COMBINACIONES DE FACTORES REGULADORES DEL CRECIMIENTO Y DE HORMONAS PARA EL TRATAMIENTO DE LAS NEOPLASIAS.

La presente invención se refiere al campo de la inmunología, la endocrinología y la oncología,

y en particular se basa en la generación de respuesta inmune, de forma combinada, hacia determinados factores de crecimiento y hormonas. Un efecto sinérgico entre factores reguladores del crecimiento (EGF, TGF, VEGF) y de hormonas involucradas en la cascada de liberación de hormonas sexuales, o de la reproducción: (GnRH, LH, FSH), descubierta aquí potencia la respuesta antitumoral, expresada como reducción de la masa tumoral y un aumento del tiempo de supervivencia

Combinaciones de factores reguladores del crecimiento y de hormonas para el tratamiento de las neoplasias.

Campo de la invención

La presente invención se refiere principalmente al campo de la inmunología, la endocrinología y la oncología, y, en particular, a las composiciones farmacéuticas que comprenden una combinación de factores reguladores del crecimiento (EGF, TGF, VEGF) y las hormonas sexuales o los implicados en la cascada de liberación de hormonas sexuales o las hormonas de reproducción, que producen una respuesta autoinmunitaria combinada para el tratamiento de las neoplasias.

Técnica anterior

La hormona liberadora de gonadotropina (Ngr.), también conocida como hormona liberadora de la hormona luteinizante (LHRH), es una hormona peptídica hipotalámica responsable de la liberación de la hormona luteinizante (LH) y de la hormona estimuladora de los folículos (FSH) de la adenohipófisis.

Junto con la Ngr. Producida por el sistema hipotalámico existen pruebas de la producción de GnRH en otros lugares del cerebro (Jennes L, Conn P. M. "Gonadotropin-releasing hormona and its receptors in the rat brain". Front Neuroendocrinol. 1994, vol. 15, pág. 51-77), así como en células de la granulosa de ovarios de rata (Peng C., Fan N. C., Ligier M., Vaananen J., Leung P. C. "Expression and regulation of gonadotropin-releasing hormone (GnRH) and GnRH receptor messenger ribonucleic acids in human granulosa-luteal cells". Endocrinology 1994, vol. 135, pág. 1740-1746), en células de testículo (Di Matteo L., Vallarino M., Pierantoni R. "Localization of GnRH molecular forms in the brain, pituitary and testes of the frog, Rana esculenta". J. Exp. Zool. 1996, vol. 247, pág. 33-40), en placenta humana (Gohar J., Mazor M., Lieberman J. R. "GnRH in pregnancy" Arch. Gynecol. Obstet. 1996, vol. 259, pág. 1-6), en el sistema inmunitario (Jacobson J. D., Crofford L. J., Sun L., Wilder R. L. "Cyclical expression of GnRH and GnRH receptor mRNA in lymphoid organs". Neuroendocrinology 1198, vol. 67, pág. 117-125) y la hipófisis (Bauer T. W., Moriarty C. M., Childs G. V. "Studies of immunoreactive gonadotropin releasing hormona (GnRH) in the rat anterior pituitary". J. Histochem. Cytochem, 1981, vol. 29, pág. 1171-1178).

La gonadectomía es un procedimiento terapéutico bien conocido necesario para el tratamiento de tumores dependientes de los esteroides gonadales. Los análogos de la GnRH Pueden ejercer su actividad anti-tumoral, no sólo a través de la castración química sino también mediante un efecto directo sobre las células tumorales (Couillard S., Labrie C., Belanger A., Candas B., Pouliot F., Labrie F. "Effect of dehydriepiandrosterone and anti-androgen EM-800 on growth of human ZR-75-1 breast cancer xenografts". J. Nat. Cancer Inst. 1998, May 20, pág. 772-778; Kolle S. y col., "Expression of growth hormone receptor in human prostatic carcinoma and hyperplasia". Int. J. Oncol. 1999, vol. 14, Nº 5, pág. 911-916).

De igual modo, se ha descrito que un antagonista de GnRH (MZ-4-71) puede suprimir el crecimiento de líneas celulares de cáncer de próstata independientes de andrógenos PC-3, DU-145 y Dunning AT-1 (A. Jungwirth et al., "Inhbition of in vivo proliferation of androgen-independent prostate cancers by an antagonist of growth hormone-releasing hormone". British Journal of Cancer 1997, vol. 75, Nº 11, páginas 1585-1592.

La línea celular de Dunning R3327-G se ha usado ampliamente para diferentes estudios generalmente asociados con el tratamiento de tumores prostáticos, así como un procedimiento bien establecido hoy en día. El receptor del EGF se ha encontrado en modelos de próstata sensible a tumores adrogénicos de Dunning R3327 (Damber J. E., Bergh B., Gavfels M. "Epidermal growth factor receptor content in rat prostatic adenocarcinoma: effects of endocrine treatment". Urol. Res. 1995, vol. 23, Nº 2, pág. 119-25). También se ha sugerido que en la sublínea de Dunning R3327-G, la expresión del receptor del EGF está coordinada bajo control androgénico (Coordinate loss of growth factors following castration of rats carrying the Dunning R3327 G prostatic tumor'' Clin Physiol Biochem, 1992, vol. 9, Nº 2, pág. 47-50).

El factor de crecimiento epidérmico (EGF) es un polipéptido de 53 aminoácidos, con un peso molecular aproximado de 6045 Da, que estimula la proliferación de células epiteliales y mesenquimatosas in vitro e in vivo (Cohen S., Carpenter G., "Human Epidermal Growth Factor: Isolation and chemical and biological properties" PNAS EE.UU., 1975, vol. 72 pág. 1317). La acción del EGF se ejerce a través de receptores específicos en la membrana celular. El EGF se aisló y purificó por primera vez en partir de glándulas submaxilares murinas (Cohen S. J. Biol. Chem. 1962, vol. 237, Nº 1, pág. 555). Más tarde se obtuvo una molécula similar de la orina humana (Cohen S. "Human Epidermal Growth Factor: Isolation and Chemical and Biological Properties", PNAS EE.UU. 1975, vol. 72, pág. 1317).

La acción bio-reguladora del EGF se ejerce a través de un receptor de membrana (EGF-R), una glicoproteína de aproximadamente 170 kDa, cuyo gen se ha clonado y secuenciado. El dominio intracelular del receptor está asociado con una actividad de proteína tirosina quinasa con una homología estructural con el oncogen v-erb-B que muestra cierta relación con los procesos de transformación maligna (Holding C. H. Cell, 1984, vol. 37, pág. 9-20).

La presencia del EGF-R en las células tumorales avala las predicciones reservadas sobre el cáncer de mama humano. Aproximadamente el 40% de los tumores de mama muestra sitios de unión específica de afinidad elevada por el EGF. (Ríos M. A., y col. "Receptors for Epidermal Growth Factor and Estrogen Predictors of Relapse in Patients with Mammary Carcinoma" Anticancer Research 1998, vol., 8, pág. 173-176), También existe una correlación inversa con la presencia de receptores de estrógeno dirigidos al EGF-R, como marcador de diferenciación o indicador de la potencial capacidad de proliferación de las células malignas (Pérez R., Pascual M. R., Macías A., Lage A. Breast Cancer Research and Treatment 1984, vol. 4, pág. 189-193).

En estudios previos desarrollados en el modelo de tumor ascítico de Ehrlich en ratones Balb/c (Lombardero J. y col., Neoplasma 1987, vol. 33, pág. 4) se probó el efecto inhibidor in vivo del EGF, lo que sugiere la posibilidad de considerar esta molécula como transformador de la respuesta biológica.

Se ha desarrollado una composición de vacuna que contiene EGF autólogo acoplado a una proteína transformadora que inhibe el crecimiento tumoral dependiente de EGF con efecto inmunitario, sin efectos colaterales (documento US 5894018: Vaccine composition comprising autologous epidermal growth factor or fragment or derivative, thereof having anti-tumor activity and used thereof in the therapy of malignant diseases).

En estudios previos se ha notificado que el tumor de Dunning expresa niveles elevados de ARNm para el factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF) y sus receptores, en comparación con la próstata ventral ("Expression of vascular endotelial growth factor and its receptors in the ventral prostate y Dunning R3327 PAP adenocarcinoma befote and after concentration", Prostate 1998, vol. 36, Nº 2, pág. 71-79). Los ensayos en modelos animales han mostrado que la privación de andrógenos puede conducir a regresión vascular y que el VEGF puede regularse con andrógenos. En el cáncer de próstata humano, la producción constitutiva de VEGF en el epitelio glandular se suprimió a causa del tratamiento de ablación de andrógenos. La pérdida de VEGF condujo a la apoptosis selectiva de las células endoteliales en los vasos privados de células periendoteliales (Laura E. y col.: "Selective ablation of immature blood vessels in established human tumors follows vascular endotelial growth factor withdrawal", J. Clin. Invest. 1999, vol. 103, Nº 2, pág. 159-165).

El VEGF es un mitógeno angiogénico y vasculogénico específico de las células endoteliales y desempeña un papel en la vascularización patogénica, que está asociado con un número de patologías clínicas, entre las que se incluyen cáncer y artritis reumatoide. El VEGF es un homodímero glicosilado unido por disulfuro y se expresa en diferentes isoformas (VEGF 121, VEGF 165, VEGF 189 Y VEGF 206) con 121-206 residuos en seres humanos (Yves A. Muller, y col. "The crystal structure of vascular endothelial growth factor (VEGF) refined to 1.93 A resolution: Multiple copy flexcristal and receptor binding" Structure, 1997, vol. 5, Nº 10, pág. 1325-1338).

En...

1. Una combinación farmacéutica para el tratamiento de neoplasias mediante administración simultánea o secuencial, en la que la combinación comprende GnRH, acoplada opcionalmente con una proteína transportadora de inmunopotenciación, y un factor regulador del crecimiento seleccionado de EGF y VEGF, opcionalmente acoplado con una proteína transportadora de inmunopotenciación.

2. Una combinación farmacéutica de acuerdo con la reivindicación 1, en la que dicha GnRH, EGF y/o VEGF están acoplados con una proteína transportadora de inmunopotenciación mediante conjugación o formación de proteínas quiméricas.

3. Una combinación farmacéutica de acuerdo con la reivindicación 1 ó 2, que comprende un péptido análogo de GnRH que tiene la secuencia pGlu-His-Trp-Ser-Tyr-Pro-Leu-Arg-Pro-Gly, acoplado con una proteína transportadora de inmunopotenciación.

4. Una combinación farmacéutica de acuerdo con la reivindicación 1 ó 2, en la que dicha proteína transportadora de inmunopotenciación se selecciona de las proteínas de membrana externa P1 y P64 de Neisseria meningitides.

5. Una combinación farmacéutica de acuerdo con la reivindicación 1 ó 2, en la que dicha proteína transportadora de inmunopotenciación es un epítopo de células T colaboradoras del toxoide del tétanos (TT).

6. Uso de GnRH, opcionalmente acoplada a una proteína transportadora de inmunopotenciación, para preparar una composición farmacéutica para un tratamiento de neoplasias en combinación con un factor regulador del crecimiento seleccionado de EGF y VEGF, opcionalmente acoplado con una proteína transportadora de inmunopotenciación.

7. Uso de un factor regulador del crecimiento seleccionado de EGF y VEGF, opcionalmente acoplado con una proteína transportadora de inmunopotenciación, para preparar una composición farmacéutica para un tratamiento de neoplasias en combinación con GnRH, opcionalmente acoplada a una proteína transportadora de inmunopotenciación.

8. Uso de acuerdo con la reivindicación 6 ó 7, en el que dicho tratamiento comprende la administración simultánea de dicha GnRH y dicho factor regulador del crecimiento.

9. Uso de acuerdo con la reivindicación 6 ó 7, en el que dicho tratamiento comprende la administración secuencial de dicha GnRH y dicho factor regulador del crecimiento.