comprendida entre aproximadamente 10 y 100 mg por dosis.

34. La composición farmacéutica de la reivindicación 31 en donde el excipiente farmacéuticamente aceptable es celulosa microcristalina, estearato de magnesio, o fosfato de calcio dibásico.

35. La composición farmacéutica de la reivindicación 31 en donde el tartrato de isofagomina se encuentra en forma cristalina.

36. Tartrato de isofagomina cristalino, que tiene un patrón de difracción de rayos x en polvo que incluye los picos siguientes: (2 theta) 9,29, 14,17, 16,34, 18,07, 18,72, 19,44, 20,56, 22,13, 23,01, 24,54, y 27,12.

37. Uso de una cantidad eficaz de tartrato de isofagomina, para la fabricación de un medicamento para tratamiento de la enfermedad de Gaucher.

38. El uso de la reivindicación 37, en donde el tartrato de isofagomina contiene no más de 5% de otro compuesto.

39. El uso de la reivindicación 37, en donde el medicamento comprende además una enzima glucocerebrosidasa funcional.

40. El uso de la reivindicación 37, en donde la cantidad eficaz del tartrato de isofagomina es aproximadamente 10-100 mg por dosis.

5 41. Una sal farmacéuticamente aceptable de ácido tartárico de isofagomina de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-8, en donde la sal farmacéuticamente aceptable se recristaliza fácilmente en escala de 1 kg o más utilizando una solución acuosa.

42. Tartrato de isofagomina de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-8 para uso en el tratamiento de 10 la enfermedad de Gaucher.