AMPLIFICACION DE SEÑAL CATALIZADA ENZIMATICAMENTE.
Procedimiento para detectar una molécula diana (20), que comprende las etapas siguientes:
i)poner en contacto una muestra con la sonda localizadora (10, 30) que comprende una porción de unión (11, 31) específica para dicha molécula diana (20) y una secuencia de ácido de amplificación nucleico (12, 32) para producir un complejo de molécula diana-sonda localizadora; ii) producir una estructura de amplificación unida a cualquier complejo producido en la etapa anterior realizando una o más veces la etapa de amplificación de tratamiento de dichas muestras y sonda localizadora (10, 30) tratándolas con: a) un molde de amplificación de cadena simple (40.50) que comprende: i) colocado en la dirección 5 a 3: a) una secuencia de extensión de ácido nucleico (41, 51); b) una secuencia de hibridación de ácido nucleico (42) complementaria de la secuencia de amplificación de ácido nucleico (12, 32, 52) de la etapa previa de amplificación o, donde no existe etapa previa de amplificación, de la etapa anterior y presentando substancialmente la misma secuencia que dicha secuencia de extensión de ácido nucleico (42, 51); y c) una porción de amplificación (43, 53), limitada en su totalidad excepto la repetición final a una secuencia de ácido nucleico; y ii) opcionalmente por lo menos una porción de señal diferente a una secuencia de ácido nucleico. b) un agente polimerizador capaz de extender el terminal 3 de la secuencia de amplificación de ácido nucleico (12, 32, 53) de la etapa previa de amplificación o, donde no existe etapa previa de amplificación, de la etapa previa sintetizando una cadena complementaria de dicha secuencia de extensión de ácido nucleico (41, 51) de dicho molde de amplificación (40, 50); c) un agente separador capaz de eliminar suficientemente dicha secuencia de extensión de ácido nucleico (41, 51) de dicho molde de amplificación (40, 50) cuando se hibrida a dicha cadena complementaria para permitir la subsiguiente hibridación de dicha secuencia de hibridación de ácido nucleico (42, 52) de dicho molde de amplificación (40, 50) a dicha cadena complementaria; y d) los reactivos y condiciones necesarios para efectuar la acción de dicho agentes polimerizador y separador para permitir la extensión del terminal 3 de la secuencia de amplificación de ácido nucleico (12, 32, 53) de la etapa previa de amplificación o, donde no exista etapa previa de amplificación, de la etapa previa sintetizando una pluralidad de secuencias complementarias de dicha secuencia de extensión de ácido nucleico (41, 51) de dicho molde de amplificación (40, 50); iii) detectar cualquier molde de amplificación unido (40, 50) de la(s) etapa(s) de amplificación; y iv) correlacionar los resultados de la etapa de detección (iii) con la presencia de dicha molécula diana (20).
Tipo: Resumen de patente/invención.
Solicitante: TEPNEL MEDICAL LIMITED.
Nacionalidad solicitante: Reino Unido.
Dirección: HERON HOUSE OAKS BUSINESS PARK CREWE ROAD,WYTHENSHAWE MANCHESTER M23.
Inventor/es: MULROONEY, CONOR, OULTRAM, JOHN DOUGLAS.
Fecha de Publicación: .
Fecha Solicitud PCT: 13 de Marzo de 2000.
Fecha Concesión Europea: 28 de Julio de 2004.
Clasificación Internacional de Patentes:
- C12Q1/68 QUIMICA; METALURGIA. › C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA. › C12Q PROCESOS DE MEDIDA, INVESTIGACION O ANALISIS EN LOS QUE INTERVIENEN ENZIMAS, ÁCIDOS NUCLEICOS O MICROORGANISMOS (ensayos inmunológicos G01N 33/53 ); COMPOSICIONES O PAPELES REACTIVOS PARA ESTE FIN; PROCESOS PARA PREPARAR ESTAS COMPOSICIONES; PROCESOS DE CONTROL SENSIBLES A LAS CONDICIONES DEL MEDIO EN LOS PROCESOS MICROBIOLOGICOS O ENZIMOLOGICOS. › C12Q 1/00 Procesos de medida, investigación o análisis en los que intervienen enzimas, ácidos nucleicos o microorganismos (aparatos de medida, investigación o análisis con medios de medida o detección de las condiciones del medio, p. ej. contadores de colonias, C12M 1/34 ); Composiciones para este fin; Procesos para preparar estas composiciones. › en los que intervienen ácidos nucleicos.
Países PCT: Austria, Bélgica, Suiza, Alemania, Dinamarca, España, Francia, Reino Unido, Grecia, Italia, Liechtensein, Luxemburgo, Países Bajos, Suecia, Mónaco, Portugal, Irlanda, Eslovenia, Finlandia, Rumania, Chipre, Oficina Europea de Patentes, Lituania, Letonia, Ex República Yugoslava de Macedonia, Albania, Armenia, Azerbayán, Bielorusia, Ghana, Gambia, Kenya, Kirguistán, Kazajstán, Lesotho, República del Moldova, Malawi, Federación de Rusia, Sudán, Sierra Leona, Tayikistán, Turkmenistán, República Unida de Tanzania, Uganda, Zimbabwe, Burkina Faso, Benin, República Centroafricana, Congo, Costa de Marfil, Camerún, Gabón, Guinea, Malí, Mauritania, Niger, Senegal, Chad, Togo, Organización Regional Africana de la Propiedad Industrial, Swazilandia, Guinea-Bissau, Organización Africana de la Propiedad Intelectual, Organización Eurasiática de Patentes.
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