INHIBIDORES MACROCÍCLICOS DEL VIRUS DE LA HEPATITIS C.

Un compuesto que tiene la fórmula **Fórmula** un N-óxido, sal,

o estereoisómero del mismo, en donde cada línea de trazos (representada por - - - - -) representa un enlace doble opcional; X es N, CH y donde X lleva un enlace doble, es C; R1 es -OR7, -NH-SO2R8; R2 es hidrógeno, y donde X es C o CH, R2 puede ser también C1-6alquilo; R3 es hidrógeno, C1-6alquilo, C1-6alcoxiC1-6alquilo, C3-7cicloalquilo; R4 es arilo o Het; n es 3, 4, 5, ó 6; R5 representa halo, C1-6alquilo, hidroxi, C1-6alcoxi, polihaloC1-6alquilo, fenilo, o Het; R6 representa C1-6alcoxi, mono- o diC1-6alquilamino; R7 es hidrógeno; arilo; Het; C3-7cicloalquilo sustituido opcionalmente con C1-6alquilo; o C1-6alquilo sustituido opcionalmente con C3-7cicloalquilo, arilo o con Het; R8 es arilo; Het; C3-7cicloalquilo sustituido opcionalmente con C1-6alquilo; o C1-6alquilo sustituido opcionalmente con C3-7cicloalquilo, arilo o con Het; arilo como grupo o parte de un grupo es fenilo sustituido opcionalmente con 1, 2 ó 3 sustituyentes seleccionados de halo, hidroxi, nitro, ciano, carboxilo, C1-6alquilo, C1-6alcoxi, C1-6alcoxiC1-6alquilo, C1-6alquilcarbonilo, amino, mono- o di-C1-6alquilamino, azido, mercapto, polihaloC1-6alquilo, polihaloC1-6alcoxi, C3-7cicloalquilo, pirrolidinilo, piperidinilo, piperazinilo, 4-C1-6alquilpiperazinilo, 4-C1-6alquilcarbonilpiperazinilo, y morfolinilo; en donde los grupos morfolinilo y piperidinilo pueden estar sustituidos opcionalmente con uno o con dos radicales C1-6alquilo; Het como grupo o parte de un grupo es un anillo heterocíclico de 5 ó 6 miembros, saturado, parcialmente insaturado o completamente insaturado que contiene 1 a 4 heteroátomos seleccionados cada uno independientemente de nitrógeno, oxígeno y azufre, estando dicho anillo heterocíclico condensado opcionalmente con un anillo de bence no;estando dicho Het sustituido opcionalmente como un todo con 1, 2 ó 3 sustituyentes seleccionados cada uno independientemente del grupo constituido por halo, hidroxi, nitro, ciano, carboxilo, C1-6alquilo, C1-6alcoxi, C1-6alcoxiC1-6alquilo, C1-6alquilcarbonilo, amino, mono- o di-C1-6alquilamino, azido, mercapto, polihaloC1- 6alquilo, polihaloC1-6alcoxi, C3-7cicloalquilo, pirrolidinilo, piperidinilo, piperazinilo, 4-C1-6alquilpiperazinilo, 4-C1-6alquilcarbonilpiperazinilo y morfolinilo; en donde los grupos morfolinilo y piperidinilo pueden estar sustituidos opcionalmente con uno o con dos radicales C1-6alquilo

La presente invención se refiere a compuestos macrocíclicos que tienen actividad inhibidora sobre la replicación del virus de la hepatitis C (HCV). La misma concierne adicionalmente a composiciones que comprenden estos compuestos como ingredientes activos así como procesos para la preparación de estos compuestos y composiciones.

El virus de la hepatitis C es la causa principal de enfermedad hepática crónica en todo el mundo y se ha convertido en un foco de investigación médica considerable. El HCV es un miembro de la familia de virus Flaviviridae en el género hepacivirus, y está estrechamente relacionado con el género flavivirus, que incluye cierto número de virus implicados en enfermedades humanas, tales como virus del dengue y el virus de la fiebre amarilla, y con la familia de pestivirus animales, que incluye el virus de la diarrea viral de los bovinos (BVDV). El HCV es un virus de RNA monocatenario de sentido positivo, con un genoma de alrededor de 9600 bases. El genoma comprende regiones no traducidas 5' y 3' que adoptan estructuras de RNA secundarias, y un marco de lectura abierta central que codifica una sola poliproteína de alrededor de 3010-3030 aminoácidos. La poliproteína codifica 10 productos génicos que se generan a partir de la poliproteína precursora por una serie orquestada de escisiones endoproteolíticas co- y post-traduccionales medidas por proteasas tanto del hospedador como virales. Las proteínas estructurales virales incluyen la proteína de la nucleocápsida central, y dos glicoproteínas E1 y E2 de la envoltura. Las proteínas no estructurales (NS) codifican ciertas funciones enzimáticas virales esenciales (helicasa, polimerasa, proteasa), así como proteínas de función desconocida. La replicación del genoma viral está mediada por una RNA-polimerasa dependiente de RNA, codificada por una proteína no estructural 5b (NS5B). Además de la función de polimerasa, se ha demostrado que las funciones de helicasa viral y proteasa, codificadas ambas en la proteína NS3 bifuncional, son esenciales para la replicación del RNA de HCV. Además de la serina-proteasa NS3, el HCV codifica también una metaloproteinasa en la región NS2.

Después de la infección aguda inicial, una mayoría de individuos infectados desarrollan hepatitis crónica dado que el HCV se replica preferentemente en los hepatocitos pero no es directamente citopático. En particular, la falta de una respuesta enérgica de los linfocitos T y la alta propensión del virus a mutar parecen promover una tasa elevada de infección crónica. La hepatitis crónica puede progresar a fibrosis hepática que conduce a su vez a cirrosis, enfermedad hepática de etapa final, y HCC (carcinoma hepatocelular), convirtiéndola en la causa líder de los trasplantes de hígado.

Existen 6 genotipos principales de HCV y más de 50 subtipos, que están distribuidos geográficamente de modo diferente. El HCV tipo 1 es el genotipo predominante en Europa y en los Estados Unidos. La extensiva heterogeneidad genética del HCV tiene implicaciones diagnósticas y clínicas importantes, explicando quizás las dificultades en el desarrollo de vacunas y la falta de respuesta a la terapia.

**(Ver fórmula)**

La transmisión del HCV puede ocurrir por contacto con sangre o productos de sangre contaminados, por ejemplo después de transfusiones de sangre o uso de fármacos intravenosos. La introducción de tests de diagnóstico utilizados en la selección de sangre ha conducido a una tendencia decreciente en la incidencia del HCV post-transfusión. Sin embargo, dada la lenta progresión a la enfermedad hepática de etapa final, las infecciones existentes continuarán presentando una carga médica y económica importante durante décadas.

Las terapias actuales del HCV están basadas en interferón alfa (IFN-α) (pegilado) en combinación con ribavirina. Esta terapia de combinación proporciona una respuesta virológica sostenida en más del 40% de los pacientes infectados por los virus del genotipo 1 y aproximadamente 80% de los infectados por los genotipos 2 y 3. Además de la eficacia limitada sobre el HCV tipo 1, esta terapia de combinación tiene efectos secundarios importantes y es deficientemente tolerada en muchos pacientes. Los efectos secundarios principales incluyen síntomas parecidos a la gripe, anormalidades hematológicas, y síntomas neuropsiquiátricos. Por tanto existe necesidad de tratamientos más eficaces, cómodos y mejor tolerados.

Recientemente, dos inhibidores peptidomiméticos de la proteasa del HCV han ganado atención como candidatos clínicos, a saber BILN-2061 descrito en WO 00/59929 y VX-950 descrito en WO 03/87092. Cierto número de inhibidores similares de la proteasa del HCV han sido descritos también en la bibliografía académica y de patentes. Se ha puesto de manifiesto que la administración sostenida de BILN-2061 o VX-950 selecciona mutantes de HCV que son resistentes al fármaco respectivo, denominados mutantes de escape de fármaco. Estos mutantes de escape de fármaco tienen mutaciones características en el genoma de la proteasa del HCV, particularmente D168V, D168A y/o A156S. De acuerdo con ello, se requieren fármacos adicionales con patrones de resistencia diferentes para proporcionar opciones de tratamiento a los pacientes que fallan, y es probable que la terapia de combinación con fármacos múltiples sea la norma en el futuro, incluso para tratamiento de primera línea.

La experiencia con los fármacos del HIV, y en particular los inhibidores de la proteasa de HIV, ha puesto de manifiesto ulteriormente que la farmacocinética subóptima y los regímenes de dosificación complejos dan rápidamente como resultado fallos de acatamiento involuntarios. Esto significa a su vez que la concentración valle de 24 horas (concentración mínima en plasma) para los fármacos respectivos en un régimen de HIV cae frecuentemente por debajo del umbral CI90 o DE90 durante largas partes del día. Se considera que un nivel valle de 24 horas de al menos la CI50, y más realísticamente, la CI90 o DE90, es esencial para ralentizar el desarrollo de mutantes de escape de fármaco.

**(Ver fórmula)**

La consecución de la farmacocinética necesaria y el metabolismo de los fármacos para permitir tales niveles valle constituyen un reto difícil para el diseño de fármacos. La naturaleza peptidomimética fuerte de los inhibidores de la proteasa del HCV de la técnica anterior, con enlaces peptídicos múltiples, plantea dificultades farmacocinéticas para regí

5 menes de dosificación eficaces.

Existe necesidad de inhibidores de HCV que puedan contrarrestar las desventajas de la terapia actual de HCV tales como efectos secundarios, eficacia limitada, la emergencia de resistencia, y los fallos de cumplimiento.

La presente invención concierne a inhibidores del HCV que son superiores en una o más de las propiedades afines farmacológicas siguientes, a saber potencia, citotoxicidad reducida, farmacocinética mejorada, perfil mejorado de resistencia, dosificación aceptable y carga de píldoras.

Adicionalmente, los compuestos de la presente invención tienen peso molecular relativamente bajo y son fáciles de sintetizar, partiendo de materias primas que están disponi15 bles comercialmente o están fácilmente disponibles por procedimientos de síntesis

conocidos en la técnica.

WO 05/010029 describe inhibidores de la serina-proteasa aza-peptídica macrocíclica de la hepatitis C, composiciones farmacéuticas que comprenden los compuestos arriba mencionados para administración a un individuo que sufre infección por HCV, y métodos de

20 tratamiento de una infección por HCV en un individuo por administración de una composición farmacéutica que comprende dichos compuestos. La presente invención concierne a inhibidores de la replicación del HCV, que pueden representarse por la fórmula (I):

**(Ver fórmula)**

y los N-óxidos, sales, y estereoisómeros de los mismos, en donde cada línea de trazos (representada por - - - - -) representa un enlace doble opcional;

**(Ver fórmula)**

1. Un compuesto que tiene la fórmula

**(Ver fórmula)**

5

un N-óxido, sal, o estereoisómero del mismo, en donde cada línea de trazos (representada por - - - - -) representa un enlace doble opcional; X es N, CH y donde X lleva un enlace doble, es C; R1 es -OR7, -NH-SO2R8;

10 R2 es hidrógeno, y donde X es C o CH, R2 puede ser también C1-6alquilo; R3 es hidrógeno, C1-6alquilo, C1-6alcoxiC1-6alquilo, C3-7cicloalquilo; R4 es arilo o Het; n es 3, 4, 5, ó 6; R5 representa halo, C1-6alquilo, hidroxi, C1-6alcoxi, polihaloC1-6alquilo, fenilo, o Het;

15 R6 representa C1-6alcoxi, mono- o diC1-6alquilamino; R7 es hidrógeno; arilo; Het; C3-7cicloalquilo sustituido opcionalmente con C1-6alquilo; o C1-6alquilo sustituido opcionalmente con C3-7cicloalquilo, arilo o con Het; R8 es arilo; Het; C3-7cicloalquilo sustituido opcionalmente con C1-6alquilo; o C1-6alquilo sustituido opcionalmente con C3-7cicloalquilo, arilo o con Het;

20 arilo como grupo o parte de un grupo es fenilo sustituido opcionalmente con 1, 2 ó 3 sustituyentes seleccionados de halo, hidroxi, nitro, ciano, carboxilo, C1-6alquilo, C1-6alcoxi, C1-6alcoxiC1-6alquilo, C1-6alquilcarbonilo, amino, mono- o di-C1-6alquilamino, azido, mercapto, polihaloC1-6alquilo, polihaloC1-6alcoxi, C3-7cicloalquilo, pirrolidinilo, piperidinilo, piperazinilo, 4-C1-6alquilpiperazinilo, 4-C1-6alquilcarbonilpiperazinilo, y morfolinilo;

25 en donde los grupos morfolinilo y piperidinilo pueden estar sustituidos opcionalmente con uno o con dos radicales C1-6alquilo;

**(Ver fórmula)**

Het como grupo o parte de un grupo es un anillo heterocíclico de 5 ó 6 miembros, saturado, parcialmente insaturado o completamente insaturado que contiene 1 a 4 heteroátomos seleccionados cada uno independientemente de nitrógeno, oxígeno y azufre, estando dicho anillo heterocíclico condensado opcionalmente con un anillo de bence

5 no; estando dicho Het sustituido opcionalmente como un todo con 1, 2 ó 3 sustituyentes seleccionados cada uno independientemente del grupo constituido por halo, hidroxi, nitro, ciano, carboxilo, C1-6alquilo, C1-6alcoxi, C1-6alcoxiC1-6alquilo, C1-6alquilcarbonilo, amino, mono- o di-C1-6alquilamino, azido, mercapto, polihaloC1-6alquilo, polihaloC1-6alcoxi, C3-7cicloalquilo, pirrolidinilo, piperidinilo, piperazinilo,

10 4-C1-6alquilpiperazinilo, 4-C1-6alquilcarbonilpiperazinilo y morfolinilo; en donde los grupos morfolinilo y piperidinilo pueden estar sustituidos opcionalmente con uno o con dos radicales C1-6alquilo.

2. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, en el cual el compuesto tiene la fórmula (I-c), (I-d), o (I-e):

3. Un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1-2, en el cual R4 se selecciona del grupo constituido por fenilo, piridin-4-ilo,

**(Ver fórmula)**

**(Ver fórmula)**

**(Ver fórmula)**

**(Ver fórmula)**

en donde R4a es, independientemente en cada caso, hidrógeno, halo, C1-6alquilo, amino, o mono- o di-C1-6alquilamino.

4. Un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1-3, en donde 10 R5 es metilo, etilo, isopropilo, terc-butilo, fluoro, cloro, o bromo; y R6 es metoxi.

5. Un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1-4, en donde

(a) R1 es -OR7, en donde R7 es C1-6alquilo o hidrógeno;

(b) R1 es -NHS(=O)2R8, en donde R8 es metilo, ciclopropilo, o fenilo; o

(c) R1 es -NHS(=O)2R8, en donde R8 es ciclopropilo sustituido con metilo.

15 6. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 5, en donde R1 es -NHS(=O)2R8, en donde R8 es metilo, ciclopropilo, o fenilo.

7. Un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1-6, en donde n es 4 ó 5.

8. Un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1-7, en donde n es 4.

9. Un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1-8, en donde R3 es hidrógeno o C1-6alquilo.

10. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 9, en donde R3 es hidrógeno o metilo.

11. Un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1-2, en donde R6 es un radical

**(Ver fórmula)**

**(Ver fórmula)**

en donde, en caso posible, un nitrógeno puede llevar un sustituyente R4a o un enlace con el resto de la molécula; cada R4a en cualquiera de los sustituyentes R4 puede seleccionarse de los mencionados como posibles sustituyentes en Het, como se especifica en la reivindicación 1.

12. Un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1-2, en donde R4 se selecciona del grupo constituido por:

**(Ver fórmula)**

en donde cada R4a es hidrógeno, halo, C1-6alquilo, amino, o mono- o di-C1-6alquilamino, pirrolidinilo, piperidinilo, morfolinilo, piperazinilo, 4-C1-6alquilpiperazinilo; y en donde los grupos morfolinilo y piperidinilo pueden estar sustituidos opcionalmente con uno o dos radicales C1-6alquilo.

13. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 12, en donde en los radicales (q-1), (q-2), (q-3) o (q-4) cada R4a es independientemente hidrógeno, halo, C1-6alquilo, amino, o mono- o di-C1-6alquilamino.

14. Un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1-13, en donde R6 es metoxi.

15. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, en donde el compuesto tiene la estructura

16. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 15, en donde R2 es hidrógeno y existe un enlace doble entre los átomos de carbono 7 y 8.

17. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 en donde el compuesto de fórmula imagen8

**(Ver fórmula)**

(I) es:

**(Ver fórmula)**

18. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, en donde el compuesto de fórmula 10 (I) es:

**(Ver fórmula)**

19. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, en donde el compuesto de fórmula

(I) es:

**(Ver fórmula)**

20. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, en donde el compuesto de fórmula

(I) es:

**(Ver fórmula)**

21. Un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-20 distinto de un N-óxido, o una sal.

22. Un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-21 distinto de un N-óxido.

23. Una combinación que comprende

(a) un compuesto como se define en una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 22 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y

(b) ritonavir, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

24. Una combinación que comprende

(a) un compuesto como se define en una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 22 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo; y

(b) interferón-alfa, interferón-alfa pegilado y/o ribavirina.

25. Una composición farmacéutica que comprende un vehículo, y como ingrediente activo una cantidad antiviralmente eficaz de un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1-22 o una combinación de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 23-24.

26. Un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-22 o una combinación de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 23-24, para uso como medicamento.

27. Un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-22 o una combinación de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 23-24, para inhibición de la replicación del HCV.

28. Un proceso para preparación de un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-22, en donde dicho proceso comprende:

(a) preparar un compuesto de fórmula (I) en donde el enlace entre C7 y C8 es un enlace doble, que es un compuesto de fórmula (I-i), por formación de un enlace doble entre C7 y C8, en particular por una reacción de metátesis de olefinas, con ciclación concomitante al macrociclo como se reseña en el esquema de reacción siguiente:

(b) convertir un compuesto de fórmula (I-i) en un compuesto de fórmula (I) en donde el enlace entre C7 y C8 en el macrociclo es un enlace simple, es decir un compuesto de fórmula (Ij):

**(Ver fórmula)**

en donde en los esquemas de reacción anteriores y siguientes R9 representa un radical

**(Ver fórmula)**

**(Ver fórmula)**

10 por una reducción del enlace doble C7-C8 en los compuestos de fórmula (I-j);

(c) preparar un compuesto de fórmula (I) en donde R1 representa -NHSO2R8, representándose dichos compuestos por la fórmula (I-k-1), por formación de un enlace amida entre un compuesto intermedio (2a) y una sulfonilamina (2b), o preparar un compuesto de fórmula (I) en donde R1 representa -OR7, es decir un compuesto (I-k-2), por formación de un enlace

15 éster entre un compuesto intermedio (2a) y un alcohol (2c) como se reseña en el esquema siguiente en el que G representa un grupo:

**(Ver fórmula)**

(d) preparar un compuesto de fórmula (I) en donde R3 es hidrógeno, representándose dicho compuesto por (I-1), a partir de un compuesto intermedio correspondiente protegido en el nitrógeno (3a), en donde PG representa un grupo protector de nitrógeno:

**(Ver fórmula)**

(e) hacer reaccionar un compuesto intermedio (4a) con un compuesto intermedio (4b) como 10 se reseña en el esquema de reacción siguiente:

**(Ver fórmula)**

en donde Y en (4b) representa hidroxi o un grupo lábil; y donde Y representa hidroxi la reacción de (4a) con (4b) es una reacción de Mitsunobu; y donde Y representa un grupo lábil la reacción de (4a) con (4b) es una reacción de sustitución;

(f) convertir compuestos de fórmula (I) unos en otros por una reacción de transformación de grupos funcionales; o

(g) preparar una forma de sal por reacción de la forma libre de un compuesto de fórmula (I) con un ácido o una base.