TIENO(2,3-C)ISOQUINOLINAS PARA USAR COMO INHIBIDORES DE PARP.

Un compuesto de fórmula I **(Ver fórmula)** en la que Y es un heteroátomo seleccionado de azufre (S) o nitrógeno (N),

R1-R6 son los mismos o diferentes, y representan hidrógeno, hidroxi, un grupo OR7, carboxi, un grupo COOR7, un grupo amino, un grupo NHR7 o un halógeno, o R5 y R6 tomados conjuntamente forman un anillo condensado no aromático de 5 ó 6 miembros, R7 es un grupo alquilo de C1-C6, un grupo alquenilo de C2-C6 o un grupo cicloalquilo de C3-C7 opcionalmente sustituidos con uno o más grupos seleccionados del grupo que consiste en grupos hidroxi, alcoxi de C1-C4, carboxi, alcoxi de C1-C4-carbonilo, amino, mono o dialquilo de C1-C6-amino o halógeno, o una de sus sales o solvatos

Tieno[2,3-c]isoquinolinas para usar como inhibidores de PARP.

El tema de la presente invención es ciertos derivados heterocíclicos, incluyendo derivados de tieno[2,3-c]isoquinolin-3-ona y su uso en terapia como agentes inhibidores de la poli(ADP-ribosa) polimerasa (PARP).

Antecedentes de la invención

La poli(ADP-ribosa) polimerasa o poli(ADP-ribosa) sintasa (PARS) es una de las enzimas (EC 2.4.2.30) que cataliza la transferencia de ADP-ribosa desde NAD a los grupos carboxilo de las proteínas. Se encuentra principalmente en el núcleo celular y durante muchos años se ha considerado que su actividad se dirige hacia el mantenimiento de la integridad de la secuencia de DNA participando de algún modo en la reparación del daño sufrido por la secuencia de genes después de agresiones tóxicas o infecciosas. Algunas histonas, topoisomerasa I y II, DNA ligasa y otras proteínas nucleares hbox{son sustratos de esta enzima. Por otra parte, la PARP en sí misma puede sufrir auto poli-ADP ribosilación.

El cDNA que codifica a PARP ha sido clonado y la proteína ha sido purificada a partir de tejidos de muchas especies animales, incluyendo el hombre. La estructura de la PARP está disponible en varios bancos de datos, y consiste en:

        1. Un dominio amino terminal capaz de enlazarse a DNA (42 kDa),

        2. Una zona central también denominada dominio de auto-modificación (que puede así ser ADP-ribosilado y que en promedio pesa 16 kDa), y

        3. Un dominio carboxi terminal que contiene el sitio catalítico (55 kDa) y que tiene una composición de aminoácidos y una estructura terciaria muy conservada desde la mosca drosophila al hombre.

El estímulo necesario y suficiente para activar la enzima es el daño al DNA (formación de "muescas" u otras lesiones de la doble hélice) (de Murcia et al., 1992, Menisser-de Murcia et al., 1997). Esto ocurre comúnmente por la acción de oxidantes fuertes y/o de moléculas muy reactivas tales como los radicales libres que se forman abundantemente en los tejidos en el curso de varias situaciones patológicas. El óxido nítrico también puede directa o indirectamente dañar a la doble hélice del DNA, activar el PARP y llevar a la célula a la utilización masiva de NAD y a la disminución de ATP (Szabó et al., 1996).

Considerando entonces que la NAD es esencial para la fosforilación oxidativa y la resíntesis de ATP, puede entenderse cómo las células que están en esa situación no son capaces de mantener sus equilibrios iónicos y pueden sufrir degeneración tanto de tipo necrótica como de tipo apoptópica. La excesiva activación de la PARP bajo la acción de óxido nítrico recién formado puede ocurrir en el sistema nervioso central tras la activación de los receptores del glutamato del tipo NMDA asociados con la óxido nítrico sintasa neuronal (nNOS). También puede ocurrir en otros órganos o tejidos, ya que el óxido nítrico puede ser sintetizado por las NOS del endotelio o por las NOS inducibles de la microglía y los macrófagos, y difundirse en las células de alrededor. Muchos datos experimentales parecen estar en concordancia con esta hipótesis y se ha demostrado claramente que inhibiendo la PARP es posible reducir la muerte neuronal excitotóxica o la debida a los radicales libres en varios tipos cultivos neuronales (Schraufstatter et al., 1986; Cosi et al., 1994; Zhang et al., 1994). También se ha mostrado que los ratones recién nacidos con esta enzima estropeada son particularmente resistentes a la pérdida de tejido cerebral después de la oclusión de la arteria cerebral media o de la pérdida de células endocrinas después de la administración de toxinas. También se ha mostrado que las células extraídas de tales ratones son muy resistentes al estrés oxidante (Eliasson et al., 1997; Endres et al., 1997; Pieper et al., 1999). Los documentos WO99/59975 y WO99/11645 describen varias isoquinolinas condensadas como agentes inhibidores de la PARP.

Así, la importancia de tener agentes inhibidores de la PARP farmacéuticamente aceptables es clara.

Descripción de la invención

El objeto de la invención es los compuestos de fórmula I

en la que

Y es un heteroátomo seleccionado de azufre (S), nitrógeno (N) u oxígeno (O),

R₁-R₆ son los mismos o diferentes, y representan hidrógeno, hidroxi, un grupo OR₇, carboxi, un grupo COOR₇, un grupo amino, un grupo NHR₇ o un halógeno, o R₅ y R₆ tomados conjuntamente forman un anillo condensado aromático o no aromático de 5 ó 6 miembros,

R₇ es un grupo alquilo de C₁-C₆, un grupo alquenilo de C₂-C₆ o un grupo cicloalquilo de C₃-C₇ posiblemente sustituido con uno o más hidroxi, un grupo alcoxi de C₁-C₄, carboxi, un grupo alcoxi de C₁-C₄-carbonilo, amino, grupos mono o dialquilo de C₁-C₆-amino o halógeno.

La invención incluye además las sales y los solvatos no tóxicos.

Los compuestos de fórmula I que contienen grupos ionizables serán de hecho capaces de formar sales con ácidos y bases farmacéuticamente aceptables tales como los ácidos clorhídrico, sulfúrico, tartárico, maleico, cítrico, succínico, acético, fosfórico, benzoico, metanosulfónico y semejantes, o con bases tales como de metales alcalinos o alcalino térreos, amonio, alquilamonio y semejantes.

Ejemplos de solvatos adecuados incluyen las formas hidratadas de los compuestos I.

Se entiende que "derivado fisiológicamente equivalente" quiere decir un compuesto capaz de liberar in vivo un compuesto de fórmula I o uno de sus metabolitos activos.

Ejemplos de grupos alquilo de C₁-C₆ incluyen metilo, etilo, isopropilo, n-propilo y butilo.

Ejemplos de grupos alquenilo de C₂-C₆ incluyen vinilo y alilo.

Ejemplos de grupos cicloalquilo de C₃-C₇ incluyen ciclopropilo, ciclopentilo y ciclohexilo.

Ejemplos de grupos alcoxi de C₁-C₄ incluyen metoxi y etoxi.

Ejemplos de grupos alcoxi de C₁-C₄-carbonilo incluyen metoxicarbonilo y etoxicarbonilo.

Ejemplos de grupos alquilo de C₁-C₆-amino incluyen metilamino, dimetilamino, metiletilamino e isopropilamino.

El término halógeno se refiere a cloro, bromo, yodo o flúor, preferiblemente cloro o flúor.

Preferiblemente, en los compuestos de fórmula I, Y es un átomo de azufre.

Los compuestos más particularmente preferidos son aquellos en los que R₁-R₆ son hidrógeno o uno de R₁-R₆ es diferente de hidrógeno, tal como hidroxi, alcoxi, carboxi, alcoxicarbonilo, amino, alquilamino o halógeno como se definió anteriormente y los otros son hidrógeno.

En un grupo particularmente preferido de compuestos, R₄ es hidrógeno o un grupo diferente de hidrógeno, preferiblemente hidroxi o alcoxi o amino, Y es nitrógeno, oxígeno o azufre, preferiblemente azufre, y R₁, R₂, R₃, R₅ y R6 son hidrógeno.

La invención también proporciona un método para la preparación de los compuestos de fórmula I, el cual comprende la reacción con cloruro de tionilo de un compuesto de fórmula

en la que R'₂-R'₆ son R₁-R₆ como se definieron anteriormente o son grupos convertibles en R₁-R₆, seguida por reacción con azida de sodio y subsiguiente transposición de Curtius (J. Heterocyclic Chem., 1978, 15, 301-305) por termólisis.

Un ejemplo de un grupo convertible es nitro, el cual puede reducirse a amino.

Los compuestos II son conocidos o pueden obtenerse por métodos conocidos. En el caso de los compuestos en los que Y sea, por ejemplo,...

1. Un compuesto de fórmula I

en la que

Y es un heteroátomo seleccionado de azufre (S) o nitrógeno (N),

R₁-R₆ son los mismos o diferentes, y representan hidrógeno, hidroxi, un grupo OR₇, carboxi, un grupo COOR₇, un grupo amino, un grupo NHR₇ o un halógeno, o R₅ y R₆ tomados conjuntamente forman un anillo condensado no aromático de 5 ó 6 miembros,

R₇ es un grupo alquilo de C₁-C₆, un grupo alquenilo de C₂-C₆ o un grupo cicloalquilo de C₃-C₇ opcionalmente sustituidos con uno o más grupos seleccionados del grupo que consiste en grupos hidroxi, alcoxi de C₁-C₄, carboxi, alcoxi de C₁-C₄-carbonilo, amino, mono o dialquilo de C₁-C₆-amino o halógeno,

o una de sus sales o solvatos.

2. Compuestos según la reivindicación 1, en los que Y es un átomo de azufre.

3. Un compuesto de fórmula I,

en la que

Y es oxígeno,

R₁, R₂, R₃, R₄, R₅ y R₆ son los mismos o diferentes, y representan hidrógeno, hidroxi, OR₇, carboxi, COOR₇, amino, NHR₇ o halógeno, o R₅ y R₆ tomados conjuntamente forman un anillo condensado aromático o no aromático de 5 ó 6 miembros,

R₇ es alquenilo de C₂-C₆ o cicloalquilo de C₃-C₇ opcionalmente sustituidos con uno o más grupos hidroxi, alcoxi de C₁-C₄, carboxi, alcoxi de C₁-C₄-carbonilo, amino, mono o dialquilo de C₁-C₆-amino o halógeno,

o una de sus sales o solvatos.

4. Compuestos según las reivindicaciones 1 a 3, en los que R₁-R₆ son cada uno hidrógeno.

5. Un compuesto según las reivindicaciones 1 a 3, en el que uno de R₁-R₆ es hidroxi, alcoxi, carboxi, alcoxicarbonilo, amino, alquilamino o halógeno, y los otros son hidrógeno.

6. Compuestos según las reivindicaciones 1 a 3, en los que R₄ es hidrógeno, hidroxi o alcoxi o amino, y R₁, R₂, R₃, R₄, R₅ y R₆ son hidrógeno.

7. Un compuesto según la reivindicación 1, seleccionado de:

Tieno[2,3-c]isoquinolin-5(4H)-ona,

9-Hidroxitieno[2,3-c]isoquinolin-5(4H)-ona,

9-Metoxitieno[2,3-c]isoquinolin-5(4H)-ona,

o una de sus sales o solvatos.

8. El compuesto 3-(2-nitrofenil)tiofen-2-aldehído (8), o una de sus sales o solvatos.

9. Una composición farmacéutica, que comprende un compuesto según las reivindicaciones 1 a 7 mezclado con un vehículo adecuado.

10. Un compuesto según las reivindicaciones 1 a 7, para usar en la profilaxis o el tratamiento del daño debido a isquemia y reperfusión, enfermedades degenerativas, enfermedades inflamatorias, enfermedades tumorales, leucemia y/o sarcoma.

11. Un compuesto según las reivindicaciones 1 a 7, para usar en la inhibición de poli(ADP-ribosa) polimerasa en un animal o en un ser humano.

12. Uso de un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, en la fabricación de un medicamento para la profilaxis o el tratamiento del daño debido a isquemia y reperfusión, enfermedades degenerativas, enfermedades inflamatorias, enfermedades tumorales, leucemia y/o sarcoma.