Uso de un compuesto que tiene la fórmula (I): donde: cada R6,

R8, R9 y R10 es independientemente hidrógeno, hidroxilo, -(C1-C6)alquilo, -O(C1-C6)alquilo, -(C1-C6)alquilhalo, -OC(O)(C1-C6)alquilo o halo; y cada R7 es independientemente hidrógeno, -(C3-C8)cicloalquilo, -(C6-C10)arilo, o -(C1-C6)alquil-(C6-C10)arilo; o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos; para la fabricación de un medicamento para tratar el cáncer en un mamífero, en el que el compuesto es una mezcla racémica de isómeros (+) y (-)

Análogos del apogosipol para su utilización en el tratamiento del cáncer.

Esta solicitud es una solicitud divisional de la solicitud de patente Europa número 04777151.4.

Antecedentes de la invención

Actualmente hay necesidad de nuevos agentes potentes y selectivos para prevenir o tratar el cáncer, y en particular el melanoma, el cáncer de la cérvix o la leucemia. Uno de los métodos que están actualmente en estudio es la inducción selectiva de la apoptosis. Hay también necesidad de herramientas farmacológicas para el adicional estudio de los procesos fisiológicos asociados a la inducción selectiva de la apoptosis.

La muerte celular programada (apoptosis) es decisiva para la homeostasis tisular, para la eliminación fisiológica de las células no deseadas durante el desarrollo y en el mecanismo de defensa del huésped (Vaux y otros, Cell, 96:245 (1999)). La inhibición de la apoptosis está implicada en toda malignidad humana conocida. Esta inhibición les da a las células malignas una selectiva ventaja de crecimiento, permitiendo la supervivencia frente a la radiación o la quimioterapia. (Véanse Reed, Curr. Opin. Oncol., 7:541 (1995), y Kelekar y otros, Trends Cell. Biol., 8:324 (1998)). Se cree que las de la familia Bcl-2 de proteínas son importantes reguladores de la apoptosis; y miembros pro-supervivencia de esta familia, tales como las Bcl-x_L, contienen en la superficie un surco hidrofóbico del que se cree que permite la fijación del dominio BH3 de la pareja proapoptótica (Johnstone y otros, Cell, 108:153 (2002)). Se cree que esta fijación es crucial para la regulación de la apoptosis, y de hecho las proteínas pro y anti-supervivencia pueden anular mutuamente sus funciones mediante dimerización. Se cree que los miembros antiapoptóticos de la familia Bcl-2 están generalmente sobreexpresados en muchas malignidades humanas. Estas observaciones han conducido a un creciente interés en el descubrimiento de pequeñas moléculas dirigidas a las proteínas antiapoptóticas de la familia Bcl-2, y principalmente a las Bcl-x_L, como potenciales agentes terapéuticos anticáncer (Wang y otros, Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A., 97:7124 (2000); Degterev y otros, Nat. Cell Biol., 3:173 (2001); Tzung y otros, Nat. Cell Biol., 3:183 (2001); Enyedy y otros, J. Med. Chem., 44:4313 (2001)). Sin embargo, hasta ahora los compuestos propuestos no han logrado corroborar plenamente el papel de inhibidores de Bcl-x_L como potenciales agentes anticáncer (Kaneko y otros, Bioorg. Med. Chem. Lett., 11:887 (2001); Chin y otros, Angew. Chem. Int. Ed. Engl., 40:3806 (2001); Kutzki y otros, J. Am. Chem. Soc., 124:11838 (2002)) debido ya sea a su deficiente actividad in vivo o bien a la baja afinidad in vitro.

Por consiguiente, hay necesidad de identificar potentes compuestos celularmente permeables para apuntar a la familia Bcl-2 de receptores tales como, por ejemplo los Bcl-x_L, Bcl-2, Mcl-1, Bcl-W o Bcl-B. Hay necesidad de agonistas que puedan inhibir la fijación de BH3 a los receptores Bcl-2.

Hay adicionalmente necesidad de compuestos que sean útiles como quimiosensibilizadores en particular para los tipos de cáncer en los que las proteínas antiapoptóticas de la familia Bcl-2, tales como las Bcl-x_L, Bcl-2, Mcl-1 o Bcl-B, son sobreproducidas por las células de cáncer (tales como por ejemplo linfomas, neuroblastoma, cáncer de mama, cáncer de pulmón, cáncer de próstata, cáncer ovárico, leucemias y similares).

Breve exposición de la invención

La presente invención aporta el uso de un compuesto que tiene la fórmula (I):

donde: cada R⁶, R⁸, R⁹ y R¹⁰ es independientemente hidrógeno, hidroxilo, -(C₁-C₆)alquilo, -O(C₁-C₆)alquilo, -(C₁-C₆)alquilhalo, -OC(O)(C₁-C₆)alquilo o halo; y cada R⁷ es independientemente hidrógeno, -(C₃-C₈)cicloalquilo, -(C₆-C₁₀)arilo, o -(C₁-C₆)alquil-(C₆-C₁₀)arilo; o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos; para la fabricación de un medicamento para tratar el cáncer en un mamífero, en el que el compuesto es una mezcla racémica de isómeros (+) y (-).

En adición, la invención aporta el uso de un agente quimiosensibilizador que comprende un análogo de apogosipol, para la fabricación de un medicamento, siendo el medicamento para administración en combinación con un agente anticáncer, para tratar el cáncer en un sujeto;

donde el análogo de apogosipol es un compuesto que tiene la fórmula (I):

donde: cada R⁶, R⁸, R⁹ y R¹⁰ es independientemente hidrógeno, hidroxilo, -(C₁-C₆)alquilo, -O(C₁-C₆)alquilo, -(C₁-C₆)alquilhalo, -OC(O)(C₁-C₆)alquilo o halo; y cada R⁷ es independientemente hidrógeno, -(C₃-C₈)cicloalquilo, -(C₆-C₁₀)arilo, o -(C₁-C₆)alquil-(C₆-C₁₀)arilo; o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos; en el que el agente anticáncer se selecciona del grupo que consta de anticuerpos monoclonales humanizados, pequeñas moléculas citotóxicas, un péptido antimicrobiano, una caspasa, una toxina, una célula citotóxica, un agente de platino, una antraciclina un agente alquilante, un alcaloide de la vinca, un antimetabolito, un modulador del receptor de estrógenos, un esteroide, un antibiótico, una isofamida.

Breve descripción de las figuras

Figura 1. El Gosipol y la Purpurogalina compiten por la bolsa de fijación de BH3 de Bcl-x_L. Estructura química del Gosipol (a) y de la Purpurogalina (c). Los resultados de ensayos de fijación competitiva basados en la polarización de Fluorescencia (FPA) usando un péptido Bad marcado con fluoresceína (NLWAAQRYGRELRRMSD-K(FITC)-FVD) (Synpep Corporation, Dublin, CA) se muestran en (c) para el Gosipol y en (d) para la Purpurogalina.

Figura 2. Estudios de fijación por NMR (NMR = resonancia magnética nuclear). (a) espectros 2D[¹⁵N,¹H]-TROSY para Bcl-X_L en las formas apo (izquierda) y fijada a Gosipol (derecha). (b) Mapeo del desplazamiento químico de Gosipol en la estructura tridimensional de Bcl-x_L en complejo con péptido Bak (Código PDB 1BXL). El péptido se muestra en amarillo. Las regiones afectadas por la fijación de Gosipol están coloreadas en rojo. (c) y (d) experimentos de T_1p (tiempo de relajación 300 mseg.) con Gosipol y Purpurogalina, respectivamente: azul, sin proteína y rojo con Bel-X_L 10 μM. Los picos que se muestran en (c) representan a los grupos isopropilo y metilo en el Gosipol. En (d), el pico marcado con un asterisco representa al imidazol residual que está presente en la preparación de proteína.

Figura 3. Estudios de modelación molecular. (a) Representación superficial de Bcl-x_L con la estructura acoplada de Gosipol obtenida por FlexX. (b) Superposición de 5D1 (verde) y Gosipol (blanco con rojo para los átomos de oxígeno).

Figura 4. El efecto inhibitorio de compuestos en la supervivencia de las células de cáncer. Los efectos del Gosipol en la viabilidad de células tumorales en cultivo fueron verificados usando ensayos XTT con las líneas celulares (a) MCF7 y (b) ZR75-1 (círculos en negro). Como control negativo fue también sometido a ensayo un compuesto polifenólico genérico (círculos en blanco). Células HeLa de pocos pases (de un número de pases de entre 10 y 20) fueron transfectadas con los plásmidos pcDNA3-Bcl-x_L (círculos en negro) o pcDNA3 de control (círculos en blanco). (c) El análisis Inmunoblot confirmó la sobreexpresión de Bcl-x_L en las células transfectadas con compuesto pcDNA3-Bcl-x_L frente a los transfectantes de control con pcDNA3. (Los lisados celulares fueron normalizados para el contenido de proteína total; 25 μg por carril). (d) Las transfectantes HeLa fueron tratadas con varias dosis de Gosipol (0, 1, 3, 10 y 100 μM). Los datos indicados representan la...

1. Uso de un compuesto que tiene la fórmula (I):

donde: cada R⁶, R⁸, R⁹ y R¹⁰ es independientemente hidrógeno, hidroxilo, -(C₁-C₆)alquilo, -O(C₁-C₆)alquilo, -(C₁-C₆)alquilhalo, -OC(O)(C₁-C₆)alquilo o halo; y cada R⁷ es independientemente hidrógeno, -(C₃-C₈)cicloalquilo, -(C₆-C₁₀)arilo, o -(C₁-C₆)alquil-(C₆-C₁₀)arilo; o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos; para la fabricación de un medicamento para tratar el cáncer en un mamífero, en el que el compuesto es una mezcla racémica de isómeros (+) y (-).

2. El uso de la reivindicación 1, donde el cáncer se selecciona del grupo que consta de linfoma, neuroblastoma, cáncer de mama, cáncer de pulmón, cáncer de próstata, cáncer de ovarios o leucemia.

3. El uso de un agente quimiosensibilizador que comprende un análogo del apogosipol, para la fabricación de un medicamento, siendo el medicamento para administración en combinación con un agente anticáncer, para tratar el cáncer en un sujeto; en el que el análogo del apogosipol es un compuesto que tiene la fórmula (I):

donde: cada R⁶, R⁸, R⁹ y R¹⁰ es independientemente hidrógeno, hidroxilo, -(C₁-C₆)alquilo, -O(C₁-C₆)alquilo, -(C₁-C₆)alquilhalo, -OC(O)(C₁-C₆)alquilo o halo; y cada R⁷ es independientemente hidrógeno, -(C₃-C₈)cicloalquilo, -(C₆-C₁₀)arilo, o -(C₁-C₆)alquil-(C₆-C₁₀)arilo; o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos; en el que el agente anticáncer se selecciona del grupo que consta de anticuerpos monoclonales humanizados, pequeñas moléculas citotóxicas, un péptido antimicrobiano, una caspasa, una toxina, una célula citotóxica, un agente de platino, una antraciclina un agente alquilante, un alcaloide de la vinca, un antimetabolito, un modulador del receptor de estrógenos, un esteroide, un antibiótico, una isofamida.

4. El uso de la reivindicación 3, en el que el anticuerpo monoclonal humanizado es un anticuerpo receptor 2 del factor de crecimiento antiepidérmico.

5. El uso de la reivindicación 3, en el que la pequeña molécula citotóxica se selecciona del grupo que consta de doxorubicina, docetaxel, trastuzumab, ciclofosfamida, mitomicina C, bizelesina, etopósido, mitoxantrona, SN 38, Et 743, actinomicina D, bleomicina y TLK286.

6. El uso de la reivindicación 3, en el que la caspasa es caspasa 8.

7. El uso de la reivindicación 3, en el que la toxina se selecciona del grupo que consta de la cadena A de la toxina de la difteria, exotoxina de pseudomonas A, toxina del cólera, una toxina de fusión de ligandos y la toxina de ricinos communis (ricino).

8. El uso de la reivindicación 3, en el que la célula citotóxica es una célula citotóxica T.

9. El uso de la reivindicación 3, en el que la antraciclina se selecciona del grupo que consta de doxorubicina, idarubicina y daunorubicina.

10. El uso de la reivindicación 3, en el que el agente alquilante se selecciona del grupo que consta de melfalán y clorambucil.

11. El uso de la reivindicación 3, en el que el alcaloide de la vinca se selecciona del grupo que consta de videsina, vinblastina y vinorelbina.

12. El uso de la reivindicación 3, en el que el antimetabolito se selecciona del grupo que consta de 5-fluorouracilo y 5-fluorouridine.

13. El uso de la reivindicación 3, en el que el agente de platino es carboplatino.

14. El uso de la reivindicación 3, en el que el modulador del receptor de estrógenos es tamoxifeno.

15. El uso de la reivindicación 3, en el que el esteroide es metotrexato.