DETECCION DE ALGAS TOXICAS.

Procedimiento electroquímico de detección para la detección rápida in situ de algas tóxicas en una muestra líquida,

mediando utilización de por lo menos una sonda captadora inmovilizada, que es específica para ciertas secuencias, destinada a la hibridación selectiva en condiciones de hibridación de una secuencia complementaria de ácido nucleico, que caracteriza inequívocamente al alga que se ha detectar, a base del ARNr de la subunidad pequeña 18S o de la subunidad grande 28S del ribosoma específico para ciertas algas, de por lo menos una sonda cooperante y de por lo menos una sonda detectora, ambas de las cuales están situadas con una distancia entre secuencias lo más pequeña que sea posible, con una diferencia máxima de 150 a 200 bases, cerca de la sonda captadora específica para ciertas secuencias, con las etapas principales de procedimiento: * Preparación de la muestra líquida a investigar con el fin de liberar el ARN total de todas las algas contenidas en la muestra, * Establecimiento de una tanda de hibridación mediante mezcladura del ARN total puesto en libertad con la sonda cooperante y con la sonda detectora, que está marcada con un antígeno, en un tampón de hibridación para la hibridación con secuencias complementarias de ácidos nucleicos del ARNr del ribosoma específico para ciertas algas, del alga que se ha de detectar en la muestra, * Humectación de la sonda captadora específica para ciertas secuencias, con la tanda de hibridación, para la hibridación en emparedado de la secuencia de ácido de nucleico que caracteriza inequívocamente al alga que se ha de detectar, realizándose que la sonda cooperante hace posible o refuerza a la hibridación en emparedado y que la sonda detectora marca a la secuencia de ácido nucleico que se ha de detectar, * Humectación de la sonda captadora específica para ciertas secuencias, después de haberse efectuado la hibridación en emparedado con un conjugado enzimático con un anticuerpo, que se fija específicamente al antígeno de la sonda detectora, y con una enzima, que cataliza la reacción de detección, * Separación por enjuagado del conjugado enzimático no fijado, * Detección amperométrica o ciclovoltamétrica de la reacción enzimática que se ha establecido al efectuarse la hibridación en emparedado del alga que se ha detectar, con una tensión de medición previamente establecida.

Tipo: Resumen de patente/invención.

Solicitante: STIFTUNG ALFRED-WEGENER-INSTITUT FUR POLAR- UND MEERESFORSCHUNG.

Nacionalidad solicitante: Alemania.

Dirección: COLUMBUSSTRASSE,27568 BREMERHAVEN.

Inventor/es: LANGE, MARTIN, MEDLIN CRAWFORD,LINDA, KERKMANN,KATJA.

Fecha de Publicación: 16 de Septiembre de 2007.

Fecha Concesión Europea: 10 de Enero de 2007.

Clasificación PCT:

B01L3/00 TECNICAS INDUSTRIALES DIVERSAS; TRANSPORTES. › B01 PROCEDIMIENTOS O APARATOS FISICOS O QUIMICOS EN GENERAL. › B01L APARATOS DE LABORATORIO PARA LA QUIMICA O LA FISICA, DE USO GENERAL (aparatos de uso médico o farmacéutico A61; aparatos para aplicaciones industriales o aparatos de laboratorio cuya estructura y funciones son comparables a las de aparatos industriales similares, ver las clases relativas a los aparatos industriales, en particular las subclases B01 y C12; aparatos de separación o de destilación B01D; dispositivos de mezcla o de agitación B01F; atomizadores B05B; tamices, cribas B07B; tapones, capuchones B65D; manipulación de líquidos en general B67; bombas de vacío F04; sifones F04F 10/00; grifos, válvulas F16K; tubos, empalmes para tubos F16L; aparatos especialmente adaptados al estudio y análisis de materiales G01, particularmente G01N; aparatos eléctricos u ópticos, ver las subclases apropiadas en las secciones G y H). › Recipientes o utensilios para laboratorios, p. ej. cristalería de laboratorio (botellas B65D; equipos para enzimología o microbiología C12M 1/00 ); Cuentagotas (recipientes para volumetría G01F).
C12Q1/68 QUIMICA; METALURGIA. › C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA. › C12Q PROCESOS DE MEDIDA, INVESTIGACION O ANALISIS EN LOS QUE INTERVIENEN ENZIMAS, ÁCIDOS NUCLEICOS O MICROORGANISMOS (ensayos inmunológicos G01N 33/53 ); COMPOSICIONES O PAPELES REACTIVOS PARA ESTE FIN; PROCESOS PARA PREPARAR ESTAS COMPOSICIONES; PROCESOS DE CONTROL SENSIBLES A LAS CONDICIONES DEL MEDIO EN LOS PROCESOS MICROBIOLOGICOS O ENZIMOLOGICOS. › C12Q 1/00 Procesos de medida, investigación o análisis en los que intervienen enzimas, ácidos nucleicos o microorganismos (aparatos de medida, investigación o análisis con medios de medida o detección de las condiciones del medio, p. ej. contadores de colonias, C12M 1/34 ); Composiciones para este fin; Procesos para preparar estas composiciones. › en los que intervienen ácidos nucleicos.

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