Composición adecuada para administración en mucosas a primates,

que comprende 300 µg de un antígeno de envoltura de VIH y 100 µg de una holotoxina mutante destoxicada de toxina lábil al calor (TL) de E. coli, que comprende una subunidad A mutada y una subunidad B, en la que la mutación de la subunidad A se selecciona entre una o varias del grupo constituido por una mutación de la serina en la posición 63 y una mutación de la alanina en la posición 72

Vacuna contra el VIH y procedimiento de uso.

Campo de la invención

La invención se refiere a vacunas de combinación contra el VIH, especialmente para administración a primates por vía mucosa.

Estado de la técnica

El síndrome de inmunodeficiencia adquirida (SIDA) se reconoce como una de las amenazas mayores para la salud a las que se enfrenta la medicina y la transmisión sexual del VIH en todo el mundo es la causa principal del SIDA. No hay hasta ahora cura o vacunas para el SIDA. Por tanto, es muy deseable el desarrollo de una vacuna o fármaco que pueda proteger específicamente contra la transmisión sexual en el sitio de entrada.

En 1983-1984 tres grupos identificaron independientemente el agente etiológico sospechoso del SIDA. Véase, por ejemplo, Barre-Sinoussi y otros (1983) Science 220:868-871; Montagnier y otros, en Human T-Cell Leukemia Viruses (Gallo, Essex & Gross, eds., 1984); Vilmer y otros (1984), The Lancet 1:753; Popovic y otros (1984), Science 224:497-500; Levy y otros (1984), Science 225:840-842. Estos aislados se denominaron de varias maneras virus asociados a linfadenopatía (VAL), virus linfotrópico de linfocitos T humano de tipo III (VLTH-III) o retrovirus asociado a SIDA (RVA). Todos estos aislados son cepas del mismo virus y más tarde fueron denominados colectivamente virus de inmunodeficiencia humana (VIH). Con el aislamiento de un virus relacionado que causa SIDA, las cepas originalmente denominadas VTH se denominan ahora VIH-1 y el virus relacionado se denomina VIH-2. Véase, por ejemplo, Guyader y otros, (1987) Nature 326:662-669; Brun-Vezinet y otros (1986) Science 233:343-346; Clavel y otros (1986) Nature 324:691-695. Consecuentemente, hay necesidad en la técnica de composiciones y procedimientos adecuados para tratar y/o prevenir en todo el mundo la infección por VIH.

Aunque hay alguna discrepancia en cuanto a la eficacia de respuestas mediadas por células o mediadas por anticuerpos en la protección frente a la enfermedad, hay un consenso general de que es muy deseable la generación de respuestas mediadas por células y de las mediadas por células. Las respuestas mediadas por anticuerpos inhibirían la unión del virus a sus dianas en los tejidos vaginal y rectal, esto es, en el sitio de transmisión, mientras que las respuestas mediadas por células jugarían un papel en la erradicación de células infectadas.

Así, dado que la mayoría de las infecciones por VIH se transmiten a través del tracto genital femenino seguido de esparcimiento sistémico del virus, se busca esforzadamente la inducción tanto de la inmunidad local como la sistémica.

Experimentos en ratones han sugerido que es posible la inmunización por vía mucosa con una combinación de proteínas Ogp 140 y gp120 junto con una toxina de E. coli lábil al calor (Vajdy, Conf. Retroviruses Oportunistic Infect, pág. 7:95, abstract 108, 30 de enero de 2000). El objetivo de la presente invención es proporcionar una composición para administración en mucosas en primates.

Breve sumario de la invención

Esta invención está dirigida a composiciones farmacéuticas que comprenden un antígeno de VIH y un coadyuvante mucoso en dosis adecuadas para inducir una respuesta inmune en un primate administrándolas a éste por vía mucosa, preferiblemente intranasal, intravaginal o intrarrectal. Estas composiciones se pueden usar para tratar o prevenir la infección por el VIH.

La invención se dirige también al uso de un antígeno del VIH y un coadyuvante mucoso en dosis adecuadas para inducir una respuesta inmune en un primate, para la fabricación de un medicamento para administración a primates por vía mucosa, preferiblemente intranasal, intravaginal o intrarrectal.

Los antígenos de VIH adecuados para uso en esta invención son proteínas de envoltura tales como gp120 y gp160, y fragmentos antigénicos y derivados de las mismas, tales como gp140 oligómera (Ogp140). Preferiblemente, los antígenos se optimizan en cuanto a inmunogenia. Los coadyuvantes mucosos adecuados para uso en esta invención son mutantes destoxicados de toxina de E. coli lábil al calor (TL) tal como LTR72 y LTK63.

Descripción detallada de la invención

1. Definiciones

Con el fin de facilitar la comprensión de la invención, se discutirán seguidamente términos seleccionados usados en la solicitud.

El término "polinucleótido", como se conoce en la técnica, se refiere a una molécula de ácido nucleico. Un "polinucleótido" puede incluir tanto secuencias de cadena doble como de cadena simple y se refiere, pero no limitativamente, a ADNc de ARNM viral, procariótico o eucariótico, secuencias de ARN y ADN genómico de ADN viral (por ejemplo, virus y retrovirus de ARN o ADN) o procariótico y, especialmente, secuencias de ADN sintético. El término capta también secuencias que incluyen cualquiera de los análogos de ADN o ARN e incluye modificaciones tales como supresiones, adiciones y sustituciones (generalmente de naturaleza conservadora), en la secuencia nativa, siempre que la molécula de ácido nucleico codifique una proteína terapéutica o antigénica. Estas modificaciones pueden ser deliberadas, por ejemplo por mutagénesis dirigida al sitio, o pueden ser accidentales, tales como mutaciones de hospedadores que producen los antígenos. Las modificaciones de polinucleótidos pueden tener un número cualquiera de efectos, incluido, por ejemplo, el de facilitar la expresión del polipéptido producto en una célula hospedadora.

Entre los polinucleótidos usados en la presente invención están polinucleótidos que codifican un fragmento inmunógeno o derivado del mismo. Entre tales fragmentos inmunógénos o derivados de ellos están incluidos fragmentos que codifican un epitopo de célula B o un epitopo de célula T como se discute más adelante.

Tal como se usan aquí, los términos "polipéptido" y "proteína" se refieren a un polímero de restos de aminoácidos y no están limitados a una longitud mínima del producto. Así, los péptidos, oligopéptidos, dímeros, multímeros y similares están incluidos en la definición. La definición abarca también proteínas de longitud entera y sus fragmentos. Los términos incluyen también modificaciones posexpresión del polipéptidos, por ejemplo, glicosilación, acetilación, fosforilación y similares. Además, a los fines de la presente invención, un "polipéptido" se refiere a una proteína que incluye modificaciones tales como supresiones, adiciones y sustituciones (generalmente de naturaleza conservadora) en la secuencia nativa, siempre que la proteína mantenga la actividad deseada. Estas modificaciones pueden ser deliberadas, como las realizadas mediante mutagénesis dirigida al sitio, o pueden ser accidentales, tales como las realizadas mediante mutaciones de hospedadores que producen la proteína o errores debidos a amplificación por RCP.

Por " ", cuando se refiere a un polinucleótido o un polipéptido, se entiende que la molécula indicada está separada y es discreta del organismo entero con el que se encuentra la molécula naturalmente o, cuando el polinucleótido o el polipéptido no se encuentra naturalmente, está suficientemente liberado de otras macromoléculas biológicas de manera que se puede usar para el fin previsto.

El término "antígeno", tal como se usa aquí, se refiere a una molécula que contiene uno o varios epitopos (sean lineales o conformacionales, o ambos) que estimulará el sistema inmune del hospedador para hacer una respuesta específica antigénica, humoral y/o celular. El término se usa de forma intercambiable con "inmunógeno". Normalmente, un epitopo de células B incluirá como mínimo aproximadamente 5 aminoácidos, pero puede ser tan pequeño como de 3-4 aminoácidos. Un epitopo de células T, tal como un epitopo LCT, incluirá como mínimo aproximadamente 7-9 aminoácidos y un epitopo de linfocitos T cooperadores, como mínimo aproximadamente 12-20 aminoácidos. Normalmente, un epitopo incluirá entre aproximadamente 7 y 15 aminoácidos, como pueden ser 9, 10, 12 o 15 aminoácidos. El término "antígeno" denota tanto antígenos de subunidades (esto es, antígenos que están separados y son discretos del organismo entero con el que el antígeno se encuentra unido en la naturaleza), así como bacterias, virus, hongos, parásitos u otros microbios, muertos, atenuados o inactivados.

Además, a los fines de la presente invención, un "antígeno" se refiere a una proteína que incluye modificaciones tales como supresiones, adiciones y sustituciones (generalmente de naturaleza conservadora)...

1. Composición adecuada para administración en mucosas a primates, que comprende 300 µg de un antígeno de envoltura de VIH y 100 µg de una holotoxina mutante destoxicada de toxina lábil al calor (TL) de E. coli, que comprende una subunidad A mutada y una subunidad B, en la que la mutación de la subunidad A se selecciona entre una o varias del grupo constituido por una mutación de la serina en la posición 63 y una mutación de la alanina en la posición 72.

2. Composición según la reivindicación 1, en la que la mencionada proteína de envoltura se selecciona entre el grupo constituido por gp 120, gp 160 y ogp 140.

3. Composición de cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en la que el mencionado antígeno de envoltura de VIH está optimizado en cuanto a inmunogenia.

4. Composición de cualquiera de las reivindicaciones precedentes, composición que es adecuada para administración intranasal, intravaginal o intrarrectal.

5. Composición de cualquiera de las reivindicaciones precedentes para uso como medicamento.

6. El uso de 300 µg de un antígeno de envoltura de VIH y 100 µg de una holotoxina mutante destoxicada de toxina lábil al calor (TL) de E. coli, que comprende una subunidad A mutada y una subunidad B, en el que la mutación de la subunidad A se selecciona entre una o varias del grupo constituido por una mutación de la serina en la posición 63 y una mutación de la alanina en la posición 72, en la fabricación de un medicamento para uso con el fin de inducir una respuesta inmune en un sujeto primate después de administración en mucosa del mencionado medicamento.

7. El uso de la reivindicación 6, en el que la mencionada proteína de envoltura se selecciona entre el grupo constituido por gp 120, gp 160 y gp140.

8. El uso de la reivindicación 6, en el que el mencionado medicamento se administra intranasalmente, intravaginalmente o intrarrectalmente.