METODO FLUORIMETRICO PARA EL SEGUIMIENTO Y LA DETECCION DE LA AMPLIFICACION DE ACIDOS NUCLEICOS.

Procedimiento para detectar la amplificación de ácidos nucleicos en una muestra que comprende realizar la amplificación de ácidos nucleicos sobre un polinucleótido diana en presencia de (a) una polimerasa de ácidos nucleicos,

(b) un cebador capaz de hibridar con dicho polinucleótido diana y (c) una sonda oligonucleotídica que es capaz de hibridar con dicho polinucleótido diana y que comprende una molécula donadora de fluorescencia y una molécula aceptora de fluorescencia, separadas en longitud por una distancia a la que la fluorescencia de la donadora es reducida por la aceptora, y una secuencia de cadena sencilla reconocida por una enzima de restricción que corta a dicha secuencia cuando está en forma de doble cadena, estando localizada dicha secuencia entre dicha molécula donadora y dicha molécula aceptora; aplicar dicha enzima de restricción al producto de amplificación de tal modo que se corta el producto de amplificación de doble cadena para liberar a la molécula aceptora de la molécula donadora y detectar una señal fluorescente a partir de la mezcla, donde la reacción de amplificación se efectúa usando nucleótidos modificados que son resistentes al corte por enzimas de restricción.

Tipo: Resumen de patente/invención.

Solicitante: THE SECRETARY OF STATE FOR DEFENCE.

Nacionalidad solicitante: Reino Unido.

Dirección: DSTL PORTON DOWN,SALISBURY WILTSHIRE SP4 0JQ.

Inventor/es: LEE, MARTIN, ALAN.

Fecha de Publicación: .

Fecha Solicitud PCT: 27 de Noviembre de 1998.

Fecha Concesión Europea: 5 de Marzo de 2008.

Clasificación PCT:

  • C12N15/09 SECCION C — QUIMICA; METALURGIA.C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA.C12N MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN (biocidas, productos que repelen o atraen a los animales nocivos, o reguladores del crecimiento de los vegetales, que contienen microorganismos virus, hongos microscópicos, enzimas, productos de fermentación o sustancias obtenidas por o extraídas de microorganismos o sustancias animales A01N 63/00; preparaciones de uso médico A61K; fertilizantes C05F ); PROPAGACION,CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO (medios para ensayos microbiológicos C12Q 1/00). › C12N 15/00 Técnicas de mutación o de ingeniería genética; ADN o ARN relacionado con la ingeniería genética, vectores, p. ej. plásmidos, o su aislamiento, su preparación o su purificación; Utilización de huéspedes para ello (mutantes o microorganismos modificados por ingeniería genética C12N 1/00, C12N 5/00, C12N 7/00; nuevas plantas en sí A01H; reproducción de plantas por técnicas de cultivo de tejidos A01H 4/00; nuevas razas animales en sí A01K 67/00; utilización de preparaciones medicinales que contienen material genético que es introducido en células del cuerpo humano para tratar enfermedades genéticas, terapia génica A61K 48/00; péptidos en general C07K). › Tecnología del ADN recombinante.
  • C12Q1/68 C12 […] › C12Q PROCESOS DE MEDIDA, INVESTIGACION O ANALISIS EN LOS QUE INTERVIENEN ENZIMAS O MICROORGANISMOS (ensayos inmunológicos G01N 33/53 ); COMPOSICIONES O PAPELES REACTIVOS PARA ESTE FIN; PROCESOS PARA PREPARAR ESTAS COMPOSICIONES; PROCESOS DE CONTROL SENSIBLES A LAS CONDICIONES DEL MEDIO EN LOS PROCESOS MICROBIOLOGICOS O ENZIMOLOGICOS. › C12Q 1/00 Procesos de medida, investigación o análisis en los que intervienen enzimas o microorganismos (aparatos de medida, investigación o análisis con medios de medida o detección de las condiciones del medio, p. ej. contadores de colonias, C12M 1/34 ); Composiciones para este fin; Procesos para preparar estas composiciones. › en los que intervienen ácidos nucleicos.
  • G01N33/50 SECCION G — FISICA.G01 METROLOGIA; ENSAYOS.G01N INVESTIGACION O ANALISIS DE MATERIALES POR DETERMINACION DE SUS PROPIEDADES QUIMICAS O FISICAS (procedimientos de medida, de investigación o de análisis diferentes de los ensayos inmunológicos, en los que intervienen enzimas o microorganismos C12M, C12Q). › G01N 33/00 Investigación o análisis de materiales por métodos específicos no cubiertos por los grupos G01N 1/00 - G01N 31/00. › Análisis químico de material biológico, p. ej. de sangre, de orina; Investigación o análisis por métodos en los que interviene la formación de uniones bioespecíficas con grupos coordinadores; Investigación o análisis inmunológico (procedimientos de medida, de investigación o análisis diferentes de los procedimientos inmunológicos en los que intervienen enzimas o microorganismos, composiciones o papeles reactivos a este efecto; procedimientos para preparar estas composiciones, procedimientos de control sensibles a las condiciones del medio en los procedimientos microbiológicos o enzimáticos C12Q).
  • G01N33/533 G01N 33/00 […] › con un marcador fluorescente.

Países PCT: Austria, Bélgica, Suiza, Alemania, Dinamarca, España, Francia, Reino Unido, Italia, Liechtensein, Luxemburgo, Países Bajos, Suecia, Portugal, Irlanda, Finlandia.

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METODO FLUORIMETRICO PARA EL SEGUIMIENTO Y LA DETECCION DE LA AMPLIFICACION DE ACIDOS NUCLEICOS.

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