Péptidos que modulan la actividad del IGF y sus aplicaciones.

Péptido que comprende la secuencia de 20 a 24 aminoácidos (I) siguiente:

en la que:

- Pa representa una secuencia que comprende de 10 a 12 aminoácidos elegida entre las secuencias:

- X1 es un resto de lisina, arginina o histidina;

- X2 es un resto de treonina o lisina;

- X3 es un resto de aspartato o glutamato; y

- Pb representa una secuencia que comprende de 5 a 7 aminoácidos elegida entre las secuencias:, o

un péptido resistente a la proteólisis definido por que deriva de la secuencia (I) mediante modificaciones del extremoamino en forma de un acetilo, y/o del extremo carboxilo en forma de un grupo amida y/o de al menos un enlacepeptídico modificado y reemplazado por un enlace (CH2NH), un enlace (NHCO), un enlace (CH2-O), un enlace (CH2-S), un enlace (CH2CH2), un enlace (CO-CH2), un enlace (CHOH-CH2), un enlace (N-N), un enlace alqueno-E oincluso un enlace -CH≥CH, o un péptido homólogo definido por que se deriva de la secuencia (I) mediante una ovarias sustituciones conservativas y que presenta más del 80% de los aminoácidos idénticos a la secuencia (I).

Péptidos que modulan la actividad del IGF y sus aplicaciones La invención se refiere a los péptidos moduladores del IGF-1

Antecedentes de la técnica El proceso canceroso, que se traduce en una proliferación celular descontrolada, es a menudo la expresión de una sobreexpresión de factores de crecimiento y/o de sus receptores en una misma célula (Moyse et al. 1985, Cassoni et al. 2006, Hanahan et al. 2000) .

Numerosos factores, que actúan en red, son responsables de la progresión del ciclo celular y de la proliferación celular. En particular, un grupo de estos factores, denominados de «crecimiento», están representados por péptidos

capaces de estimular la entrada en fase S y, al final, la división celular. Es el caso de los IGF (factores de crecimiento insulínicos) (Pardee 1989, Cross et al. 1991) .

El IGF-1, en particular, que se sintetiza después de una estimulación de la hormona de crecimiento (GH, por growth hormone) , actúa como una hormona endocrina e, igualmente, se puede considerar la verdadera hormona de crecimiento (Laron, 2001) . Al actuar tanto de acuerdo con un mecanismo tanto paracrino como autocrino, esta hormona tiene una función importante en los niños, en los que estimula el crecimiento, mientras que en los adultos hace aumentar el anabolismo.

El receptor específico de esta hormona (IGF-1R) se expresa en numerosos tipos celulares diferentes y, por consiguiente, muchos tejidos del organismo dependen de la acción del IGF-1: se pueden citar el hígado, los riñones, el pulmón, los músculos, el tejido óseo y el cartílago, pero también el tejido nervioso. Por otra parte, el IGF-1 tiene efectos cercanos a los de la insulina porque se puede fijar —con una actividad débil— al del receptor de la insulina, regula el desarrollo de las células nerviosas y regula la síntesis del ADN.

La fijación del IGF-1 al receptor induce una señal intracelular que estimula el crecimiento y la proliferación celular (Perona, 2006) . Esta actividad hace del IGF-1 a la vez un potente inhibidor de la apoptosis (muerte celular programada) y un activador de la síntesis proteica (Yanochko et al. 2006, Colòn et al. 2007, Inoue et al. 2005) .

Finalmente, en algunas condiciones, el IGF-1 puede tener la doble función de inductor de la apoptosis y de estimulador de la proliferación celular (Fu et al. 2007, Rabinovsky, 2004a) .

La red de señalización del IGF desempeña una función crucial en la progresión tumoral, incluso en el fenómeno metastásico (Hofmann et al. 2005) y en numerosos trabajos tanto experimentales como epidemiológicos se tiende a establecer una correlación significativa entre una tasa importante de IGF-1 y/o de su receptor y el aumento del 30 riesgo, es decir, el establecimiento de una proliferación cancerosa (Vella et al. 2001, Talapatra et al. 2001, Kucab et al. 2003, Kambhampati et al. 2005, Bjorndahl et al. 2005, Gennigens et al. 2006, Velcheti et al. 2006, Yanochko et al. 2006, Sisci et al. 2007, Samani et al. 2007) . De una manera general, está bien establecida la función del eje GH/IGF1 en la oncogénesis y sobre todo en la estimulación de la progresión tumoral, como demuestran numerosos trabajos epidemiológicos y un estudio muy reciente que muestra que una deficiencia congénita del IGF-1 parece proteger

frente al desarrollo de un cáncer (Sheva et al. 2007) .

Los estudios clínicos con moléculas inhibidoras de la actividad de IGF demuestran el gran interés que puede tener su utilización en los diferentes tipos de cáncer, su efecto terapéutico cuando actúa en sinergia con la quimioterapia y la irradiación (Min et al. 2005, Carmiraud et al. 2005, Chinnavian et al. 2006, Wu et al. 2006, Deutsh et al. 2005, Warshamana-Greene et al. 2005) . El IGF-1, al ser un mediador de la hormona de crecimiento, su producción puede ser retrasada o inhibida por la somatostatina antes de producir la hormona de crecimiento (GH) .

La somatostatina (hormona inhibidora de la liberación la somatotropina, o SRIF por su nombre en inglés) , secretada desde el hipotálamo, es un antagonista natural de la GHRH (neuropéptido que estimula la síntesis de la GH) . En particular, al inhibir la GH, la SRIF inhibe la síntesis del IGF-1. Pero la SRIF tiene también una acción periférica, especialmente al actuar como una hormona digestiva que inhibe, por ejemplo, la secreción de las hormonas 45 gastrointestinales y pancreáticas.

La capacidad que tienen la SRIF y sus análogos sintéticos para inhibir la proliferación celular y para desencadenar la muerte celular mediante mecanismos indirectos o directos se aprovecha en numerosos protocolos terapéuticos dirigidos contra diferentes tipos de cánceres en la medicina clínica humana. Además, la SRIF es capaz de inhibir la angiogénesis, lo que representa un interés potencial en la medicina clínica para el control indirecto del crecimiento 50 de los tumores (Ferjoux et al. 2000) . En efecto, los tumores se alimentan por la neovascularización (angiogénesis) , o los análogos de la SRIF, que inhiben la proliferación celular, tienen de igual forma un efecto indirecto sobre la secreción de los factores de crecimiento, tal como el factor de crecimiento del endotelio vascular (VEGF, por vascular endothelial growth factor) , a la vez que reduce la quimiotaxia de los monocitos (Dasgupta 2004, Garcia de la Torre et al. 2002) .

Sin embargo, la utilización de los análogos de la SRIF sólo es posible en los cánceres que expresan los receptores de la SRIF. De esta forma, la eficacia de los análogos de la SRIF utilizados en la medicina clínica sólo se ha demostrado explícitamente en el tratamiento de los tumores neuroendocrinos, gastroenteropancreáticos, del cerebro, de la mama, de la próstata y del pulmón (Ferjoux et al. 2000) . Por otra parte, no hay que olvidar que la tasa y el perfil de expresión de los receptores de la SRIF varía enormemente entre los diferentes carcinomas.

Se han propuesto moléculas análogas de la somatostatina, inhibidoras del «sistema IGF» (Pawlikoski M. et al. 2004) . Se trata especialmente del BIM 23A387, de la octreotida y de la lanreotida (dos péptidos octaméricos) . Estas moléculas modulan la expresión del receptor o de su ligando, y son candidatos interesantes para el tratamiento de los diferentes tipos de cáncer y de la acromegalia. Otro ejemplo, el ligando biespecífico y sintético BIM-23244 (Rani C. 2004, Rani C. 2006, Pandit A. 2008) es capaz de inhibir la secreción de la hormona de crecimiento en los adenomas somatótropos.

Compendio de la invención Los inventores proponen ahora nuevos péptidos capaces de modular los efectos del IGF-1. Estos péptidos comprenden la secuencia de 20 a 24 aminoácidos (I) que viene a continuación:

(I) (SEQ ID n.º 1)

en la que:

-Pa representa una secuencia que comprende de 10 a 12 aminoácidos elegida entre las secuencias:

-X1 es un resto de lisina, arginina o histidina;

-X2 es un resto de treonina o lisina;

-X3 es un resto de aspartato o glutamato; y

-Pb representa una secuencia que comprende de 5 a 7 aminoácidos elegida entre las secuencias:

Asimismo se incluye en la invención un péptido resistente a la proteólisis derivado de la secuencia (I) por modificación del extremo amino en forma de acetilo, y/o del extremo carboxilo en forma de un grupo amida y/o de al menos un enlace peptídico modificado y reemplazado por un enlace (CH2-NH) , un enlace (NH-CO) , un enlace (CH2-O) , un enlace (CH2-S) , un enlace (CH2-CH2) , un enlace (CO-CH2) , un enlace (CHOH-CH2) , un enlace (N-N) , un enlace alqueno-E o incluso un enlace (CH=CH) , o un péptido homólogo definido por derivarse de la secuencia (I) mediante una o varias sustituciones conservativas y que presentan más del 80% de los aminoácidos idénticos a los de la secuencia (I) .

Estos péptidos son útiles para modular, preferiblemente para estimular, una proliferación celular in vitro.

La invención tiene asimismo por objeto una composición farmacéutica que comprende al menos tal péptido como principio activo, asociado a uno o varios excipientes fisiológicamente aceptables.

La presente invención también tiene por objeto un péptido, tal como el definido aquí, para una utilización como medicamento.

Descripción detallada de la invención Definiciones La terminología «modulación» se refiere a una actividad inhibidora y/o activadora de los péptidos de la invención sobre las funciones del IGF-1.

Por «inhibición» se entiende todo efecto inhibidor de la síntesis del IGF-1 y/o la expresión del IGF-1R que incluye una inhibición y/o una regulación negativa que reduce la actividad, la activación, las funciones y/o la expresión del... [Seguir leyendo]

1. Péptido que comprende la secuencia de 20 a 24 aminoácidos (I) siguiente:

(I) (SEQ ID n.º 1) en la que:

-Pa representa una secuencia que comprende de 10 a 12 aminoácidos elegida entre las secuencias:

-X1 es un resto de lisina, arginina o histidina;

-X2 es un resto de treonina o lisina;

-X3 es un resto de aspartato o glutamato; y

-Pb representa una secuencia que comprende de 5 a 7 aminoácidos elegida entre las secuencias:

un péptido resistente a la proteólisis definido por que deriva de la secuencia (I) mediante modificaciones del extremo amino en forma de un acetilo, y/o del extremo carboxilo en forma de un grupo amida y/o de al menos un enlace peptídico modificado y reemplazado por un enlace (CH2NH) , un enlace (NHCO) , un enlace (CH2-O) , un enlace (CH2-S) , un enlace (CH2CH2) , un enlace (CO-CH2) , un enlace (CHOH-CH2) , un enlace (N-N) , un enlace alqueno-E o incluso un enlace -CH=CH, o un péptido homólogo definido por que se deriva de la secuencia (I) mediante una o varias sustituciones conservativas y que presenta más del 80% de los aminoácidos idénticos a la secuencia (I) .

2. Péptido según la reivindicación 1, en el que X1 es un resto de lisina, X2 es un resto de treonina y X3 es un resto de aspartato.

3. Péptido según la reivindicación 2, que consiste en la secuencia (SEQ ID n.º 2) .

4. Composición farmacéutica que comprende un péptido según una de las reivindicaciones 1 a 3 como principio activo, en asociación con uno o varios excipientes farmacéuticamente aceptables.

5. Utilización del péptido según una de las reivindicaciones 1 a 3, para modular una proliferación celular in vitro.

6. Péptido según una de las reivindicaciones 1 a 3, a modo de medicamento.

7. Péptido según una de las reivindicaciones 1 a 3, para una utilización con una dosis adaptada para estimular la síntesis de IGF-1 y/o la expresión del receptor de IGF-1.

8. Péptido según la reivindicación 7, utilizado in vivo con una dosis diaria eficaz de menos del 100 μg, preferiblemente de 10 μg a 100 μg, más preferiblemente de 10 μg y 50 μg.

9. Péptido según una de las reivindicaciones 1 a 3, para una utilización como sustituto de la hormona de crecimiento.

10. Péptido según una de las reivindicaciones 1 a 3, para una utilización en el tratamiento de la insuficiencia renal crónica, del síndrome de Turner o del síndrome de Prader-Willi, o

en el tratamiento terapéutico del síndrome metabólico, de enfermedades autoinmunitarias y/o neurodegenerativas.

11. Péptido según una de las reivindicaciones 1 a 3, para una utilización como agente neurótrofo y/o neuroprotector.

12. Péptido según una de las reivindicaciones 1 a 3, para una utilización a una dosis adaptada para inhibir la síntesis de IGF-1 y/o la expresión del receptor de IGF-1.

13. Péptido según la reivindicación 12, para una utilización in vivo con una dosis diaria eficaz de al menos 300 μg

al día, preferiblemente de 300 μg a 3 mg al día, más preferiblemente de 1 mg a 3 mg, mucho más preferiblemente 5 de 2 mg a 3 mg.

14. Péptido según una de las reivindicaciones 1 a 3, para una utilización como sustituto de la somatostatina.

15. Péptido según una de las reivindicaciones 1 a 3, para una utilización en el tratamiento de la enfermedad de Alzheimer, o para una utilización en el tratamiento de la acromegalia o del cáncer, en particular en el tratamiento de metástasis.