Un procedimiento para preparar micelas inversas con un núcleo acuoso menor o igual a 100 nm,

que comprende: (a) poner en contacto (i) un esterol, (ii) un acilglicerol, preferiblemente un diacilglicerol de ácidos grasos, (iii) agua, en particular agua purificada, y (iv) un catión metálico soluble en agua, (b) agitar la mezcla obtenida en la etapa (a), a 40ºC o menos, y durante tiempo suficiente para obtener la formación de micelas inversas, llevándose a cabo dicha agitación mecánicamente a una velocidad de aproximadamente 1000 a aproximadamente 5000 rpm o mediante aplicación de ultrasonidos

CAMPO DE LA INVENCIÓN

La presente invención se refiere a un procedimiento para la 5 preparación de micelas inversas basadas en esteroles, acilgliceroles y sal metálica mediante agitación mecánica y aplicación de ultrasonidos. Las micelas inversas, obtenidas mediante el procedimiento de la invención, pueden atravesar las mucosas y a continuación las membranas celulares. Permiten así la internalización de iones metálicos por las células diana. Son útiles ventajosamente a nivel industrial en los 10 campos farmacéutico y dietético.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN

A lo largo de los últimos años, se han propuesto diversas 15 aproximaciones para mejorar el suministro de fármacos al sitio diana. En primer lugar, se tiene que administrar el fármaco por una ruta adecuada y fácil, tal como oralmente o rectalmente, y en segundo lugar se tiene que suministrar el ingrediente activo a las células diana en una forma activa. Actualmente no hay un dispositivo disponible que permita este tipo de transporte vectorializado de moléculas activas. 20

Muchas publicaciones y patentes describen procedimientos para encapsular ingredientes activos en nano- y micro- partículas, pero el problema, hasta la fecha sin resolver, por una parte es proporcionar una ruta fácil de administración diferente de la ruta inyectable, es decir oral o bucal, y por otra parte tener un suministro cuasi completo del producto activo en los sitios diana. El mejor ejemplo de 25 esta imposibilidad es la investigación hecha durante décadas para desarrollar insulina que se administre oralmente. Por ejemplo, los sistemas de suministro descritos hasta ahora han permitido una absorción de insulina de 2-5% solamente.

Los inventores han desvelado previamente que agitando dos tipos de lípidos con algunas sales metálicas se podía aumentar la biodisponibilidad de sal y en 30 consecuencia obtener algo de actividad terapéutica con dosis divididas por 1000 a 5000; se podría reducir entonces la toxicidad potencial de dichas sales [véanse US 6.129.924, WO 02/36134 y WO 2004/075990, por ejemplo].

Los inventores han descubierto en particular que ciertos productos, fracciones vegetales o complejos de estas fracciones con metales por otra parte inactivos o insuficientemente activos como agentes hipo-colesterinémicos tenían actividades considerablemente aumentadas cuando se administraban en disolución de aceite de oliva. Esto dio como resultado la investigación entre los muchos 5 componentes del aceite de oliva de aquellos que podrían conducir, mediante mezcla o reacción con los producto probados, a productos más activos. De esta manera los inventores pudieron identificar nuevos productos indicados con la expresión "complejos organometálicos", y obtenidos mediante reacción entre un derivado de vanadio en estado de oxidación 4, ó 5 y dos compuestos orgánicos aislados de 10 extractos de plantas y constituidos respectivamente por sitosteroles y acilgliceroles.

Los inventores también han descubierto que se podían preparar complejos similares a partir de otros derivados de metales en los que el metal está en un estado de oxidación al menos igual a 2 y conocidos por su actividad antidiabética.

También han descubierto que se podían obtener complejos similares a 15 partir de dos tipos de derivados orgánicos previamente mencionados y diversos cationes de metales útiles como biocatalizadores en el metabolismo vivo, siendo estos complejos, en todos los casos, agentes particularmente eficaces como vectores de dichos cationes.

Se entiende que "cationes con actividad biocatalítica" son cationes que 20 tienen actividad biocatalítica directa, y son cationes capaces de sustituir a biocatalizadores y modificar de ese modo ciertos sistemas señalizadores metabólicos patológicos. Se puede mencionar el ejemplo del vanadio, que por razón de su química de coordinación similar puede sustituir al fosfato: así las fosfatasas tanto ácidas como alcalinas son inhibidas por compuestos de vanadilo y vanadato; como 25 también lo es la tirosina fosfatasa que induce estimulación de la fosforilación de la tirosina del receptor periférico de insulina así como de las proteína quinasas asociadas.

La presente invención proporciona ahora un procedimiento para preparar micelas inversas, que comprenden una o más sales metálicas, dichas 30 micelas inversas se pueden administrar por cualquier ruta, en particular por vía mucosa y son capaces de atravesar las membranas celulares. Este procedimiento hace que sea posible el control y optimización de la composición que comprende micelas para sus usos posteriores en los campos farmacéutico y dietético.

RESUMEN DE LA INVENCIÓN

La invención se refiere a un procedimiento para preparar micelas inversas basadas en esteroles, acilgliceroles y sal metálica, diseñadas para usarlas 5 en los campos farmacéutico y dietético.

La invención también se refiere a micelas inversas con un núcleo acuoso menor o igual a 100 nm, en la que se pueden obtener dichas micelas mediante un procedimiento de preparación que comprende:

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(a) Poner en contacto (i) esterol, (ii) acilglicerol, preferiblemente diacilglicerol de ácidos grasos, (iii) agua (en particular agua purificada), (iv) un catión metálico,

(b) Agitar la mezcla obtenida en la etapa (a), a 40ºC o menos, y durante tiempo suficiente para obtener la formación de micelas inversas, llevándose a 15 cabo dicha agitación mecánicamente a una velocidad de aproximadamente 1000 a aproximadamente 5000 rpm o mediante aplicación de ultrasonidos.

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN Y REALIZACIONES PREFERIDAS

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Micelas inversas

El sistema micelar inverso según la invención se caracteriza como una microemulsión que comprende una dispersión de microgotículas de agua en aceite. Esta dispersión se estabiliza mediante un tensioactivo (acilglicerol, más 25 preferiblemente diglicerol de ácidos grasos) en la interfase agua/aceite. La fase micelar inversa se puede definir como un sistema en el que el agua forma la fase interna y las colas hidrófobas de los lípidos forman la fase continua. Las micelas inversas que contienen aceite(s), tensioactivo(s) y fase acuosa también se caracterizan como microemulsiones de agua en aceite. 30

El tamaño de las micelas se controla por la cantidad de agua solubilizada en el sistema. Ésta varía de manera lineal con la relación en peso (agua)/(tensioactivo) W (agua solubilizada en la mezcla/tensioactivo en la mezcla). Como se ha mencionado anteriormente, la relación W = (agua)/(acilglicerol) es

preferiblemente menor o igual a aproximadamente 2,5, más preferiblemente menor o igual a 1 y más específicamente de 0,01 a 0,2. Según una realización particular, la relación W está preferiblemente en el intervalo de 0,05 a 0,18.

Las micelas inversas se pueden caracterizar, en cuanto al tamaño y núcleo de las mismas, mediante diversos procedimientos: 5

- Dispersión de rayos X

- Dispersión de neutrones

- Microscopía electrónica de transmisión (TEM)

- Dispersión dinámica de luz (DLS) 10

Los compuestos necesarios para la preparación de las micelas inversas según la invención comprenden dos lípidos: un esterol y un acilglicerol, preferiblemente un diglicérido de ácidos grasos, que actúa como tensioactivo. Las micelas inversas según la invención además comprenden al menos un catión 15 metálico.

Las relaciones de los constituyentes lipídicos (esteroles y acilglicerol) pueden variar en gran medida, por ejemplo, la relación en peso esterol/acilglicerol puede oscilar de 0,01 a 1 (inclusive). Según una realización particular, se puede usar un exceso de acilglicerol (preferiblemente diglicérido de ácidos grasos) en 20 comparación con esterol (preferiblemente sitosterol). Más particularmente, la relación en peso esterol/acilglicerol es mayor o igual a 0,1, más preferiblemente de 0,1 a 0,2.

Se puede usar metal en una cantidad muy baja en comparación con los otros dos componentes, ventajosamente en una relación molar de 1/100 a 1/10000 en comparación con acilglicerol....

1. Un procedimiento para preparar micelas inversas con un núcleo acuoso menor o igual a 100 nm, que comprende:

5

(a) poner en contacto (i) un esterol, (ii) un acilglicerol, preferiblemente un diacilglicerol de ácidos grasos, (iii) agua, en particular agua purificada, y (iv) un catión metálico soluble en agua,

(b) agitar la mezcla obtenida en la etapa (a), a 40ºC o menos, y durante tiempo suficiente para obtener la formación de micelas inversas, 10 llevándose a cabo dicha agitación mecánicamente a una velocidad de aproximadamente 1000 a aproximadamente 5000 rpm o mediante aplicación de ultrasonidos.

2. Un procedimiento según la reivindicación 1, en el que la relación 15 W=(agua)/(acilglicerol) es menor o igual a aproximadamente 2,5, más preferiblemente menor o igual a 1 y más específicamente de 0,01 a 0,2.

3. El procedimiento según la reivindicación 1 o la 2, en el que el esterol es beta-sitosterol. 20

4. El procedimiento según una cualquiera de las reivindicaciones 1-3, en el que el diacilglicerol de ácidos grasos se selecciona entre 1-2-dioleína y 1-oleoil-2-acetilglicerol.

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5. El procedimiento según una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en el que el metal es un metal que tiene una sal soluble en agua.

6. El procedimiento según una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en el que el metal es un metal que exhibe actividad biocatalítica. 30

7. El procedimiento según una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en el que la relación W es de 0,05 a 0,18.

8. El procedimiento según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, en el que se lleva a cabo la agitación de la mezcla entre aproximadamente 30 y 35ºC.

9. El procedimiento según una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en el que el catión metálico presenta un catión en un estado de oxidación de al 5 menos 2.

10. El procedimiento según una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en el que el catión metálico se selecciona entre el grupo que consiste en cinc, niobio, vanadio, selenio, molibdeno, cromo, antimonio, estaño, oro, rutenio, 10 paladio, platino, litio y estroncio.

11. Micelas inversas que se pueden obtener mediante un procedimiento según una cualquiera de las reivindicaciones precedentes.

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12. Una composición farmacéutica que comprende micelas inversas como se definen en la reivindicación 11 en un soporte farmacéuticamente aceptable.