ANTÍGENO TUMORAL SECRETADO.

Un método para detectar la presencia de cáncer de próstata en un individuo,

cuyo método comprende determinar el nivel de expresión de la proteína de SEQ ID NO: 2 en una muestra biológica de ensayo procedente de un individuo y comparar el nivel así determinado con el nivel de dicha expresión que es evidenciada en la correspondiente muestra normal, en el que la expresión elevada de dicha proteína evidenciada en la muestra de ensayo con relación a la muestra normal, es una indicación de la presencia de dicho cáncer en el individuo

El cáncer es la segunda causa principal de muerte humana próxima a las enfermedades coronarias. En todo el mundo millones de personas mueren de cáncer todos los años. Sólo en los Estados Unidos el cáncer ocasiona la muerte de más de medio millón de personas todos los años, diagnosticándose cada año unos 1,4 millones de nuevos casos. Aun cuando las muertes como consecuencia de enfermedades cardiacas han ido disminuyendo significativamente, las que resultan de cáncer generalmente van en aumento. Se ha pronosticado que en la primera parte del siglo próximo, el cáncer llegará a ser la causa principal de muerte.

En todo el mundo diversos cánceres sobresalen como los asesinos principales. En particular, los carcinomas de pulmón, de próstata, de mama, de colon, de páncreas y de ovario representan las causas primordiales de muerte por cáncer. Estos, y virtualmente todos los otros carcinomas, comparten una faceta letal común. Con muy pocas excepciones, la enfermedad metastásica procedente de un carcinoma, es fatal. Además, incluso para aquellos pacientes de cáncer que inicialmente sobreviven a sus cánceres primarios, la experiencia común ha puesto de manifiesto que sus vidas resultan alteradas espectacularmente. Muchos pacientes de cáncer experimentan ansiedades fuertes ocasionadas por el conocimiento del potencial de recurrencia o de fallo del tratamiento. Muchos pacientes de cáncer experimentan debilitaciones físicas después del tratamiento. Muchos pacientes de cáncer experimentan recurrencias.

Hablando en términos generales, el problema fundamental existente en la gestión de la letalidad de los cánceres es la carencia de terapias sistémicas eficaces y no tóxicas. La medicina molecular, todavía muy en su infancia, promete redefinir los caminos en que estos cánceres son gestionados.. Incuestionablemente, existe un esfuerzo intenso a nivel mundial dirigido al desarrollo de nuevos enfoques moleculares para la diagnosis y el tratamiento del cáncer. Por ejemplo, existe un gran interés en identificar verdaderamente genes y proteínas específicos de tumores que pudieran utilizarse como marcadores de diagnóstico y prognósticos y/o dianas o agentes terapéuticos. Los esfuerzos de investigación en estos campos son alentadores y la disponibilidad creciente de tecnologías moleculares útiles ha acelerado la adquisición de un conocimiento válido acerca del cáncer. No obstante, el progreso es lento y, en general, desigual.

Como se discute más adelante, la gestión del cáncer de próstata sirve de buen ejemplo de la extensión limitada a la que la biología molecular ha traducido en progreso real la experiencia clínica. Con limitadas excepciones, la situación es más o menos la misma para los otros carcinomas principales anteriormente citados.

En todo el mundo, el cáncer de próstata es el cuarto tipo de cáncer que más prevalece en el hombre. En Norteamérica y en Europa Septentrional es, con mucho, el cáncer masculino más común y es la segunda causa importante de muerte por cáncer en los hombres. Solo en los Estados Unidos más de

40.000 hombres mueren anualmente por esta enfermedad – en segundo lugar solamente con respecto al cáncer de pulmón. A pesar de la magnitud de estas cifras, no existe todavía un tratamiento eficaz del cáncer de próstata metastásico. La prostatectomía quirúrgica, la radioterapia, la terapia hormonal de ablación y la quimioterapia, permanecen fijas como las modalidades fundamentales de tratamiento. Desgraciadamente, estos tratamientos son ineficaces para muchos y con frecuencia están asociados con consecuencias indeseables importantes.

En lo referente al diagnóstico, la carencia de un marcador tumoral prostático que pueda detectar con exactitud tumores localizados en fase precoz, permanece como una limitación importante en el tratamiento de esta enfermedad. Aun cuando el ensayo del PSA sérico ha sido una herramienta muy útil, su especificidad y utilidad general es considerada ampliamente como que adolece en varios aspectos importantes, como se discute más adelante. La mayor parte de los cánceres de próstata ocurren en la zona periférica de la glándula prostática, fuera de los uréteres. Los tumores existentes dentro de esta zona pueden no producir síntoma alguno y, como resultado, la mayoría de los hombres con cáncer de próstata en fase precoz no presentan síntomas clínicos de la enfermedad hasta que ha tenido lugar un progreso importante. La progresión tumoral en la zona de transición de la próstata puede conducir a obstrucción uretral, produciéndose así los primeros síntomas de la enfermedad. Sin embargo, estos síntomas clínicos no pueden distinguirse del estado común, no maligno, de la hiperplasia prostática benigna (BPH). La detección y el diagnóstico precoz del cáncer de próstata se basa actualmente en exámenes rectales digitales (DRE), medidas del antígeno prostático específico (PSA), ultrasonografía transrectal (TRUS) y biopsia transrectal por medio de aguja (TRNB). Actualmente, la medida del PSA sérico combinada con DRE representan la herramienta principal utilizada para detectar y diagnosticar el cáncer de próstata. Ambos poseen limitaciones importantes que han estimulado una investigación intensa para descubrir mejores marcadores de diagnóstico de esta enfermedad.

De modo semejante, no existe un marcador disponible que pueda predecir la emergencia de la fase metastásica, típicamente fatal, del cáncer de próstata. El diagnóstico de la fase metastásica se consigue actualmente mediante cirugía abierta o linfadenectomía pélvica laparoscópica, exploraciones de la totalidad del cuerpo con radioisótopos, radiografía del esqueleto y/o análisis de biopsias de lesiones óseas. Claramente, mejores procedimientos de producción de imágenes y otros métodos de diagnóstico menos invasivos, ofrecen la promesa de aliviar las dificultades que tales procedimientos imponen a un paciente, así como mejorar la exactitud de los diagnósticos y la apertura de opciones terapéuticas. Un problema semejante es la carencia de un marcador prognóstico eficaz para determinar que cánceres son indolentes y cuales son o pueden ser agresivos. El PSA, por ejemplo, falla en discriminar con exactitud entre cánceres indolentes y agresivos. Hasta que existan marcadores tumorales prostáticos capaces de identificar de modo fidedigno la enfermedad en fase precoz, predecir la susceptibilidad a las metástasis y formar con precisión imágenes de tumores, la gestión del cáncer de próstata continuará siendo sumamente difícil.

El PSA es el marcador tumoral utilizado más ampliamente para seleccionar, diagnosticar y monitorizar hoy en día el cáncer de próstata. En particular, varios inmunoensayos para la detección del PSA sérico están en uso clínico de amplia difusión. Recientemente, ha sido desarrollado un ensayo de reacción de cadena de la polimerasa-transcriptasa inversa (RT-PCR) para el mRNA del PSA en el suero. Sin embargo el PSA no es un marcador específico de la enfermedad, ya que niveles elevados de PSA pueden detectarse en un gran porcentaje de pacientes con BPH y prostatitis (25-86%) (Gao et al., 1997, Prostate 31:264-281), así como en otros trastornos no malignos y en algunos hombres normales, un factor que limita significativamente la especificidad de diagnóstico del marcador. Por ejemplo, elevaciones del PSA sérico de entre 4 a 10 ng/ml son observadas en la BPH e incluso valores más altos son observados en las prostatitis, en particular en las prostatitis agudas. La BPH es un estado sumamente común en el hombre. Una confusión adicional de la situación consiste en el hecho de que pueden observarse elevaciones del PSA sérico sin indicación alguna de enfermedad por DRE, y viceversa. Además, está reconocido ahora que el PSA no es específico de la próstata (Gao et al., referencia citada pata una revisión).

Han sido descritos diversos métodos diseñados para mejorar la especificidad de la detección basada en el PSA, tales como la medida de la densidad del PSA y la relación del PSA libre frente al PSA complejado. Sin embargo, ninguna de estas metodologías han sido capaces de distinguir reproduciblemente entre enfermedad prostática benigna y maligna. Además, los diagnósticos de PSA tienen sensibilidades de entre 57-79% (Cupp y Osterling, 1993, Mayo Clin. Proc. 68:297-306) y por tanto fallan en identificar cánceres de próstata en una población importante de hombres con esta enfermedad.

Existen algunos marcadores conocidos que son expresados principalmente en la próstata, tales como el antígeno de membrana específico de la próstata (PSM), una hidrolasa...

1. Un método para detectar la presencia de cáncer de próstata en un individuo, cuyo método comprende determinar el nivel de expresión de la proteína de SEQ ID NO: 2 en una muestra biológica de ensayo procedente de un individuo y comparar el nivel así determinado con el nivel de dicha expresión que es evidenciada en la correspondiente muestra normal, en el que la expresión elevada de dicha proteína evidenciada en la muestra de ensayo con relación a la muestra normal, es una indicación de la presencia de dicho cáncer en el individuo.

2. Un método de examen de una muestra biológica para evidenciar un crecimiento celular desordenado, que comprende comparar el nivel de expresión de la proteína de SEQ ID NO:2 de la muestra biológica con el nivel de dicha expresión evidenciado en la correspondiente muestra normal, en el que una elevación del nivel de expresión de dicha proteína evidenciado en la muestra biológica comparado con la muestra normal, es una indicación de que la muestra manifiesta un crecimiento celular desordenado y está condicionado por células que manifiestan un crecimiento celular desordenado.

3. El método según la reivindicación 2, en el que la elevación del nivel de expresión de dicha proteína es identificado mediante la presencia de dicha proteína en una muestra biológica de un condicionado por un tejido en el que dicha proteína está normalmente ausente.

4. El método según la reivindicación 1, en el que las muestras de tejidos de ensayo y normal están seleccionadas entre el grupo que consiste en tejido prostático, suero, sangre o semen.

5. El método según la reivindicación 1, en el que la determinación del nivel de proteína de SEQ ID NO:2 de la muestra de ensayo comprende poner en contacto la muestra con un anticuerpo que se une específicamente a dicha proteína.

6. El método según la reivindicación 5, en el que el anticuerpo comprende un anticuerpo policlonal.

7. El método según la reivindicación 5, en el que el anticuerpo comprende un anticuerpo monoclonal.

8. El método según la reivindicación 2, en el que la determinación del nivel de proteína de SEQ ID NO:2 comprende poner en contacto dicha muestra con un anticuerpo que se une específicamente a dicha proteína.

9. El método según la reivindicación 8, en el que el anticuerpo comprende un anticuerpo policlonal.

10. El método según la reivindicación 8, en el que el anticuerpo comprende un anticuerpo monoclonal.

11. Un método para detectar la presencia de cáncer en un individuo, que comprende:

(a) determinar el nivel de expresión de mRNA que codifica la proteína de SEQ ID NO:2 de una muestra de ensayo obtenida del individuo; y

(b) comparar el nivel así determinado con el nivel de expresión de mRNA de la correspondiente muestra biológica normal, en el que la expresión elevada del mRNA evidenciada en la muestra de ensayo con relación a la muestra normal, es una indicación de la presencia de cáncer en el individuo.

12. El método según la reivindicación 11, en el que las muestras de ensayo y normal están seleccionadas entre el grupo que consiste en tejido de vejiga, tejido de próstata, tejido de colon, tejido linfático, suero, sangre o semen.

13. Un método de examen de una muestra biológica para poner de manifiesto un crecimiento celular desordenado, que comprende comparar el nivel de expresión del mRNA que codifica la proteína de SEQ ID NO:2 de la muestra biológica con el nivel de dicha expresión de la correspondiente muestra normal, en el que una elevación del nivel de expresión de dicho mRNA evidenciado en la muestra biológica en comparación con la muestra normal, es una indicación de que la muestra manifiesta un crecimiento celular desordenado o está condicionado por células que manifiestan crecimiento celular desordenado.

14. El método según la reivindicación 13, en el que la elevación del nivel de expresión de dicha proteína, se identifica por la presencia de dicha proteína en una muestra biológica de un tejido, o está condicionada por un tejido en el que dicha proteína está normalmente ausente.

15. . El método según la reivindicación 13, en el que las muestras de ensayo y normal están seleccionadas entre el grupo que consiste en tejido de vejiga, tejido de próstata, tejido de colon, tejido linfático, suero, sangre o semen.

16. El método según cualquiera de las reivindicaciones 11 a 15, en el que las muestras de ensayo y normal son tejido de vejiga o tejido de próstata.

17. Una composición de vacuna para el tratamiento de un cáncer que expresa SEQ ID NO:2, que comprende una parte inmunógena de la proteína de SEQ ID NO:2 y un excipiente fisiológicamente aceptable.

18. Una composición de vacuna para el tratamiento de un cáncer que expresa SEQ ID NO:2, que comprende un polinucleótido que codifica una parte inmunógena de una proteína de SEQ ID NO:2 y un excipiente fisiológicamente aceptable.

19. La composición de vacuna según las reivindicaciones 17 ó 18, en el que la parte inmunógena de una proteína de SEQ ID NO:2 está seleccionada entre el grupo que consiste en GLLKWFW (SEQ ID NO:19), LMGEQLGNV (SEQ ID NO:20), LLAELIPDA (SEQ ID NO:21), WVFIAAKGL (SEQ ID NO: 22), WFWFASL (SEQ ID NO:23) , GGLLKWFV (SEQ ID NO:24), FIAAKGLEL (SEQ ID NO:25), KICFEDNLL (SEQ ID NO:26), INIAIVNYV (SEQ ID NO:27) y NMKFRSSWV (SEQ ID NO:28).

20. Una composición de vacuna para el tratamiento de un cáncer que expresa SEQ ID NO:2, que comprende un polinucleótido que codifica un anticuerpo monoclonal de una sola cadena que comprende los dominios variables de las cadenas pesada y ligera de un anticuerpo monoclonal que se une específicamente a una proteína de SEQ ID NO:2.