POLIMERIZACION ACTIVADA POR PIROFOSFOROLISIS (PAP): APLICACION EN LA AMPLIFICACION DE UN ALELO ESPECIFICO Y EN LA DETERMINACION DE SECUENCIAS DE ACIDOS NUCLEICOS.
Un procedimiento de polimerización activada por pirofosforolisis (PAP) para sintetizar una cadena de ácido nucleico deseada sobre una cadena molde de ácido nucleico que comprende,
en serie:
(a) añadir un oligonucleótido P* activable complementario a una mezcla de reacción que contiene la cadena molde, oligonucleótido P* que tiene un terminal 3'' no prolongable y que no tiene nucleótidos en o cerca de su terminal 3'' que se apareen erróneamente con los correspondientes nucleótidos sobre la cadena molde,
(b) aparear el oligonucleótido activable complementario P* con la cadena molde, tal que el terminal 3'' no prolongable se hibride con la cadena molde al ser el oligonucleótido P* apareado,
(c) pirofosforolizar el dúplex resultante con pirofosfato y una enzima que tenga actividad pirofosforolítica y active el oligonucleótido P* mediante la eliminación del terminal 3'' no prolongable hibridado y
(d) polimerizar mediante la prolongación del oligonucleótido P* activado sobre la cadena molde en presencia de cuatro nucleósidos trifosfato y una polimerasa de ácido nucleico para sintetizar la cadena de ácido nucleico deseada
Tipo: Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: W0105527US.
Solicitante: CITY OF HOPE.
Nacionalidad solicitante: Estados Unidos de América.
Dirección: 1500 EAST DUARTE ROAD,DUARTE CALIFORNIA 91010-300.
Inventor/es: LIU,QIANG, SOMMER,STEVE,S.
Fecha de Publicación: .
Fecha Concesión Europea: 2 de Septiembre de 2009.
Clasificación Internacional de Patentes:
- C12Q1/68D2G
- C12Q1/68E
Clasificación PCT:
- C12Q1/68 QUIMICA; METALURGIA. › C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA. › C12Q PROCESOS DE MEDIDA, INVESTIGACION O ANALISIS EN LOS QUE INTERVIENEN ENZIMAS, ÁCIDOS NUCLEICOS O MICROORGANISMOS (ensayos inmunológicos G01N 33/53 ); COMPOSICIONES O PAPELES REACTIVOS PARA ESTE FIN; PROCESOS PARA PREPARAR ESTAS COMPOSICIONES; PROCESOS DE CONTROL SENSIBLES A LAS CONDICIONES DEL MEDIO EN LOS PROCESOS MICROBIOLOGICOS O ENZIMOLOGICOS. › C12Q 1/00 Procesos de medida, investigación o análisis en los que intervienen enzimas, ácidos nucleicos o microorganismos (aparatos de medida, investigación o análisis con medios de medida o detección de las condiciones del medio, p. ej. contadores de colonias, C12M 1/34 ); Composiciones para este fin; Procesos para preparar estas composiciones. › en los que intervienen ácidos nucleicos.
Clasificación antigua:
- C12Q1/68 C12Q 1/00 […] › en los que intervienen ácidos nucleicos.
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