BANCOS COMBINATORIOS MEJORADOS POR RECOMBINACION EN LEVADURA Y PROCEDIMIENTO DE ANALISIS.
Procedimiento de construcción de un banco combinatorio de expresión funcional a partir de un banco combinatorio de ácidos nucleicos que pertenecen a una misma familia génica,
que comprende las etapas que consisten en: a. introducir dicho banco combinatorio de ácidos nucleicos en una levadura, simultáneamente con un vector de expresión b. obtener dicho banco de expresión funcional por - recombinación homóloga de dicho banco combinatorio de ácidos nucleicos con dicho vector de expresión en dicha levadura, y - recombinación homóloga u homóloga (entre las secuencias similares pero no idénticas), entre los diferentes ácidos nucleicos del banco combinatorio introducido en dicha levadura, con el fin de aumentar la complejidad y la diversidad del banco combinatorio de expresión funcional obtenido. en el que dicho banco combinatorio de ácidos nucleicos es una mezcla de productos de PCR obtenida por amplificación de un banco combinatorio de fases abiertas de lectura, presentando dichas fases abiertas de lecturas entre ellas una identidad de secuencia superior a 40 %, utilizando una pareja de iniciadores situados en regiones que flanquean dichas fases abiertas de lectura, obteniéndose dicho banco combinatorio a partir de ADN homólogos o variantes de secuencia difiriendo en una o varias mutaciones y dicho banco combinatorio de fases abiertas de lectura se obtiene por reensamblaje con "extensión de primer" de productos de fragmentación de al menos dos fases abiertas de lecturas que codifican proteínas funcionales y dicha etapa de reensamblaje por "extensión de primer" se efectúa por PCR, caracterizado porque cada ciclo de dicha etapa de reensamblaje por PCR presenta al menos dos escalones de hibridación.
Tipo: Resumen de patente/invención.
Solicitante: AVENTIS PHARMA S.A.
CENTRE NATIONAL DE LA RECHERCHE SCIENTIFIQUE (CNRS).
Nacionalidad solicitante: Francia.
Dirección: 20, AVENUE RAYMOND ARON,92160 ANTONY.
Inventor/es: POMPON, DENIS, TRUAN, GILLES, ABECASSIS,VALERIE.
Fecha de Publicación: .
Fecha Concesión Europea: 9 de Abril de 2008.
Clasificación PCT:
- C12N15/10 QUIMICA; METALURGIA. › C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA. › C12N MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN; PROPAGACION, CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO (medios para ensayos microbiológicos C12Q 1/00). › C12N 15/00 Técnicas de mutación o de ingeniería genética; ADN o ARN relacionado con la ingeniería genética, vectores, p. ej. plásmidos, o su aislamiento, su preparación o su purificación; Utilización de huéspedes para ello (mutantes o microorganismos modificados por ingeniería genética C12N 1/00, C12N 5/00, C12N 7/00; nuevas plantas en sí A01H; reproducción de plantas por técnicas de cultivo de tejidos A01H 4/00; nuevas razas animales en sí A01K 67/00; utilización de preparaciones medicinales que contienen material genético que es introducido en células del cuerpo humano para tratar enfermedades genéticas, terapia génica A61K 48/00; péptidos en general C07K). › Procedimientos para el aislamiento, la preparación o la purificación de ADN o ARN (preparación química de ADN o ARN C07H 21/00; preparación de polinucleótidos no estructurales a partir de microorganismos o con la ayuda de enzimas C12P 19/34).
- C12N15/64 C12N 15/00 […] › Métodos generales para la preparación del vector, para su introducción en la célula o para la selección del huésped que contiene el vector.
- C12N9/02 C12N […] › C12N 9/00 Enzimas, p. ej. ligasas (6.); Proenzimas; Composiciones que las contienen (preparaciones para la limpieza de los dientes que contienen enzimas A61K 8/66, A61Q 11/00; preparaciones de uso médico que contienen enzimas A61K 38/43; composiciones detergentes que contienen enzimas C11D ); Procesos para preparar, activar, inhibir, separar o purificar enzimas. › Oxidorreductasas (1.), p. ej. luciferasa.
- C12Q1/68 C12 […] › C12Q PROCESOS DE MEDIDA, INVESTIGACION O ANALISIS EN LOS QUE INTERVIENEN ENZIMAS, ÁCIDOS NUCLEICOS O MICROORGANISMOS (ensayos inmunológicos G01N 33/53 ); COMPOSICIONES O PAPELES REACTIVOS PARA ESTE FIN; PROCESOS PARA PREPARAR ESTAS COMPOSICIONES; PROCESOS DE CONTROL SENSIBLES A LAS CONDICIONES DEL MEDIO EN LOS PROCESOS MICROBIOLOGICOS O ENZIMOLOGICOS. › C12Q 1/00 Procesos de medida, investigación o análisis en los que intervienen enzimas, ácidos nucleicos o microorganismos (aparatos de medida, investigación o análisis con medios de medida o detección de las condiciones del medio, p. ej. contadores de colonias, C12M 1/34 ); Composiciones para este fin; Procesos para preparar estas composiciones. › en los que intervienen ácidos nucleicos.
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