Procedimiento para el cribado de una sustancia que confiere el kokumi,

es decir una sustancia que puede potenciar el sabor salado, umami, sabor dulce, sabor ácido o el sabor amargo, que comprende la reacción de un receptor del calcio y una sustancia de prueba y la detección de la actividad del receptor del calcio para indicar un posible efecto que confiere el kokumi a las sustancias de prueba

Procedimiento de cribado para los agentes que confieren el kokumi.

Campo técnico

La presente invención se refiere a un procedimiento para la selección de una sustancia que confiere el kokumi.

Antecedentes de la técnica

El receptor de calcio también denominado receptor sensible al calcio (CaSR), y es un receptor constituido por 1078 aminoácidos y está clasificado dentro de la clase C de los receptores siete transmembrana (receptor acoplado a la proteína G; GPCR). Se informó de la clonación del gen para este receptor de calcio en 1993 (documento no patente 1), y es conocido que es el causante de varias respuestas celulares a través de la elevación del nivel de calcio intracelular, etc., cuando se activa con calcio, etc. La secuencia genética del receptor de calcio humano está registrada con el nº de acceso de GenBank NM_000388, y se conserva perfectamente en animales.

El receptor de calcio mencionado anteriormente puede actuar para potenciar o para suprimir funciones biológicas. Por consiguiente, en la actualidad, se utilizan adecuadamente agentes terapéuticos que pueden actuar como activadores y como inhibidores del receptor de calcio para el tratamiento de enfermedades neurológicas, enfermedades hepáticas, enfermedades cardiovasculares, enfermedades del sistema digestivo y otras enfermedades, dependiendo de las patológicas. Por ejemplo, el receptor de calcio puede detectar el aumento del nivel de calcio en sangre en la paratiroides y suprimir la secreción de la hormona paratiroidea (PTH) para corregir el nivel de calcio en sangre. Por consiguiente, se prevé un efecto de reducción del nivel de calcio en sangre por parte de un activador del receptor de calcio. En realidad ya se ha aclarado que cuando se utiliza un activador del receptor de calcio para el tratamiento de hipertiroidismo secundario en pacientes en hemodiálisis, se reduce el nivel de PTH sin que se eleven los niveles de calcio y fósforo.

Como los análisis funcionales del receptor de calcio se han realizado mayoritariamente para la homeostasis de calcio, las investigaciones aplicadas están mayoritariamente enfocadas por consiguiente a las enfermedades metabólicas óseas en las que está implicada la regulación del calcio. Sin embargo, ha quedado claro a través de los resultados de los análisis de las expresiones genéticas que el receptor de calcio está ampliamente distribuido en otros organismos aparte de la paratiroides y el riñón. Se han propuesto (Documentos no patentes 2 y 3), y sus posibilidades de que estén implicados en varias funciones biológicas y en las causas de enfermedades. Por ejemplo, se ha considerado que el receptor de calcio está implicado en las funciones del hígado, corazón, pulmón, canal alimenticio, linfocitos y páncreas. Se ha confirmado en el contexto de la presente invención que se expresa en un amplio intervalo de tejidos en organismos mediante análisis basados en RT-PCR utilizando ARN extraído de tejidos de rata. A partir de los puntos de vista mencionados anteriormente, los valores de los activadores y los inhibidores del receptor de calcio están aumentando rápidamente en la actualidad para varias aplicaciones.

Además, aparte del calcio, se ha descrito que otros cationes como el catión gadolinio, péptidos básicos como la poliarginina, poliaminas como la espermina, aminoácidos como la fenilalanina, y demás como activadores del receptor de calcio (Documento no patente 4).

Aunque hasta ahora se han desarrollado muchos activadores específicos como activadores del receptor de calcio como se ha descrito anteriormente, existen algunos compuestos existentes en los organismos entre ellos, y las actividades de los compuestos existentes en los organismos son muy bajas. Por consiguiente, los agentes terapéuticos de varias enfermedades que contienen estos activadores presentan serios problemas en relación a los efectos secundarios, permeabilidad y actividad. Por ejemplo, aunque es sabido que los aminoácidos actúan sobre los receptores de calcio, se considera que su aplicación real como activadores es difícil ya que la actividad es muy débil. Además, aunque se ha descrito que otras moléculas como la poliarginina como activadora como se ha descrito anteriormente, se estima que las funciones se basan en las acciones como cationes polivalentes que presentan estructuras irregulares. Esto es, no se sabe que un péptido que presenta una estructura específica es útil como activador del receptor de calcio.

Entretanto, en el campo de los alimentos, se han aplicado durante muchos años sustancias aromatizantes. En particular, sustancias que presentan los cinco sabores básicos, concretamente, sabor dulce, sabor salado, sabor ácido, sabor amargo y sabor umami (sabor delicioso), y se han utilizado ampliamente como condimentos sustancias que potencia estos sabores. Como concepto de sabor que no se puede expresar con los sabores mencionados anteriormente, existe el "kokumi". Kokumi significa un sabor que no se puede expresar con los cinco sabores básicos, y significa un sabor que potencia no sólo los sabores básicos sino también los sabores marginales de los sabores básicos, como la densidad, el crecimiento (textura en la boca), la continuidad y la armonía. Hasta la fecha, se han descrito varios procedimientos para conferir el kokumi y se han descrito el glutatión (Documento patente 1), productos calientes de gelatina y tropomiosina (Documento patente 2), compuestos que contienen grupos de sulfona (Documento patente 3), un péptido que contiene la secuencia Asn-His (Documento patente 4) y similares.

Aunque se ha intentado el desarrollo de varias sustancias que confieren el kokumi como se ha descrito anteriormente, y se han comercializado principalmente a partir de productos naturales, existen actualmente muy pocos ejemplos del aislamiento del componente kokumi puro a partir de un extracto de un producto natural, como glutatión y N-(4-metil-5-oxo-1-imidazolin-2-yl) sarcosina.

Por consiguiente, resulta deseable un desarrollo altamente eficaz, seguro y barato de sustancias que confieren el kokumi, y es necesario un procedimiento adecuado y altamente sensible para el cribado de sustancias que confieren el kokumi para este propósito.

[Documento no patente 1] Nature., 1993 9 diciembre; 366 (6455): 575-80.

[Documento no patente 2] J. Endocrinol., 2000 mayo, 165(2): 173-7.

[Documento no patente 3] Eur. J. Pharmacol., 2002, 5 julio, 447(2-3): 271-8.

[Documento no patente 4] Cell Calcium., 2004 marzo, 35(3): 209-16.

[Documento patente 1] Patente japonesa nº 1464928.

[Documento patente 2] Patente japonesa publicación abierta a inspección (KOKAI) nº 10-276709.

[Documento patente 3] Patente japonesa publicación abierta a inspección (KOKAI) nº 8-289760.

[Documento patente 4] WO2004/096836.

El documento EP-A-1 554 939 da a conocer el suministro de unas sustancias que confieren kokumi como aminoácidos y péptidos.

El documento EP-A-0 672 354 da a conocer una mezcla que confiere kokumi que contiene péptidos y fracciones de bajo peso molecular de los extractos naturales.

El documento WO 94/22438 A da a conocer unas composiciones que contienen glutatión y una sal cálcica.

El documento WO 92/07267 A da a conocer una composición que comprende péptidos.

Exposición de la invención

Un objetivo de la presente invención consiste en proporcionar un procedimiento adecuado y altamente sensible para el cribado de sustancias que confieren el kokumi.

La presente invención proporciona lo siguiente:

(1) un procedimiento para el cribado de una sustancia que confiere el kokumi, es decir es capaz de potenciar el sabor salado, umami, sabor dulce, sabor ácido o sabor amargo que comprende La primera etapa de reacción del receptor del calcio y una sustancia de prueba y la detección de la actividad del receptor del calcio, y la segunda etapa de medición del efecto que confiere el kokumi de las sustancias de pruebas para las cuales la actividad de activación del receptor del calcio se detecta en la primera etapa.

Efecto de la invención

Según la presente invención, se proporciona un procedimiento adecuado y altamente sensible para el cribado de una sustancia que confiere el kokumi.

Breve...

1. Procedimiento para el cribado de una sustancia que confiere el kokumi, es decir una sustancia que puede potenciar el sabor salado, umami, sabor dulce, sabor ácido o el sabor amargo, que comprende la reacción de un receptor del calcio y una sustancia de prueba y la detección de la actividad del receptor del calcio para indicar un posible efecto que confiere el kokumi a las sustancias de prueba.