RECEPTOR ACOPLADO A PROTEÍNA G REGULADO POSIVITIVAMENTE EN EL CÁNCER DE PRÓSTATA Y USOS DEL MISMO.

Receptor acoplado a proteína G regulado positivamente en el cáncer de próstata y usos del mismo La presente solicitud reivindica el beneficio de la solicitud de patente provisional de los Estados Unidos número 60/157.902, presentada el 5 de octubre de 1999, cuyo contenido completo se incorpora en el presente documento por referencia. Campo de la invención La invención descrita en el presente documento se refiere a un nuevo gen y a su proteína codificada, denominada PHOR-1, y a procedimientos de diagnóstico y terapéuticos y composiciones útiles en la gestión de diversos cánceres que expresan PHOR-1, particularmente cánceres de próstata. Antecedentes de la invención El cáncer es la segunda causa principal de muerte en seres humanos después de la enfermedad coronaria. En todo el mundo, millones de personas mueren de cáncer cada año. En los Estados Unidos solamente, el cáncer causa la muerte de más de medio millón de personas anualmente, diagnosticándose alrededor de 1,4 millones de nuevos casos por año. Aunque las muertes de cardiopatía han estado disminuyendo significativamente, las resultantes del cáncer están aumentando en general. En la primera parte del próximo siglo se espera que el cáncer se convierta en la causa principal de muerte. En todo el mundo, varios cánceres destacan como los que más muertes producen. En particular, los carcinomas del pulmón, próstata, mama, colon, páncreas y ovario representan las causas principales de muerte por cáncer. Estos y prácticamente todos los demás carcinomas comparten una característica letal común. Con muy pocas excepciones, la enfermedad metastásica de un carcinoma es mortal. Además, incluso para los pacientes con cáncer que inicialmente sobreviven a sus cánceres primarios, la experiencia común ha demostrado que sus vidas se ven drásticamente alteradas. Muchos pacientes con cáncer experimentan fuertes ansiedades movidas por la conciencia del potencial de recurrencia o fracaso del tratamiento. Muchos pacientes con cáncer experimentan un debilitamiento físico después del tratamiento. Muchos pacientes con cáncer experimentan una recurrencia. En todo el mundo, el cáncer de próstata es el cuarto cáncer más prevalente en hombres. En Norteamérica y el Norte de Europa, es de lejos el cáncer masculino más común y es la segunda causa principal de muerte por cáncer en hombres. En Estados Unidos solamente, más de 40.000 hombres mueren anualmente de esta enfermedad que ocupa el segundo lugar sólo después del cáncer de pulmón. A pesar de la magnitud de estas cifras, todavía no existe un tratamiento eficaz para el cáncer de próstata metastásico. La prostatectomía quirúrgica, la terapia de radiación, la terapia de supresión hormonal y la quimioterapia continúan siendo las modalidades de tratamiento principales. Desgraciadamente, estos tratamientos son ineficaces para muchos y con frecuencia se asocian con consecuencias indeseables. En el frente de diagnóstico, la ausencia de un marcador de tumor de próstata que pueda detectar con precisión tumores localizados en fase temprana continúa siendo una limitación significativa en la gestión de esta enfermedad. Aunque el ensayo de PSA en suero ha sido una herramienta muy útil, se considera abiertamente que su especificidad y utilidad general tienen carencias en varios aspectos importantes. El progreso en la identificación de marcadores específicos adicionales para el cáncer de próstata se ha mejorado por generación de xenoinjertos de cáncer de próstata que puedan recapitular diferentes fases de la enfermedad en ratones. Los xenoinjertos de LAPC (cáncer de próstata de Los Ángeles) son xenoinjertos de cáncer de próstata que han sobrevivido al pase en ratones con inmunodeficiencia combinada grave (SCID) y han mostrado la capacidad de mimetizar la progresión de la enfermedad, incluyendo la transición de dependencia de andrógenos a independencia de andrógenos, y el desarrollo de lesiones metastásicas (Klein y col., 1997, Nat. Med.3: 402). Los marcadores de cáncer de próstata identificados más recientemente incluyen PCTA-1 (Su y col., 1996, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 93: 7252), el antígeno de células madre de próstata (PSCA) (Reiter y col., 1998, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 95: 1735) y STEAP (Hubert y col., 1999, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 96: 14523). Aunque los marcadores identificados previamente tales como PSA, PSM, PCTA y PSCA han facilitado los esfuerzos para diagnosticar y tratar el cáncer de próstata, existe la necesidad de la identificación de marcadores y dianas terapéuticas adicionales para cánceres de próstata y relacionados con el fin de mejorar adicionalmente el diagnóstico y la terapia. Sumario de la invención Un receptor acoplado a proteína G específico de próstata regulado positivamente en el cáncer de próstata, denominado PHOR-1. La expresión de PHOR-1 está enormemente restringida a la próstata y está notablemente regulada positivamente en tumores de próstata. En la expresión de PHOR-1 en muestras de próstata normal/tumor relacionadas de pacientes con cáncer de próstata avanzado usando procedimientos de detección tanto de ARNm como de proteínas muestra un alto grado de expresión regulada positivamente en el tejido tumoral, sugiriendo que 2 E08165936 04-11-2011   PHOR-1 es un marcador útil para la detección del cáncer de próstata. El análisis de muestras normales/tumorales de otros pacientes con cáncer humanos demuestra la regulación positiva de la expresión de PHOR-1 en cánceres de riñón, uterino, de cuello uterino, de estómago y rectal también. Además, la expresión de PHOR-1 induce el crecimiento de colonias y modula el AMPc y la fosforilación de tirosina de formas indicativas de un papel funcional en la oncogénesis y la transformación, proporcionado una diana estratégica para la terapia del cáncer. La estructura de PHOR-1 incluye siete supuestos dominios transmembrana que abarcan la secuencia proteica de 317 aminoácidos, PHOR-1 se expresa en la superficie celular, con el extremo N-terminal expuesto en la parte externa de la membrana celular. La proteína PHOR-1 es homóloga a una gran familia de receptores olfatorios que se expresan en el epitelio olfatorio y las neuronas. PHOR-1 presenta una actividad funcional que concuerda con otros receptores acoplados a proteína G, sugiriendo que PHOR-1 desempeña un papel crítico en la regulación de la función, proliferación y transformación celular. Se describen en el presente documento varias estrategias potenciales para el tratamiento del cáncer de próstata y de otros cánceres que expresan PHOR-1. La orientación en superficie celular y la naturaleza acoplada a proteína G de este receptor presentan varias estrategias terapéuticas usando moléculas que se dirigen a PHOR-1 y su función, así como moléculas que se dirigen a otras proteínas, factores y ligandos que actúan a través del receptor PHOR-1. Estas estrategias terapéuticas incluyen terapia de anticuerpos con anticuerpos anti-PHOR-1, terapias con moléculas pequeñas y terapias con vacunas. Además, dada su expresión regulada positivamente en el cáncer de próstata, PHOR-1 es útil como marcador de diagnóstico, determinación de fase y/o pronóstico para el cáncer de próstata, y de forma similar, puede ser un marcador para otros cánceres que expresen este receptor. Se describen en el presente documento los polinucleótidos correspondientes a o complementarios a todo o parte de los genes, ARNm y/o secuencias codificantes de PHOR-1, preferentemente en forma aislada, incluyendo polinucleótidos que codifican proteínas PHOR-1 y fragmentos de las mismas, ADN, ARN, híbridos de ADN/ARN y moléculas relacionadas, polinucleótidos u oligonucleótidos complementarios a los genes de PHOR-1 o secuencias de ARNm o partes de las mismas, y polinucleótidos u oligonucleótidos que hibridan con los genes de PHOR-1, los ARNm o con polinucleótidos que codifican PHOR-1. También se proporcionan medios para aislar ADNc y los genes que codifican PHOR-1. También se proporcionan moléculas de ADN recombinante que contienen polinucleótidos de PHOR-1, células transformadas o transducidas con dichas moléculas, y sistemas de huésped-vector para la expresión de productos génicos de PHOR-1. Se describen proteínas PHOR-1 y fragmentos polipeptídicos de las mismas, así como anticuerpos que se unen a proteínas PHOR-1 y fragmentos polipeptídicos. Los anticuerpos incluyen anticuerpos policlonales y monoclonales, anticuerpos murinos y de otros mamíferos, anticuerpos quiméricos, anticuerpos humanizados y totalmente humanos, anticuerpos marcados con un marcador detectable y anticuerpos conjugados con radionúclidos, toxinas u otras composiciones terapéuticas; también se describen procedimientos para detectar la presencia de polinucleótidos y proteínas PHOR-1 en diversas muestras biológicas, así... [Seguir leyendo]

1. Uso de un ARNm seleccionado del grupo que consiste en: (a) el que tiene la secuencia de nucleótidos de la SEC ID Nº: 1; (b) el que tiene la secuencia de nucleótidos de la SEC ID Nº: 1 del número de resto de nucleótido 133 al número de resto de nucleótido 1083; y (c) el que tiene la secuencia de nucleótidos del polinucleótido codificante contenido en el plásmido denominado p101P3A11 depositado en la Colección Americana de Cultivos Tipo como Nº de Acceso PTA-312; como un marcador para cáncer de próstata, riñón, útero, cuello de útero, estómago o rectal, en un procedimiento para detectar dicho cáncer. 2. El uso de la reivindicación 1, en el que el cáncer es cáncer de próstata. 3. El uso de la reivindicación 1 ó 2, en el que dicho procedimiento emplea una sonda que se une específicamente al ARNm definido en la reivindicación 1. 4. El uso de la reivindicación 3, en el que el cáncer es cáncer de próstata. 5. El uso de la reivindicación 3 ó 4, en el que la sonda está marcada con un marcador detectable. 6. El uso de la reivindicación 1 ó 2, en el que el procedimiento comprende producir ADNc a partir de una muestra por transcripción inversa usando al menos un cebador y amplificar el ADNc así producido. 7. El uso de la reivindicación 6, en el que dicha amplificación emplea cebadores con sentido y antisentido. 8. Un vector que comprende un ácido nucleico que tiene la secuencia de nucleótidos seleccionada del grupo que consiste en: (a) la secuencia de nucleótidos de la SEC ID Nº: 1; (b) la secuencia de nucleótidos de la SEC ID Nº: 1 del número de resto de nucleótido 133 al número de resto de nucleótido 1083; y (c) el polinucleótido contenido en el plásmido denominado p101P3A11 depositado en la Colección Americana de Cultivos Tipo como Nº de Acceso PTA-312; para su uso en el tratamiento de cáncer de próstata, riñón, útero, cuello de útero, estómago o rectal. 9. El uso de la reivindicación 8, en el que el vector es un vector viral. 10. El uso de la reivindicación 8 ó 9, en el que el cáncer es cáncer de próstata. E08165936 04-11-2011   61 E08165936 04-11-2011   62   63   64     66   67   68   69     71   72   73   74     76   77   78   79     81   82   83   84     86   87   88   89     91   92   93