PARTICULAS DE MICROGEL POLIMERICO CON GLUCOSA OXIDASA INMOVILIZADA Y SU USO COMO BIOSENSOR DE GLUCOSA.
Partículas de microgel polimérico con glucosa oxidasa inmovilizada y su uso como biosensor de glucosa.
La presente invención se refiere al diseño de un biosensor para la determinación de glucosa basado en un procedimiento para la inmovilización de la enzima glucosa oxidasa en microgeles poliméricos que consigue mantener la actividad enzimática constante durante largos períodos de tiempo.
Comprende el diseño de un biosensor amperométrico de glucosa formado por un electrodo de platino sobre cuya superficie se inmoviliza la capa enzimática que consta de glucosa oxidasa atrapada dentro de microgeles de poli (ácido acrílico/acrilamida) , que consiste en las siguientes etapas:
- Preparación de la emulsión concentrada acuosa/oleosa con el enzima, monómeros, agente entrecruzante, agente iniciador y tensioactivo.
- Polimerización de la emulsión concentrada a temperatura controlada.
- Recuperación del producto mediante la separación de fases por centrifugación.
- Conservación de las partículas de microgel, refrigeradas a 4ºC.
- Preparación del biosensor. Como transductor se utiliza un electrodo de disco de platino. Sobre su superficie se incorporan las micropartículas con glucosa oxidasa en su interior y se fijan mediante una membrana de diálisis. La medida de glucosa se realiza en una celda amperométrica de tres electrodos: como electrodo de trabajo el biosensor, como electrodo de referencia uno de plata cloruro de plata y como electrodo auxiliar uno de platino. La medida se realiza a +0,6 V vs. AgCl/Ag. La corriente obtenida está directamente relacionada con la concentración de glucosa en la muestra.
Tipo: Resumen de patente/invención.
Solicitante: UNIVERSIDAD COMPLUTENSE DE MADRID.
Nacionalidad solicitante: España.
Provincia: MADRID.
Inventor/es: LOPEZ RUIZ,BEATRIZ, LOPEZ CABARCOS,ENRIQUE JOSE, RUBIO RETAMA,BENITO JORGE.
Fecha de Solicitud: 2 de Abril de 2004.
Fecha de Publicación: .
Fecha de Concesión: 10 de Octubre de 2004.
Clasificación PCT:
- C12N11/04 QUIMICA; METALURGIA. › C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA. › C12N MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN; PROPAGACION, CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO (medios para ensayos microbiológicos C12Q 1/00). › C12N 11/00 Enzimas fijadas sobre un soporte o inmovilizadas; Células microbianas fijadas sobre un soporte o inmovilizadas; Su preparación. › atrapadas en el interior del soporte, p. ej. en un gel o en fibras huecas.
- G01N27/30 FISICA. › G01 METROLOGIA; ENSAYOS. › G01N INVESTIGACION O ANALISIS DE MATERIALES POR DETERMINACION DE SUS PROPIEDADES QUIMICAS O FISICAS (procedimientos de medida, de investigación o de análisis diferentes de los ensayos inmunológicos, en los que intervienen enzimas o microorganismos C12M, C12Q). › G01N 27/00 Investigación o análisis de materiales mediante el empleo de medios eléctricos, electroquímicos o magnéticos (G01N 3/00 - G01N 25/00 tienen prioridad; medida o ensayo de variables eléctricas o magnéticas o de las propiedades eléctricas o magnéticas de los materiales G01R). › Electrodos, p. ej. electrodos para el análisis; Semicélulas (G01N 27/414 tiene prioridad).
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