Una composición de un cultivo biológicamente puro de B. lactis HN019,

con número de depósito en AGAL NM97/09513, de fecha 18 de agosto de 1997, en una concentración inmunoestimulante, con un excipiente o diluyente fisiológicamente aceptable

Campo técnico

Esta invención se refiere a nuevas cepas de bacterias del ácido láctico y su uso en la mejora de la inmunidad. Antecedentes de la técnica

El consumo de productos que contienen bacterias del ácido láctico (LAB, por sus siglas en inglés) está asociado con un abanico de beneficios para la salud, que incluyen la mejora de la inmunidad. Hay miles de cepas de bacterias del ácido láctico, pero sólo algunas cepas exhiben propiedades promotoras de la salud. La capacidad de estas bacterias de tolerar los ácidos y las sales biliares, adherirse a las células de la mucosa epitelial y sobrevivir al paso a través del tracto gastrointestinal es considerada como un criterio importante para la selección de cepas promotoras de la salud. Sólo se han identificado hasta la fecha unas cuantas cepas de bacterias del ácido láctico con beneficios para la salud probados.

La solicitud de patente europea EP 295 794 A describe un promotor del crecimiento para especies de Bifidobacterium que comprende alimento de calabaza como ingrediente activo.

La solicitud de patente internacional WO 94 18997 A describe un método para mejorar la respuesta inmune a una vacuna oral por parte de un receptor de una vacuna mediante la administración, con la vacuna oral o lo suficientemente próximo en el tiempo para causar una mejora de la respuesta inmune, de un inmunoadyuvante que comprende una cantidad eficaz de una cepa de bacterias Lactobacillus que tiene la capacidad de colonizar el tracto intestinal del receptor, preferiblemente la Cepa de Lactobacillus GG.

La solicitud de patente europea EP A 0577904 describe que Bifidobacterium breve CNCM I-1226, Bifidobacterium infantis CNCM I-227 y Bifidobacterium longum CNCM I-1228 se adhieren a y excluyen competitivamente bacterias patógenas de las células Caco-2. Las cepas se pueden incorporar en yogures, leches acidificadas y otras composiciones de alimentos.

La solicitud de patente internacional WO 98 23727 A describe una cepa purificada de Lactobacillus acidofilus CNCM/I-1492 (L.a. 1492) que, cuando se administra sola o en combinación con otra cepa de Lactobacillus acidofilus (L.a.) y una cepa de Lactobacillus casei (L.c.), tiene un efecto beneficioso sobre el nivel de colesterol en sangre en los mamíferos. También refuerza el sistema inmunitario, facilita la absorción de nutrientes y estimula la flora intestinal. Tales cepas también neutralizan los efectos secundarios causados por antibióticos. La invención se ocupa de la cepa específica L.a. I-1492, un fermento que comprende L.a. I-1492, cepas de

L.a. y L.c., un producto lácteo obtenido mediante este fermento y un método de fabricación del producto lácteo.

Se conocen unas cepas de LAB que muestran una buena adhesión a las células del epitelio mucoso del intestino delgado, prestándose de este modo a aplicaciones terapéuticas, de la patente de Nueva Zelanda 248057. Los microorganismos descritos en esta patente mejoran tanto la inmunidad natural (función fagocítica) como la inmunidad adquirida (respuestas de anticuerpos y respuestas de proliferación linfocítica).

Es deseable tener otras bacterias LAB que mejoren un amplio espectro de respuestas inmunes, incluyendo la función fagocítica.

Es un objeto de esta invención contribuir en alguna medida a la consecución de estas aspiraciones, o al menos ofrecer al público una alternativa útil de bacterias del ácido láctico que mejoren el sistema inmunitario.

Se puede decir, en líneas generales, que la invención consiste en una composición de un cultivo biológicamente puro de Bifidobacterium lactis HN019, con número de depósito en AGAL NM97/09513, de fecha 18 de agosto de 1997, en una concentración inmunoestimulante, con un excipiente o diluyente fisiológicamente aceptable.

En una realización, dicha composición comprende una composición de acuerdo con la reivindicación 1, que contiene B. lactis HN019, con número de depósito en AGAL NM97/09513, de fecha 18 de agosto de 1997, y una cualquiera o más de L. rhamnosus HN001, con número de depósito en AGAL NM97/09514, de fecha 18 de agosto de 1997, L. rhamnosus HN067, con número de depósito en AGAL NM97/01925, de fecha 11 de febrero de 1998, y L. acidophilus HN017, con número de depósito en AGAL NM97/09515, de fecha 18 de agosto de 1997.

Preferiblemente, dicho excipiente o diluyente fisiológicamente aceptable es un alimento. Preferiblemente, dicho alimento es uno cualquiera entre leche fermentada, yogur, queso, bebida láctea o leche en polvo. Alternativamente, dicha composición es una composición farmacéutica y dicho excipiente o diluyente es un excipiente o diluyente farmacológicamente aceptable. En otra realización, se puede decir, en líneas generales, que la invención consiste en el uso de las composiciones de la invención en un método para mejorar la

inmunidad natural y adquirida, que comprende administrar a un mamífero uno cualquiera de los cultivos biológicamente puros anteriores en una tasa de dosificación inmunoestimulante.

Preferiblemente, dicho cultivo se administra en la forma de una composición con un excipiente o diluyente fisiológicamente aceptable.

Preferiblemente, dicho excipiente o diluyente fisiológicamente aceptable es un alimento.

Preferiblemente, dicho alimento es leche fermentada, yogur, queso, bebida láctea o leche en polvo. Breve descripción de los dibujos

La Figura 1 muestra el efecto de la suplementación de ratones con un producto fermentado con L. rhamnosus HN001 o un producto no fermentado que contiene L. rhamnosus HN001 sobre la actividad fagocítica de los leucocitos de la sangre periférica, como se describe en el Ejemplo 5. Se alimentaron ratones BALB/c con dietas basadas en leche que contenían 109 ufc (por día) de L. rhamnosus HN001, bien en un producto fermentado o bien no fermentado, durante 14 días. La actividad fagocítica de los leucocitos de la sangre periférica se determinó usando citometría de flujo y Escherichia coli marcada con isotiocianato de fluoresceína. Los valores son media ± error estándar. Diferencias significativas (ANOVA, el programa SAS) respecto al control: **P<0,0001.

La Figura 2 muestra el efecto de la suplementación de ratones con L. rhamnosus HN001 vivos o L. rhamnosus HN001 muertos por calor sobre la actividad fagocítica de los leucocitos de la sangre periférica, como se describe en el Ejemplo 7. Se alimentaron ratones BALB/c con dietas basadas en leche y se administraron por vía oral 109 ufc (por día) de L. rhamnosus HN001, bien vivos o bien muertos por calor, durante 14 días. La actividad fagocítica de los leucocitos de la sangre periférica y los macrófagos peritoneales se determinó usando citometría de flujo y Escherichia coli marcada con isotiocianato de fluoresceína. Los valores son media ± error estándar. Diferencias significativas (ANOVA, el programa SAS) respecto al control: **P<0,0001.

La Figura 3 muestra el efecto de la suplementación de ratones con L. rhamnosus HN001 o B. lactis HN019 sobre la traslocación bacteriana en ratones sometidos a un desafío con S. typhimurium como se describe en el Ejemplo 8. Ratones BALB/c no suplementados y suplementados con B. lactis HN019 o L. rhamnosus HN001 fueron sometidos por vía oral a un desafío con S. typhimurium después de una suplementación diaria continua. Seis días después del desafío, se mataron los ratones de forma humanitaria y sus hígados y bazos se recogieron para hacer un seguimiento de la traslocación bacteriana. Después, se cultivaron suspensiones tisulares de los órganos recogidos sobre placas de agar MacConkey durante 24-48 h antes de hacer una cuantificación. Los valores son media ± error estándar. Diferencias significativas (ANOVA, el programa SAS) respecto al control: **P<0,05.

La Figura 4 muestra el efecto de la suplementación de ratones con L. rhamnosus HN001 o B. lactis HN019 sobre la actividad fagocítica de los leucocitos de la sangre periférica de ratones sometidos a un desafío con S. typhimurium como se describe en el Ejemplo 8. Ratones BALB/c no suplementados y suplementados con B. lactis HN019 o L. rhamnosus HN001 fueron sometidos a un desafío por vía oral con S. typhimurium después de una suplementación diaria continua. La actividad fagocítica de los leucocitos de la sangre periférica se determinó seis días después del desafío usando citometría de flujo y Escherichia coli marcada con isotiocianato de fluoresceína. Los valores son media ± error estándar. Los...

1. Una composición de un cultivo biológicamente puro de B. lactis HN019, con número de depósito en AGAL NM97/09513, de fecha 18 de agosto de 1997, en una concentración inmunoestimulante, con un excipiente o diluyente fisiológicamente aceptable.

2. Una composición de acuerdo con la reivindicación 1, que contiene B. lactis HN019, con número de depósito en AGAL NM97/09513, de fecha 18 de agosto de 1997, y uno cualquiera o más de L. rhamnosus HN001, con número de depósito en AGAL NM97/09514, de fecha 18 de agosto de 1997, L. rhamnosus HN067, con número de depósito en AGAL NM97/01925, de fecha 11 de febrero de 1998 y L. acidophilus HN017, con número de depósito en AGAL NM97/09515, de fecha 18 de agosto de 1997.

3. Una composición de acuerdo con la reivindicación 1 ó 2, en la que dicho excipiente

o diluyente fisiológicamente aceptable es un alimento.

4. Una composición de acuerdo con la reivindicación 3, en la que dicho alimento es uno cualquiera entre leche fermentada, yogur, queso, bebida láctea o leche en polvo.

5. Una composición de acuerdo con la reivindicación 1 ó 2, que es una composición farmacéutica y en la que dicho excipiente o diluyente es un excipiente o diluyente farmacológicamente aceptable.

6. La composición de una cualquiera de las reivindicaciones precedentes para uso en terapia.

7. La composición de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, para el uso en la mejora de la inmunidad natural y adquirida.

8. El uso de la composición de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5 para la fabricación de un medicamento para el uso en la mejora de la inmunidad natural y adquirida.