ANTICUERPOS CONTRA BETA AMILOIDE CON GLICOSILACIÓN EN LA REGIÓN VARIABLE.

Anticuerpos contra beta amiloide con glicosilación en la región variable La presente invención se refiere a una preparación de molécula de anticuerpo purificado que se caracteriza porque al menos un sitio de unión al antígeno comprende una asparagina (Asn) glicosilada en la región variable de la cadena pesada (VH). Más específicamente, se proporciona una molécula de anticuerpo purificado que es capaz de reconocer específicamente el péptido -A4/A4 y que comprende una glicosilación en la región variable de la cadena pesada (VH). La presente invención se refiere a una mezcla de anticuerpos que comprenden uno o dos sitios de unión al antígeno glicosilados con una asparagina (Asn) glicosilada en la región variable de la cadena pesada, es decir, mezclas de isoformas de anticuerpos que comprenden una Asn glicosilada en la región variable de la cadena pesada (VH). También se divulgan composiciones o preparaciones de anticuerpos que comprenden específicamente isoformas de anticuerpos glicosilados. Además, se proporcionan los usos farmacéuticos y de diagnóstico para estos anticuerpos. Las isoformas de anticuerpos se pueden utilizar, por ejemplo, en la intervención farmacéutica de la amiloidogénesis o formación de placas de amiloide y/o en su diagnóstico. Aproximadamente el 70% de todos los casos de demencia se deben la enfermedad de Alzheimer que está asociada con el daño selectivo de las regiones del cerebro y los circuitos neurales críticos para la cognición. La enfermedad de Alzheimer se caracteriza por ovillos neurofibrilares, en particular, en las neuronas piramidales del hipocampo y numerosas placas de amiloide que contienen mayormente un núcleo denso de depósitos de amiloide y halos difusos. Las placas neuríticas extracelulares contienen grandes cantidades de un péptido predominantemente fibrilado denominado -amiloide, A-beta, A4, -A4 o A, ver Selkoe (1994), Ann. Rev. Cell Biol. 10, 373-403, Koo (1999), PNAS Vol. 96, págs. 9989-9990, US 4.666.829 o Glenner (1984), BBRC 12, 1131. Este -amiloide deriva de la proteína precursora de Alzheimer/proteína precursora de -amiloide (APP). Las APP son glicoproteínas de membrana integrales (ver Sisodia (1992), PNAS Vol. 89, pág. 6075) y se escinden endoproteolíticamente dentro de la secuencia A por medio de una proteasa de membrana de plasma, -secretasa (ver Sisodia (1992), loc. cit.). Además, una actividad adicional de la secretasa, en particular, la actividad de la -secretasa y -secretasa, conduce a la liberación extracelular del -amiloide (A) que comprende ya sea 39 aminoácidos (A39), 40 aminoácidos (A40), 42 aminoácidos (A42) o 43 aminoácidos (A43); ver Sinha (1999), PNAS 96, 11094-1053; Price (1998), Science 282, 1078 a 1083; WO 00/72880 o Hardy (1997), TINS 20, 154. Cabe destacar que el A tiene muchas formas que ocurren en forma natural, donde las formas humanas se denominan como las antes mencionadas A39, A40, A41, A42 y A43. La forma más predominante, A42, tiene la secuencia de aminoácidos (comenzando por el término N): DAEFRHDSGYEVHHQKLVFFAEDVGSNKGAIIGLMVGGVVIA (SEQ ID NO: 3). En A41, A40, A39, faltan los aminoácidos C-terminales, A, IA y VIA, respectivamente. En la forma A43, un residuo de treonina adicional está comprendido en el término C de la secuencia anteriormente descripta (SEQ ID NO: 3). El tiempo requerido para nuclear los fibrilos de A40 fue significativamente mayor que para nuclear fibrilos de A42; ver Koo, loc. cit. y Harper (1997), Ann. Rev. Biochem. 66, 385-407. Tal como se indica en Wagner (1999), J. Clin. Invest. 104, 1239-1332, el A42 se encuentra, con mayor frecuencia, asociado a las placas neuríticas y se considera que es más fibrilogénico in vitro. También se sugirió que el A42 sirve como semilla en la polimerización dependiente de la nucleación de péptidos A no cristalinos ordenados; Jarrett (1993), Cell 93, 1055-1058. El procesamiento de APP modificada y/o la generación de placas extracelulares que contienen deposiciones proteínicas no sólo se conocen de la patología de Alzheimer, sino también de sujetos que sufren otros trastornos neurológicos y/o degenerativos. Estos trastornos comprenden, inter alia, el síndrome de Down, la hemorragia cerebral hereditaria con amiloidosis de tipo holandés, la enfermedad de Parkinson, ELA (esclerosis lateral amiotrófica), la enfermedad de Creutzfeldt Jakob, la demencia relacionada con el VIH y la neuropatía motora. Hasta el momento, sólo se han descripto esquemas de intervención médica limitados para las enfermedades relacionadas con el amiloide. Por ejemplo, se han descripto inhibidores de la colinesterasa, tales como la galantamina, la rivastigmina o el donepezil, como beneficiosos para pacientes con Alzheimer que sólo presentan una enfermedad leve a moderada. Sin embargo, también se han informado eventos adversos debido a la acción colinérgica de estos fármacos. Si bien estos tratamientos mejoradores de la acción colinérgica producen cierto beneficio sintomático, la respuesta terapéutica no es satisfactoria para la mayoría de los pacientes tratados. Se ha estimado que se produce una mejora cognitiva significativa sólo en aproximadamente un 5% de los pacientes tratados y existe escasa evidencia de que el tratamiento altere significativamente el curso de esta enfermedad progresiva. En consecuencia, existe una gran necesidad clínica de disponer de tratamientos más eficaces y, en particular, aquellos que puedan detener o demorar la progresión de la enfermedad. Asimismo, más recientemente se han empleado antagonistas de los receptores NMDA, como la memantina. Sin embargo, se han informado eventos adversos debido a la actividad farmacológica. Además, dicho tratamiento con 2   estos antagonistas de los receptores NMDA puede considerarse, simplemente, como enfoque sintomático y no como un enfoque que modifique la enfermedad. Además se han propuesto enfoques de inmunomodulación para el tratamiento de los trastornos relacionados con el amiloide. El documento WO 99/27944 divulga conjugados que comprenden partes del péptido A y moléculas portadoras, donde dicha molécula portadora debe mejorar la respuesta inmune. Otro método de inmunización activa se menciona en el documento WO 00/72880, donde también se emplean fragmentos de A para inducir la respuesta inmune. Asimismo, se han propuesto enfoques de inmunización pasiva con anticuerpos anti-A generales en los documentos WO 99/27944 o WO 01/62801 y se han descripto anticuerpos humanizados específicos dirigidos contra partes del A en los documentos WO 02/46237, WO 02/088306 y WO 02/088307. El documento WO 00/77178 describe anticuerpos que se unen a un estado de transición adoptado por el -amiloide durante la hidrólisis. El documento WO 03/070760 divulga moléculas de anticuerpos que reconocen dos secuencias de aminoácidos discontinuas en el péptido A. El documento WO 03/016466 describe un anticuerpo anti-A humanizado que se modifica a fin de evitar cualquier glicosilación potencial en su cadena pesada, dado que una glicosilación en la(s) región(es) variable(s) de los anticuerpos se ha descripto en Wallick (1988) J. Exp. Med. 168, 1099-1109. El problema técnico subyacente a la presente invención es brindar medios y métodos eficaces en el manejo médico de trastornos del amiloide, en particular, medios y métodos para la reducción de las placas de amiloide perjudiciales en pacientes que necesitan una intervención médica (correspondiente). La presente invención brinda una molécula de anticuerpo purificado que se caracteriza porque al menos un sitio de unión al antígeno comprende una asparagina (Asn) glicosilada en la región variable de la cadena pesada (VH). El anticuerpo purificado de la invención o la composición de anticuerpos que se brinda en el presente documento está dirigida, en particular, contra el A y/o un fragmento del A. La molécula de anticuerpo purificado que se brinda en el presente documento y, en particular, la composición de anticuerpos o preparación de anticuerpos de la invención, es útil en la preparación de una composición farmacéutica o de diagnóstico para el tratamiento, reducción o prevención de una enfermedad asociada con la amiloidosis y/o formación de placas de amiloide. Un ejemplo de dicha enfermedad es la enfermedad de Alzheimer. En consecuencia, la presente invención se refiere a las realizaciones caracterizadas en las reivindicaciones. Por tanto, se refiere a una composición que comprende una molécula de anticuerpo que puede reconocer específicamente el péptido -A4/A4, siendo dicha molécula de anticuerpo una molécula de anticuerpo monoglicosilado o una molécula de anticuerpo doblemente glicosilado o en la que dicha composición comprende una mezcla de dicha molécula de anticuerpo monoglicosilado y dicha molécula de anticuerpo doblemente glicosilado, - en la que dicha molécula de anticuerpo monoglisosilado comprende... [Seguir leyendo]

1. Composición que comprende una molécula de anticuerpo que puede reconocer específicamente el péptido -A4/A4, siendo dicha molécula de anticuerpo una molécula de anticuerpo monoglicosilado o una molécula de anticuerpo doblemente glicosilado o en la que dicha composición comprende una mezcla de dicha molécula de anticuerpo monoglicosilado y dicha molécula de anticuerpo doblemente glicosilado, - en la que dicha molécula de anticuerpo monoglicosilado comprende una asparagina (Asn) glicosilada en la posición 52 de la SEQ ID NO:2 o de la SEQ ID NO:6 en la región variable de la cadena pesada (VH) y en la que dicha molécula de anticuerpo doblemente glicosilado comprende una asparagina (Asn) glicosilada en la posición 52 de la SEQ ID NO:2 o de la SEQ ID NO:6 en la región variable de la cadena pesada (VH) de ambos sitios de unión del anticuerpo, - en la que dicha molécula de anticuerpo comprende una CDR1 en la cadena pesada variable tal como se muestra en la SEQ ID NO: 10, una CDR2 en la cadena pesada variable tal como se muestra en la SEQ ID NO: 12, una CDR3 en la cadena pesada variable tal como se muestra en la SEQ ID NO: 14, una CDR1 en la cadena ligera variable tal como se muestra en la SEQ ID NO: 16, una CDR2 en la cadena ligera variable tal como se muestra en la SEQ ID NO: 18 y una CDR3 en la cadena ligera variable tal como se muestra en la SEQ ID NO: 20, y en donde dicha composición comprende menos del 5% de una molécula de anticuerpo que se caracteriza porque ningún sitio de unión al antígeno de dicha molécula de anticuerpo comprende una asparagina (Asn) glicosilada en la región variable de la cadena pesada (VH). 2. Composición según la reivindicación 1, en donde dicha asparagina (Asn) en la región variable de la cadena pesada (VH) está en la región CDR-2. 3. Composición según la reivindicación 1 ó 2, en donde dicho péptido -A4/A4 tiene la siguiente secuencia: DAEFRHDSGYEVHHQKLVFFAEDVGSNKGAIIGLMVGGVVIA (SEQ ID NO: 3) o una parte de al menos 15 aminoácidos de dicha secuencia. 4. Composición según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en la que dicha molécula de anticuerpo comprende una cadena pesada (VH) codificada por: (a) una molécula de ácido nucleico que comprende la secuencia de nucleótidos que se muestra en la SEQ ID NO:1 CAGGTGGAATTGGTGGAAAGCGGCGGCGGCCTGGTGCAACCGGGCGGCAGCCTGCGTCTGAGCTGC GCGGCCTCCGGATTTACCTTTAGCAGCTATGCGATGAGCTGGGTGCGCCAAGCCCCTGGGAAGGGTC TCGAGTGGGTGAGCGCTATTAATGCTTCTGGTACTCGTACTTATTATGCTGATTCTGTTAAGGGTCGTTT TACCATTTCACGTGATAATTCGAAAAACACCCTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGCGTGCGGAAGATAC GGCCGTGTATTATTGCGCGCGTGGTAAGGGTAATACTCATAAGCCTTATGGTTATGTTCGTTATTTTGAT GTTTGGGGCCAAGGCACCCTGGTGACGGTTAGCTCA; (b) una molécula de ácido nucleico que codifica para un polipéptido que tiene la secuencia de aminoácidos tal como se muestra en la SEQ ID NO: 2 QVELVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAMSWVRQAPGKGLEWVSAINASGTRTYYADSVKGRFTI SRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARGKGNTHKPYGYVRYFDVWGQGTLVTVSS (SEQ ID NO: 2); (c) una molécula de ácido nucleico que se hibrida a la molécula de ácido nucleico de (a) o (b) y que codifica para un polipéptido que es capaz de unirse al péptido -A4/A4 tal como se muestra en la siguiente secuencia de aminoácidos DAEFRHDSGYEVHHQKLVFFAEDVGSNKGAIIGLMVGGVVIA (SEQ ID NO: 3) o es capaz de unirse a un fragmento del mismo que comprende al menos 15 aminoácidos; (d) una molécula de ácido nucleico que se hibrida a la molécula de ácido nucleico de (a) o (b) y que codifica para un polipéptido que es capaz de unirse a al menos dos regiones en el péptido -A4/A4 tal como se muestra en la siguiente secuencia de aminoácidos DAEFRHDSGYEVHHQKLVFFAEDVGSNKGAIIGLMVGGVVIA (SEQ ID NO: 3) o a al menos dos regiones de un fragmento de la SEQ ID NO: 3 que comprende al menos 15 aminoácidos, en donde dichas dos regiones en el péptido -A4/A4 o el fragmento de éste comprenden los aminoácidos en la posición 3 a 6 y en la posición 18 a 26; o 83   (e) una secuencia de ácidos nucleicos que se degenera a una secuencia de ácidos nucleicos tal como se define en cualquiera de (a) a (d). 5. Composición según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, en la que dicha molécula de anticuerpo comprende una cadena pesada seleccionada del grupo que consiste en: (a) un polipéptido de cadena pesada codificado por una molécula de ácido nucleico tal como se muestra en las SEQ ID NO: 5, 23 ó 25; (b) un polipéptido de cadena pesada que tiene la secuencia de aminoácidos tal como se muestra en la SEQ ID NO: 6 ó 26; (c) un polipéptido de cadena pesada codificado por una molécula de ácido nucleico que se hibrida a la molécula de ácido nucleico definida en (a) y que codifica para un polipéptido que es capaz de unirse al péptido -A4/A4 tal como se muestra en la siguiente secuencia de aminoácidos DAEFRHDSGYEVHHQKLVFFAEDVGSNKGAIIGLMVGGVVIA (SEQ ID NO: 3) o a un fragmento del mismo que comprende al menos 15 aminoácidos; o (d) un polipéptido de cadena pesada codificado por una molécula de ácido nucleico que se hibrida a la molécula de ácido nucleico definida en (a) y que codifica para un polipéptido que es capaz de unirse a al menos dos regiones en el péptido -A4/A4 tal como se muestra en la siguiente secuencia de aminoácidos DAEFRHDSGYEVHHQKLVFFAEDVGSNKGAIIGLMVGGVVIA (SEQ ID NO: 3) o a al menos dos regiones de un fragmento de la SEQ ID NO: 3 que comprende al menos 15 aminoácidos, en donde dichas dos regiones en el péptido -A4 / A4 o su dicho fragmento comprenden los aminoácidos en la posición 3 a 6 y en la posición 18 a 26. 6. Composición según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, en donde dicha glicosilación en la Asn en la región VH se selecciona del grupo que consiste en (a) una estructura de azúcar del tipo complejo biantenario; (b) una estructura de azúcar del tipo híbrido biantenario; (c) una estructura de azúcar del tipo oligomanosa biantenaria; y (d) una estructura de azúcar biantenaria de cualquiera de las estructuras provistas en la figura 5 o la figura 27. 7. Composición según la reivindicación 6, en donde dicha estructura de azúcar no comprende una fucosilación del núcleo. 8. Composición según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, en donde dicha molécula de anticuerpo se produce de forma recombinante. 9. Composición según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8, en donde dicha molécula de anticuerpo se produce en una célula CHO. 10. Composición según la reivindicación 9, en donde dicha célula CHO es CHO K1 o CHO K1 SV. 11. Método para la preparación de una molécula de anticuerpo comprendida en la composición de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10 que comprende las etapas de (a) expresar de forma recombinante una molécula de ácido nucleico heteróloga que codifica para una molécula de anticuerpo tal como se ha definido en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7 en una célula cultivada de mamífero; (b) purificar dicha molécula de anticuerpo recombinantemente expresada a través de un método que comprende las etapas de (b1) purificación en columna de la proteína A; (b2) purificación en columna de intercambio iónico; y (b3) purificación en columna de exclusión molecular. 84   12. Método según la reivindicación 11, en el que dicha purificación en columna de intercambio iónico comprende una cromatografía de intercambio catiónico. 13. Método según la reivindicación 11 ó 12, que comprende además como etapa adicional (c) una cromatografía analítica y/o una etapa de concentración adicional. 14. Composición que comprende una molécula de anticuerpo preparada mediante el método de cualquiera de las reivindicaciones 11 a 13. 15. Composición según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10 ó 14, que es una composición de diagnóstico o farmacéutica. 16. Uso de la composición de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10, 14 ó 15 para la preparación de un medicamento para la prevención y/o tratamiento de una enfermedad asociada con amiloidogénesis y/o formación de placas de amiloide, seleccionada del grupo que consiste en demencia, enfermedad de Alzheimer, neuropatía motora, síndrome de Down, enfermedad de Creutzfeldt-Jakob, hemorragia cerebral hereditaria con amiloidosis de tipo holandés, demencia asociada con la formación de cuerpos de Lewy, enfermedad de Parkinson, demencia relacionada con VIH, ELA y trastornos neuronales relacionados con la edad. 17. Composición según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10, 14 ó 15 preparada para su uso como medicamento para la prevención y/o tratamiento de una enfermedad asociada con amiloidogénesis y/o formación de placas de amiloide, seleccionada del grupo que consiste en demencia, enfermedad de Alzheimer, neuropatía motora, síndrome de Down, enfermedad de Creutzfeldt-Jakob, hemorragia cerebral hereditaria con amiloidosis de tipo holandés, demencia asociada con la formación de cuerpos de Lewy, enfermedad de Parkinson, demencia relacionada con VIH, ELA y trastornos neuronales relacionados con la edad. 18. Uso de la composición según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10, 14 ó 15 para la preparación de un kit de diagnóstico para la detección de una enfermedad asociada con amiloidogénesis y/o formación de placas de amiloide, seleccionada del grupo que consiste en demencia, enfermedad de Alzheimer, neuropatía motora, síndrome de Down, enfermedad de Creutzfeldt-Jakob, hemorragia cerebral hereditaria con amiloidosis de tipo holandés, demencia asociada con la formación de cuerpos de Lewy, enfermedad de Parkinson, demencia relacionada con VIH, ELA y trastornos neuronales relacionados con la edad. 19. Composición según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10, 14 ó 15 preparada para su uso como kit de diagnóstico para la detección de una enfermedad asociada con amiloidogénesis y/o formación de placas de amiloide, seleccionada del grupo que consiste en demencia, enfermedad de Alzheimer, neuropatía motora, síndrome de Down, enfermedad de Creutzfeldt-Jakob, hemorragia cerebral hereditaria con amiloidosis de tipo holandés, demencia asociada con la formación de cuerpos de Lewy, enfermedad de Parkinson, demencia relacionada con VIH, ELA y trastornos neuronales relacionados con la edad. 20. Uso de la composición según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10, 14 ó 15 para la preparación de un medicamento para la desintegración de placas de -amiloide en una enfermedad asociada con amiloidogénesis y/o formación de placas de amiloide, seleccionada del grupo que consiste en demencia, enfermedad de Alzheimer, neuropatía motora, síndrome de Down, enfermedad de Creutzfeldt-Jakob, hemorragia cerebral hereditaria con amiloidosis de tipo holandés, demencia asociada con la formación de cuerpos de Lewy, enfermedad de Parkinson, demencia relacionada con VIH, ELA y trastornos neuronales relacionados con la edad. 21. Composición según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10, 14 ó 15 preparada para su uso como medicamento para la desintegración de placas de -amiloide en una enfermedad asociada con amiloidogénesis y/o formación de placas de amiloide, seleccionada del grupo que consiste en demencia, enfermedad de Alzheimer, neuropatía motora, síndrome de Down, enfermedad de Creutzfeldt-Jakob, hemorragia cerebral hereditaria con amiloidosis de tipo holandés, demencia asociada con la formación de cuerpos de Lewy, enfermedad de Parkinson, demencia relacionada con VIH, ELA y trastornos neuronales relacionados con la edad. 22. Uso de la composición según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10, 14 ó 15 para la preparación de una composición farmacéutica para la inmunización pasiva contra la formación de placas de -amiloide. 23. Composición según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10, 14 ó 15 preparada para su uso como una composición farmacéutica para la inmunización pasiva contra la formación de placas de -amiloide. 24. Uso de la composición según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10, 14 ó 15 para la preparación de una composición farmacéutica para el tratamiento preventivo contra una enfermedad asociada con amiloidogénesis y/o formación de placas de amiloide, seleccionada del grupo que consiste en demencia, enfermedad de Alzheimer, neuropatía motora, síndrome de Down, enfermedad de Creutzfeldt-Jakob,   hemorragia cerebral hereditaria con amiloidosis de tipo holandés, demencia asociada con la formación de cuerpos de Lewy, enfermedad de Parkinson, demencia relacionada con VIH, ELA y trastornos neuronales relacionados con la edad. 25. Composición según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10, 14 ó 15 preparada para su uso como composición farmacéutica para el tratamiento preventivo contra una enfermedad asociada con amiloidogénesis y/o formación de placas de amiloide, seleccionada del grupo que consiste en demencia, enfermedad de Alzheimer, neuropatía motora, síndrome de Down, enfermedad de Creutzfeldt-Jakob, hemorragia cerebral hereditaria con amiloidosis de tipo holandés, demencia asociada con la formación de cuerpos de Lewy, enfermedad de Parkinson, demencia relacionada con VIH, ELA y trastornos neuronales relacionados con la edad. 26. Uso según la reivindicación 24 o composición según la reivindicación 25, en el que se reducen las placas preexistentes o los intermediarios de agregación de -amiloide. 27. Uso de la composición según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10, 14 ó 15 para la preparación de un kit de diagnóstico para el diagnóstico de una enfermedad asociada con amiloidogénesis y/o formación de placas de amiloide en un paciente o para el diagnóstico de la susceptibilidad de un paciente para el desarrollo de una enfermedad asociada con amiloidogénesis y/o formación de placas de amiloide, seleccionándose dicha enfermedad del grupo que consiste en demencia, enfermedad de Alzheimer, neuropatía motora, síndrome de Down, enfermedad de Creutzfeldt-Jakob, hemorragia cerebral hereditaria con amiloidosis de tipo holandés, demencia asociada con la formación de cuerpos de Lewy, enfermedad de Parkinson, demencia relacionada con VIH, ELA y trastornos neuronales relacionados con la edad. 28. Composición según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10, 14 ó 15, preparada para su uso como kit de diagnóstico para el diagnóstico de una enfermedad asociada con amiloidogénesis y/o formación de placas de amiloide en un paciente o para el diagnóstico de la susceptibilidad de un paciente para el desarrollo de una enfermedad asociada con amiloidogénesis y/o formación de placas de amiloide, seleccionándose dicha enfermedad del grupo que consiste en demencia, enfermedad de Alzheimer, neuropatía motora, síndrome de Down, enfermedad de Creutzfeldt-Jakob, hemorragia cerebral hereditaria con amiloidosis de tipo holandés, demencia asociada con la formación de cuerpos de Lewy, enfermedad de Parkinson, demencia relacionada con VIH, ELA y trastornos neuronales relacionados con la edad. 29. Kit que comprende la composición según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10, 14, 15, 17, 19, 21, 23, 25, 26 ó 28 o una molécula de anticuerpo que se prepara mediante el método según cualquiera de las reivindicaciones 11 a 13. 86   87   88   89     91   92   93   94     96   97   98   99     101   102   103   104     106   107   108   109     111   112   113   114     116   117   118   119     121   122   123   124     126