FAMILIA DE PROTEÍNAS DE CITOQUINAS.

Uso de un polipéptido aislado para la fabricación de un medicamento para tratar la hepatitis B o C,

donde dicho polipéptido comprende una secuencia de aminoácidos que tiene una identidad de al menos 80%, con los restos de aminoácidos 22 a 205 de SEQ ID NO:2

La diferenciación celular de los organismos multicelulares está controlada por hormonas y factores de crecimiento polipeptídicos. Estas molécula difundibles permiten a las células comunicarse entre sí y actúan en concierto para formar tejidos y órganos, y para reparar y regenerar el tejido dañado. Los ejemplos de las hormonas y los factores de crecimiento incluyen las hormonas esteroides, la hormona paratiroidea, la hormona estimuladora del folículo, los interferones, las interleuquinas, el factor de crecimiento derivado de plaquetas, el factor de crecimiento epidérmico, y el factor estimulador de las colonias de granulocitos-macrófagos, entre otros.

10 Las hormonas y los factores de crecimiento influyen en el metabolismo celular uniéndose a proteínas receptoras. Ciertos receptores son proteínas integrantes de la membrana que se unen con la hormona o el factor de crecimiento en el exterior de la célula, y que están conectados a rutas de señalización en el interior de la célula, tales como los sistemas de segundos mensajeros. Otras clases de receptores son las

15 moléculas intracelulares solubles. Las citoquinas estimulan generalmente la proliferación o diferenciación de células del linaje hematopoyético o participan en los mecanismos de respuesta inmunitaria o inflamatoria del organismo. Los ejemplos de las citoquinas que afectan a la hematopoyesis son la eritropoyetina (EPO), que estimula el desarrollo de glóbulos rojos; la trombopoyetina (TPO), que estimula el desarrollo de células del linaje de los megacariocitos; y el factor estimulador de las colonias de granulocitos (G-CSF), que estimula el desarrollo de los neutrófilos. Estas citoquinas son útiles en la restauración de los niveles normales de glóbulos rojos en pacientes que padecen anemia, trombocitopenia, y neutropenia o que reciben quimioterapia para el cáncer.

25 Las citoquinas juegan importantes papeles en la regulación de la hematopoyesis y las respuestas inmunitarias, y pueden influir en el desarrollo de linfocitos. La familia de citoquinas de clase II humanas incluye los subtipos de interferón-º (IFN-º), interferón-κ (IFN-κ), interferón-º (INF-º), IL-10, IL-19 (Patente de los Estados Unidos 5.985.614), MDA-7 (Jiang et al., Oncogene 11, 2477-2486, (1995)), IL-20 (Jian et al., Oncogene 11, 2477-2486, (1995)), IL-22 (Xie et al., J. Biol. Chem. 275, 31335-31339, (2000)), y AK-155 (Knappe et al., J. Virol. 74, 3881-3887, (2000). La mayoría de las citoquinas se unen a y transducen señales por medio de los receptores de citoquinas de Clase I o de Clase II. Los miembros de la familia de receptores de citoquinas de clase II humanos incluyen el interferón-ºR1 (IFN-ºR1), el interferón º-R2 (IFN-º-R2), el interferón-º R1 (IFN-º R1), el interferón-ºR2 (IFN-ºR2), la IL-10R (Liu et al., J. Immunol, 152, 1821-1829, (1994)), el CRF2-4 (Lutfalla et al., Genomics 16, 366-373, (1993)), IL-20Rκ (Blumberg et al., Cell 104, 9-19,(2001)) (también conocido como zcytor7 (Patente de los Estados Unidos 5.945.511) y CRF2-8 (Kotenko et al., Oncogene 19, 2557-2565, (2000)), IL-20Rκ (Blumberg et al., ídem.,

(2001)) (también conocido como DIRS1 (Publicación PCT WO 99/46379)), IL-22RA1 (IL-22 receptor º1, sometido a HUGO para su aprobación) (también conocido como IL22R (Xie et al., J. Biol. Chem. 275, 31335-31339, (2000)), zcytor II (Patente de los Estados Unidos 5.965.704) y CRF2-9 (Kotenko et al., Oncogene 19, 2257-2565, (2000)), y el factor tisular.

10 Los receptores de citoquinas de clase II son típicamente heterodímeros compuestos por dos cadenas receptoras distintas, las subunidades del receptor º y κ (Stahl et al., Cell 74, 587-590, (1993)). En general, las subunidades º son las proteínas de unión a citoquinas primarias, y las subunidades κ se requieren para la formación de sitios de unión de alta afinidad, así como para la transducción de la

15 señal. Una excepción es el receptor de IL-20 en el cual ambas subunidades son requeridas para la unión de IL-20 (Blumberg et al., ídem, (2001)). Los receptores de citoquinas de clase II son identificados por un dominio de unión a citoquina conservado de aproximadamente 200 aminoácidos (D200) en la porción extracelular del receptor. Este dominio de unión a la citoquina está formado por dos dominios de fibronectina de tipo III (FnIII) de aproximadamente 100 aminoácidos cada uno (Bazan J.F. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 87, 6934-6938, (1990); Thoreau et al., FEBS Lett 282, 16-31, (1991)). Cada dominio FnIII contiene restos Cys, Pro, y Trp conservados que determinan un patrón de plegamiento característico de siete hebras κ similares al dominio constante de las inmunoglobulinas (Uze et al., J. Interferon Cytokine Res. 15, 3-26, (1995)). Los elementos estructurales conservados de la familia de receptores de citoquinas de clase II hacen posible identificar nuevos miembros de esta familia basándose en la homología de la secuencia de aminoácidos primaria. Previamente los autores de la presente invención han identificado con éxito dos nuevos miembros de la familia de receptores de citoquinas de clase II, Zcytor7 (Patente de los Estados Unidos 5.945.511) (también conocido como IL-20R º (Blumberg et al., ídem, (2001)) y zcytor11 (Patente de los Estados Unidos 5.965.704) (también conocido como IL-22R (Blumberg et al., ídem, (2001)), utilizando este enfoque. La identificación de miembros novedosos adicionales de la familia de receptores de citoquinas de clase II tiene interés porque las citoquinas juegan un papel vital en la regulación de las respuestas biológicas.

La IL-22, también conocida como IL-TIF (IL-10 relacionada con el factor inducible derivado de las células T) (Dumoutier et al., J. Immunology, 164, 1814-1819, (2000)), es un homólogo de la IL-10 descrito recientemente. La IL-22 de ratón fue identificada originalmente como un gen inducido por IL-9 en células T y mastocitos in vitro (Dumoutier et al., J. Immunology 164, 1814-1819, (2000)). La actividad de inducción por reaccionante en fase aguda fue observada en hígado de ratón tras la inyección con IL-22, y la expresión de IL-22 fue inducida rápidamente tras la inyección de lipopolisacárido (LPS), sugiriendo que la IL-22 contribuye a la respuesta inflamatoria in vivo (Dumoutier et al., Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 97, 10144-10149

10 (2000)). Las interleuquinas son una familia de citoquinas que median las respuestas inmunológicas, incluyendo la inflamación. Las interleuquinas median una variedad de patologías inflamatorias. Primordial para la respuesta inflamatoria es la célula T, que produce muchas citoquinas e inmunidad adaptativa a los antígenos. Las citoquinas producidas por las células T han sido clasificadas como de tipo I y tipo II (Kelso, A. Immun. Cell Biol. 76:300-317, 1998). Las citoquinas de tipo I incluyen IL-2, IFN-º, LT-º, y están implicadas en las respuestas inflamatorias, la inmunidad viral, la inmunidad de parásitos intracelulares y el rechazo de aloinjertos. Las citoquinas de tipo 2 incluyen IL4, IL-5, IL-6, IL-10 e IL-13, y están implicadas en las respuestas humorales, la

20 inmunidad de helmintos y la respuesta alérgica. Las citoquinas compartidas por el tipo I y 2 incluyen IL-3, GM-CSF y TNF-º. Existe cierta evidencia que sugiere que las poblaciones de células T que producen el Tipo 1 y el Tipo 2 migran preferentemente en diferentes tipos de tejido inflamado. Desde el punto de vista terapéutico, tienen particular interés los interferones (proporcionan revisiones sobre los interferones De Maeyer y De Maeyer-Guignard, "Interferons", en The Cytokine Handbook, 3ª Edición, Thompson (ed.), páginas 491516 (Academic Press Ltd. 1998), y Walsh, Biopharmaceuticals:Biochemistry and Biotechnology, páginas 158-188 (John Wiley & Sons 1998)). Los interferones muestran una variedad de actividades biológicas, y son útiles para el tratamiento de ciertas enfermedades autoinmunitarias, concretamente cánceres, y para la potenciación de la respuesta inmunitaria frente a agentes infecciosos, incluyendo virus, bacterias, hongos, y protozoos. Hasta la fecha, se han identificado seis formas de interferón, que han sido clasificadas en dos grupos principales. Los denominados interferones de "tipo I" incluyen el interferón-º, el interferón-κ, el interferón-º, el interferón λ y el interferón-º. En la actualidad, el interferón-º y una subclase de interferón-º son los únicos interferones de tipo II.

Los interferones de tipo I, que se piensa que derivan del mismo gen...

1. Uso de un polipéptido aislado para la fabricación de un medicamento para tratar la hepatitis B o C, donde dicho polipéptido comprende una secuencia de aminoácidos que tiene una identidad de al menos 80%, con los restos de aminoácidos

5 22 a 205 de SEQ ID NO: 2.

2. Uso según la reivindicación 1, en el que dicho polipéptido tiene una identidad de al menos 90% con los restos de aminoácidos 22 a 205 de SEQ ID NO:2.

10 3. Uso según la reivindicación 1, en el que dicho polipéptido tiene una identidad de al menos 95% con los restos de aminoácidos 22 a 205 de SEQ ID NO:2.

4. Un polipéptido aislado para el tratamiento de la hepatitis B o C, donde dicho polipéptido comprende una secuencia de aminoácidos que tiene una identidad de al

15 menos 80%, preferiblemente una identidad de al menos 90% o 95%, con los restos de aminoácidos 22 a 205 de SEQ ID NO:2.