PROCEDIMIENTO PARA LA SELECCION DE CELULAS HUESPED DE EXPRESION ELEVADA.

SE DESCRIBE UN METODO DE SELECCION DE CELULAS HUESPED RECOMBINANTES,

QUE EXPRESAN ALTOS NIVELES DE UNA PROTEINA DESEADA. DICHO METODO UTILIZA CELULAS HUESPED EUCARIOTICAS, QUE ALBERGAN UNA ESTRUCTURA DE ADN QUE COMPRENDE UN GEN SELECCIONABLE (PREFERIBLEMENTE UN GEN AMPLIFICABLE) Y UN GEN DE PRODUCTO SITUADO EN DIRECCION 3''RESPECTO AL GEN SELECCIONABLE. EL GEN SELECCIONABLE SE SITUA EN UN INTRON DEFINIDO POR UN SITIO DONADOR DE EMPALME Y UN SITIO ACEPTOR DE EMPALME, Y DICHO GEN Y EL PROODUCTO, ESTAN SOMETIDOS AL CONTROL TRANSCRIPCIONAL DE UNA UNICA REGION REGULADORA DE LA TRANSCRIPCION. EL SITIO DONADOR DE EMPALME ES, GNERALMENTE, UN SITIO DONADOR DE EMPALME EFICIENTE, Y POR TANTO, REGULA LA EXPRESION DEL GEN DE PRODUCTO, UTILIZANDO LA REGION REGULADORA DE LA TRANSCRIPCION. LAS CELULAS TRANSFORMADAS SE CULTIVAN, DE FORMA QUE EXPRESEN EL GEN QUE CODIFICA PARA EL PRODUCTO, EN UN MEDIO SELECTIVO QUE CONTIENE UN AGENTE AMPLIFICADOR, DURANTE UN TIEMPO SUFICIENTE PARA PERMITIR QUE SE PRODUZCA LA AMPLIFICACION, A CONSECUENCIA DE LO CUAL, BIEN SE RECUPERA EL PRODUCTO DESEADO, O BIEN SE IDENTIFICAN LAS CELULAS QUE TIENEN MULTIPLES COPIAS DEL GEN DE PRODUCTO.

Tipo: Resumen de patente/invención.

Solicitante: GENENTECH, INC..

Nacionalidad solicitante: Estados Unidos de América.

Dirección: 460 POINT SAN BRUNO BOULEVARD,SOUTH SAN FRANCISCO, CA 94080-.

Inventor/es: CROWLEY, CRAIG, W.

Fecha de Publicación: .

Fecha Concesión Europea: 14 de Febrero de 2007.

Clasificación PCT:

  • C07K14/715 QUIMICA; METALURGIA. › C07 QUIMICA ORGANICA. › C07K PEPTIDOS (péptidos que contienen β -anillos lactamas C07D; ipéptidos cíclicos que no tienen en su molécula ningún otro enlace peptídico más que los que forman su ciclo, p. ej. piperazina diones-2,5, C07D; alcaloides del cornezuelo del centeno de tipo péptido cíclico C07D 519/02; proteínas monocelulares, enzimas C12N; procedimientos de obtención de péptidos por ingeniería genética C12N 15/00). › C07K 14/00 Péptidos con más de 20 aminoácidos; Gastrinas; Somatostatinas; Melanotropinas; Sus derivados. › para citoquinas; para linfoquinas; para interferones.
  • C07K16/42 C07K […] › C07K 16/00 Inmunoglobulinas, p. ej. anticuerpos mono o policlonales. › contra inmunoglobulinas (anticuerpos anti-idiotípicos).
  • C12N15/09 C […] › C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA. › C12N MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN; PROPAGACION, CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO (medios para ensayos microbiológicos C12Q 1/00). › C12N 15/00 Técnicas de mutación o de ingeniería genética; ADN o ARN relacionado con la ingeniería genética, vectores, p. ej. plásmidos, o su aislamiento, su preparación o su purificación; Utilización de huéspedes para ello (mutantes o microorganismos modificados por ingeniería genética C12N 1/00, C12N 5/00, C12N 7/00; nuevas plantas en sí A01H; reproducción de plantas por técnicas de cultivo de tejidos A01H 4/00; nuevas razas animales en sí A01K 67/00; utilización de preparaciones medicinales que contienen material genético que es introducido en células del cuerpo humano para tratar enfermedades genéticas, terapia génica A61K 48/00; péptidos en general C07K). › Tecnología del ADN recombinante.
  • C12N15/64 C12N 15/00 […] › Métodos generales para la preparación del vector, para su introducción en la célula o para la selección del huésped que contiene el vector.
  • C12N15/67 C12N 15/00 […] › Métodos generales para favorecer la expresión.
  • C12N15/85 C12N 15/00 […] › para células animales.
  • C12N5/00 C12N […] › Células no diferenciadas humanas, animales o vegetales, p. ej. líneas celulares; Tejidos; Su cultivo o conservación; Medios de cultivo para este fin (reproducción de plantas por técnicas de cultivo de tejidos A01H 4/00).
  • C12N5/10 C12N […] › C12N 5/00 Células no diferenciadas humanas, animales o vegetales, p. ej. líneas celulares; Tejidos; Su cultivo o conservación; Medios de cultivo para este fin (reproducción de plantas por técnicas de cultivo de tejidos A01H 4/00). › Células modificadas por introducción de material genético extraño, p. ej. células transformadas por virus.
  • C12N9/64 C12N […] › C12N 9/00 Enzimas, p. ej. ligasas (6.); Proenzimas; Composiciones que las contienen (preparaciones para la limpieza de los dientes que contienen enzimas A61K 8/66, A61Q 11/00; preparaciones de uso médico que contienen enzimas A61K 38/43; composiciones detergentes que contienen enzimas C11D ); Procesos para preparar, activar, inhibir, separar o purificar enzimas. › que provienen de tejido animal, p. ej. renina.
  • C12N9/72 C12N 9/00 […] › Uroquinasa.
  • C12P21/02 C12 […] › C12P PROCESOS DE FERMENTACION O PROCESOS QUE UTILIZAN ENZIMAS PARA LA SINTESIS DE UN COMPUESTO QUIMICO DADO O DE UNA COMPOSICION DADA, O PARA LA SEPARACION DE ISOMEROS OPTICOS A PARTIR DE UNA MEZCLA RACEMICA. › C12P 21/00 Preparación de péptidos o de proteínas (proteína monocelular C12N 1/00). › que tienen una secuencia conocida de varios aminoácidos, p. ej. glutation.
PROCEDIMIENTO PARA LA SELECCION DE CELULAS HUESPED DE EXPRESION ELEVADA.

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