Un compuesto de fórmula:

ciclo[Tic-Tyr D-Trp-Lys-Abu-Phe];

D-Nal-ciclo[Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Cys]-Thr-NH2;

4-(2-hidroxietil)-1-piperazinilacetil-D-Phe-ciclo(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH2; y

4-(2-hidroxietil)-1-piperazina-2-etanosulfonil-D-Phe-ciclo(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH2,

o una sal de adición ácida farmacéuticamente aceptable de los mismos

Procedimiento de modulación de la proliferación de células de carcinoma tiroideo medular.

Antecedentes de la invención

La somatostatina (SS), un tetradecapéptido descubierto por Brazeau y col., ha mostrado tener potentes efectos inhibitorios en diversos procesos secretores en tejidos tales como la pituitaria, el páncreas y el tracto gastrointestinal. La SS también actúa como un neuromodulador en el sistema nervioso central. Estos efectos biológicos de la SS, todos de naturaleza inhibitoria, son producidos mediante una serie de receptores acoplados a proteínas G, de los cuales se han caracterizado cinco subtipos diferentes (SSTR1-SSTR5) (Reubi JC y col., Cancer Res 47:551-558, Reisine T y col., Endocrine Review 16:427-442, Lamberts SW y col., Endocr Rev 12:450-482, 4 Patel YC, 1999 Front Neuroendocrinology 20:157-198). Estos cinco subtipos tienen afinidades similares por los ligandos de la SS endógenos, pero tienen una distribución diferente en los diversos tejidos. La somatostatina se une a los cinco subtipos diferentes de receptores (SSTR) con una afinidad relativamente elevada e igual para cada subtipo.

Hay pruebas de que la SS regula la proliferación celular deteniendo el crecimiento celular mediante los subtipos SSTR1, 2, 4 y 5 (Buscail L y col., 1995 Proc Natl Acad Sci EEUU 92:1580-1584; Buscail L y col., 1994 Proc Natl Acad Sci EEUU 91:2315-2319; Florio T y col., 1999 Mol Endocrinol 13:24-37; Sharma K y col., 1999 Mol Endocrinol 13: 82-90) o induciendo la apoptosis mediante el subtipo SSTR3 (Sharma K y col., 1996 Mol Endocrinol 10:1688-1696). La SS y sus diversos análogos han mostrado una inhibición de la proliferación de células sanas y neoplásicas in vitro e in vivo (Lamberts SW y col., Endocr Rev 12:450-482) mediante receptores específicos de la SS (SSTR) (Patel YC, 1999 Front Neuroendocrinology 20:157-198) y, posiblemente, diferentes acciones de los post-receptores (Weckbecker G y col., Pharmacol Ther 60:245-264; Bell GI, Reisine T 1993 Trends Neurosci 16:34-38; Patel YC y col., Biochem Biophys Res Commun 198:605-612; Law SF y col., Cell Signal 7:1-8). Además, hay pruebas de que distintos subtipos de SSTR se expresan en tejidos humanos sanos y neoplásicos (Virgolini I y col., Eur J Clin Invest 27:645-647), confiriendo diferentes afinidades a los tejidos para los diversos análogos de la SS y una respuesta clínica variable a sus efectos terapéuticos.

La unión a los diferentes tipos de subtipos de receptores de somatostatina se ha asociado al tratamiento de diversos trastornos y/o enfermedades. Por ejemplo, la inhibición de la hormona del crecimiento se ha atribuido al receptor tipo 2 de la somatostatina ("SSTR2") (Raynor y col., Molecular Pharmacol. 43:838 (1993); Lloyd y col., Am. J. Physiol. 268:G102 (1995)), mientras que la inhibición de la insulina se ha atribuido al receptor tipo 5 de la somatostatina ("SSTR5") (Coy y col. 197: 366-371 (1993)). La activación de los tipos 2 y 5 se ha asociado a la supresión de la hormona del crecimiento y, más concretamente, a los adenomas secretores de GH (acromegalia) y adenomas secretores de TSH. La activación del tipo 2 pero no del tipo 5 se ha asociado al tratamiento de los adenomas secretores de prolactina. Otras indicaciones asociadas a la activación de los subtipos de receptores de la somatostatina incluyen inhibición de insulina y/o glucagón para el tratamiento de la diabetes mellitus, angiopatías, retinopatías proliferativas, síndrome de dawn y nefropatías; inhibición de la secreción de ácidos gástricos y, más concretamente, de ulceras pépticas, fístulas enterocutáneas y pancreático-cutáneas, síndrome del intestino irritable, síndrome de evacuación gástrica rápida, síndrome de diarrea líquida, diarrea asociada con el SIDA, diarrea inducida por quimioterapia, pancreatitis grave o crónica y tumores secretores de hormonas gastrointestinales; tratamiento del cáncer tal como hepatomas; inhibición de la angio-génesis; tratamiento de trastornos inflamatorios tales como la artritis; retinopatías; rechazo crónico de aloinjertos; angioplastia; prevención del sangrado de vasos de injertos y gastrointestinal. Es preferible un análogo que sea selectivo para el subtipo o subtipos específicos de receptores de somatostatina responsables de la respuesta biológica deseada, reduciendo así la interacción con otros subtipos de receptores, lo que podría producir efectos secundarios no deseados.

La somatostatina (SS) y sus receptores (SSTR1 a SSTR5) se expresan en las células C parafoliculares humanas sanas y las células de carcinoma tiroideo medular (MTC). El MTC es un tumor que se origina en las células C parafoliculares tiroideas que produce calcitonina (CT), somatostatina y otros muchos péptidos (Moreau JP y col., Metabolism 45 (8 Suppl 1):24-26). Recientemente, Mato y col. mostraron que la SS y los SSTR se expresan en los MTC humanos (Mato E y col., J Clin Endocrinol Metab 83:2417-2420). Se ha documentado que la SS y sus análogos inducen una disminución en los niveles plasmáticos de CT y una mejora sintomática en pacientes con MTC. Sin embargo, hasta ahora la actividad antiproliferativa de los análogos de la SS sobre las células tumorales no se ha demostrado claramente (Mahler C y col., Clin Endocrinol 33:261-9; Lupoli G y col., Cancer 78:1114-8; Smid WM y col., Neth J Med 40:240-243). Por tanto, el desarrollo y evaluación de análogos de subtipos de SSTR selectivos sobre el crecimiento celular del MTC proporciona una herramienta útil para su aplicación clínica. Hasta ahora, no se han proporcionado datos relativos a la implicación de los subtipos específicos de SSTR en la regulación del crecimiento celular en los MTC.

La presente memoria descriptiva se refiere al descubrimiento de que la línea celular TT humana de los MTC, que muestra las características de la célula del MTC (Zabel M y col., 1992 Histochemistry 102:323-327, 2 Gagel RF y col., 1986 Endocrinology 118:1643-1651, Liu JL y col., 1995 Endocrinology 136:2389-2396) y que expresa de forma estable todos los subtipos de SSTR, responde a la activación de los SSTR2 y SSTR5 mediante agonistas selectivos del subtipo con dos patrones diferentes en términos de incorporación de [³H]thy y número de células. Los agonistas preferentes de los SSTR2 suprimen significativamente la incorporación de [³H]thy, es decir, inhiben la síntesis de ADN, y disminuyen la proliferación celular. Los agonistas selectivos de los SSTR2 aumentan significativamente la incorporación de [³H]thy en las células TT, es decir, aumentan la síntesis de ADN, pero solos no logran influir en la proliferación celular. Además, los antagonistas de los SSTR2 contrarrestan la acción de los agonistas preferentes de los SSTR2 en las células TT. Además, concentraciones crecientes de un agonista selectivo de los SSTR5 evitan, en función de la dosis, la supresión de la incorporación de [³H]thy en células TT y la proliferación producida por un agonista preferente de los SSTR2 y viceversa, mostrando un antagonismo entre tales agonistas.

Recientemente se han demostrado interacciones hetero- y homo-dímeras entre los subtipos de las familias de receptores del opiato (Jordan BA y col., 1999 Nature 399:697-700) y la SS (Rocheville M y col., 2000 J. Biol. Chem. 275:7862-7869). Los estudios en cultivos celulares de adenomas de pituitaria han demostrado que los SSTR subtipos 2 y 5 actúan de forma sinérgica en la supresión de la secreción de la hormona del crecimiento y prolactina (Shimon I y col., 1997 J. Clinical Invest. 100:2386-2392, Jaquet P y col., 2000 J Clin Endocrinol Metab. 85:781-792). El descubrimiento de que la activación de los SSTR5 disminuye la actividad antiproliferativa mediada por los SSTR2 difiere de los resultados en otros tejidos (Patel YC, 1999 Front Neuroendocrinology 20:157-198, Buscail L y col., 1995 Proc Natl Acad Sci EEUU 92:1580-1584, Buscail L y col., 1994 Proc Natl Acad Sci EEUU 91:2315-2319, Shanna K y col., 1996 Mol Endocrinol 10:1688-1696). Esta es la primera demostración de que los subtipos 2 y 5 de SSTR pueden actuar de forma antagonista en la regulación del crecimiento celular.

Por tanto, los agonistas preferentes de los SSTR2 y SSTR5 ejercen diferentes efectos sobre la proliferación de la línea celular TT tiroidea medular humana in vitro, según su selectividad específica por los SSTR específicos. La proliferación de la línea celular TT se puede disminuir mediante los agonistas selectivos de los SSTR2, pero no mediante los agonistas de los SSTR5, y un agonista de los SSTR5 puede evitar los efectos antiproliferativos mediados por los SSTR2. El papel inhibidor clave de los SSTR2 sobre la proliferación de las células de los MTC demuestra que...

1. Un compuesto de fórmula:

ciclo[Tic-Tyr D-Trp-Lys-Abu-Phe];

D-Nal-ciclo[Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Cys]-Thr-NH₂;

4-(2-hidroxietil)-1-piperazinilacetil-D-Phe-ciclo(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH₂; y

4-(2-hidroxietil)-1-piperazina-2-etanosulfonil-D-Phe-ciclo(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH₂,

o una sal de adición ácida farmacéuticamente aceptable de los mismos.

2. Un compuesto de fórmula:

ciclo[Tic-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Phe];

D-Nal-ciclo[Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Cys]-Thr-NH₂;

4-(2-hidroxietil)-1-piperazinilacetil-D-Phe-ciclo(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH₂; y

4-(2-hidroxietil)-1-piperazina-2-etanosulfonil-D-Phe-ciclo(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH₂,

o una sal de adición ácida farmacéuticamente aceptable de los mismos, para uso como agonista de los receptores de somatostatina.

3. Un compuesto según la reivindicación 2, en el que dicho agonista de los receptores de somatostatina es un agonista de los SSTR2.

4. El uso de un compuesto de fórmula:

ciclo[Tic-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Phe];

D-Nal-ciclo[Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Cys]-Thr-NH₂;

4-(2-hidroxietil)-1-piperazinilacetil-D-Phe-ciclo(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH₂; y

4-(2-hidroxietil)-1-piperazina-2-etanosulfonil-D-Phe-ciclo(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH₂,

o una sal de adición ácida farmacéuticamente aceptable de los mismos para la fabricación de un medicamento para uso como un agonista de los receptores de somatostatina.

5. El uso según la reivindicación 4, en el que dicho agonista de los receptores de somatostatina es un agonista de los SSTR2.

6. Un compuesto de fórmula:

D-Phe-Phe-Trp-D-Trp-Lys-Thr-Phe-Thr-NH₂,

o una sal de adición ácida farmacéuticamente aceptable del mismo.

7. Un compuesto de fórmula:

D-Phe-Phe-Trp-D-Trp-Lys-Thr-Phe-Thr-NH₂,

o una sal de adición ácida farmacéuticamente aceptable del mismo, para uso como agonista de los receptores de la somatostatina.

8. Un compuesto para uso según la reivindicación 7, en el que dicho agonista de los receptores de somatostatina es un agonista de los SSTR5.

9. El uso de un compuesto de fórmula:

D-Phe-Phe-Trp-D-Trp-Lys-Thr-Phe-Thr-NH₂,

o una sal de adición ácida farmacéuticamente aceptable del mismo para la fabricación de un medicamento para uso como un agonista de los receptores de la somatostatina.

10. El uso según la reivindicación 9, en el que dicho agonista de los receptores de somatostatina es un agonista de los SSTR5.