USO DE LIGNINA PEROXIDASA EN EL ACLARAMIENTO DE LA PIEL Y EL PELO.
Un método no terapéutico para aclarar una región de piel o pelo de un sujeto,
el método que comprende aplicar a la región de la piel o pelo por lo menos un tipo de una enzima de lignina peroxidasa de una forma apropiada para oxidar un pigmento contenido dentro de las células de la región de la piel o pelo
Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/IL2003/001055.
Solicitante: R.B.T. (RAKUTO BIO TECHNOLOGIES) LTD.
Nacionalidad solicitante: Israel.
Dirección: 5 HACARMEL STREET, P.O. BOX 528 20 692 YOKNEAM ILIT ISRAEL.
Inventor/es: BELINKY,Paula , LASSER,Haim , DOSORETZ,Carlos.
Fecha de Publicación: .
Fecha Solicitud PCT: 11 de Diciembre de 2003.
Clasificación Internacional de Patentes:
- A61K8/66 NECESIDADES CORRIENTES DE LA VIDA. › A61 CIENCIAS MEDICAS O VETERINARIAS; HIGIENE. › A61K PREPARACIONES DE USO MEDICO, DENTAL O PARA EL ASEO (dispositivos o métodos especialmente concebidos para conferir a los productos farmacéuticos una forma física o de administración particular A61J 3/00; aspectos químicos o utilización de substancias químicas para, la desodorización del aire, la desinfección o la esterilización, vendas, apósitos, almohadillas absorbentes o de los artículos para su realización A61L; composiciones a base de jabón C11D). › A61K 8/00 Cosméticos o preparaciones similares para el aseo. › Enzimas.
- A61Q19/02 A61 […] › A61Q USO ESPECIFICO DE COSMETICOS O DE PREPARACIONES SIMILARES PARA EL ASEO. › A61Q 19/00 Preparaciones para el cuidado de la piel. › para blanquear o decolorar químicamente la piel.
- A61Q5/08 A61Q […] › A61Q 5/00 Preparaciones para el cuidado del cabello. › Preparaciones para decolorar el cabello o el vello.
- C12N9/08 QUIMICA; METALURGIA. › C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA. › C12N MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN; PROPAGACION, CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO (medios para ensayos microbiológicos C12Q 1/00). › C12N 9/00 Enzimas, p. ej. ligasas (6.); Proenzimas; Composiciones que las contienen (preparaciones para la limpieza de los dientes que contienen enzimas A61K 8/66, A61Q 11/00; preparaciones de uso médico que contienen enzimas A61K 38/43; composiciones detergentes que contienen enzimas C11D ); Procesos para preparar, activar, inhibir, separar o purificar enzimas. › actúan sobre el peróxido de hidrógeno como aceptor (1.11).
Clasificación PCT:
Clasificación antigua:
- A61K7/135
- C07K1/00 C […] › C07 QUIMICA ORGANICA. › C07K PEPTIDOS (péptidos que contienen β -anillos lactamas C07D; ipéptidos cíclicos que no tienen en su molécula ningún otro enlace peptídico más que los que forman su ciclo, p. ej. piperazina diones-2,5, C07D; alcaloides del cornezuelo del centeno de tipo péptido cíclico C07D 519/02; proteínas monocelulares, enzimas C12N; procedimientos de obtención de péptidos por ingeniería genética C12N 15/00). › Procedimientos generales de preparación de péptidos.
- C09B29/00 C […] › C09 COLORANTES; PINTURAS; PULIMENTOS; RESINAS NATURALES; ADHESIVOS; COMPOSICIONES NO PREVISTAS EN OTRO LUGAR; APLICACIONES DE LOS MATERIALES NO PREVISTAS EN OTRO LUGAR. › C09B COLORANTES ORGANICOS O COMPUESTOS ESTRECHAMENTE RELACIONADOS PARA PRODUCIR COLORANTES; MORDIENTES; LACAS (procesos de fermentación o procesos que utilizan enzimas para la síntesis de un compuesto dado C12P). › Colorantes monoazo preparados por diazoación y copulación.
- C09B67/02 C09B […] › C09B 67/00 Propiedades de las materias colorantes que influyen en el aspecto físico, p. ej. tinte o impresión, sin reacción química, p. ej. por tratamiento con solventes; Características de los procesos de fabricación de las preparaciones de materias colorantes; Preparaciones de materia colorante de una especial naturaleza física, p. ej. tabletas, películas. › Preparaciones de materia colorante caracterizadas por un aspecto físico particular, p. ej. tabletas, películas.
- C12N1/20 C12N […] › C12N 1/00 Microorganismos, p.ej. protozoos; Composiciones que los contienen (preparaciones de uso médico que contienen material de protozoos, bacterias o virus A61K 35/66, de algas A61K 36/02, de hongos A61K 36/06; preparación de composiciones de uso médico que contienen antígenos o anticuerpos bacterianos, p. ej. vacunas bacterianas, A61K 39/00 ); Procesos de cultivo o conservación de microorganismos, o de composiciones que los contienen; Procesos de preparación o aislamiento de una composición que contiene un microorganismo; Sus medios de cultivo. › Bacterias; Sus medios de cultivo.
- C12N9/00 C12N […] › Enzimas, p. ej. ligasas (6.); Proenzimas; Composiciones que las contienen (preparaciones para la limpieza de los dientes que contienen enzimas A61K 8/66, A61Q 11/00; preparaciones de uso médico que contienen enzimas A61K 38/43; composiciones detergentes que contienen enzimas C11D ); Procesos para preparar, activar, inhibir, separar o purificar enzimas.
- C12N9/08 C12N 9/00 […] › actúan sobre el peróxido de hidrógeno como aceptor (1.11).
- C12P21/04 C12 […] › C12P PROCESOS DE FERMENTACION O PROCESOS QUE UTILIZAN ENZIMAS PARA LA SINTESIS DE UN COMPUESTO QUIMICO DADO O DE UNA COMPOSICION DADA, O PARA LA SEPARACION DE ISOMEROS OPTICOS A PARTIR DE UNA MEZCLA RACEMICA. › C12P 21/00 Preparación de péptidos o de proteínas (proteína monocelular C12N 1/00). › Péptidos o polipéptidos cíclicos o puenteados, p. ej. bacitracina.
- C12Q1/68 C12 […] › C12Q PROCESOS DE MEDIDA, INVESTIGACION O ANALISIS EN LOS QUE INTERVIENEN ENZIMAS, ÁCIDOS NUCLEICOS O MICROORGANISMOS (ensayos inmunológicos G01N 33/53 ); COMPOSICIONES O PAPELES REACTIVOS PARA ESTE FIN; PROCESOS PARA PREPARAR ESTAS COMPOSICIONES; PROCESOS DE CONTROL SENSIBLES A LAS CONDICIONES DEL MEDIO EN LOS PROCESOS MICROBIOLOGICOS O ENZIMOLOGICOS. › C12Q 1/00 Procesos de medida, investigación o análisis en los que intervienen enzimas, ácidos nucleicos o microorganismos (aparatos de medida, investigación o análisis con medios de medida o detección de las condiciones del medio, p. ej. contadores de colonias, C12M 1/34 ); Composiciones para este fin; Procesos para preparar estas composiciones. › en los que intervienen ácidos nucleicos.
Países PCT: Austria, Bélgica, Suiza, Alemania, Dinamarca, España, Francia, Reino Unido, Grecia, Italia, Liechtensein, Luxemburgo, Países Bajos, Suecia, Mónaco, Portugal, Irlanda, Eslovenia, Finlandia, Rumania, Chipre, Lituania, Letonia, Ex República Yugoslava de Macedonia, Albania.
Fragmento de la descripción:
Campo y antecedentes de la invención
La presente invención está relacionada con métodos para producir lignina peroxidasa y su uso en el aclaramiento de la piel y el pelo. 5
Melanina
El color de la piel y pelo humano está gobernado por la cantidad, calidad, y distribución de la melanina, un pigmento que también está presente en plantas y microorganismos.
La síntesis de melanina es iniciada por el precursor L-tirosina que es transformado en un segundo precursor dopaquinona por medio de la acción de la tirosinasa. En la biosíntesis de la melanina de los mamíferos, 10 este intermediario puede ser polimerizado por medio de dos rutas principales (Figura 1). La adición intramolecular nucleofílica del grupo amino da lugar al derivado de indol leucodopacromo que, después de la polimerización, produce el pigmento marrón oscuro a negro eumelanina. En la presencia de compuestos tiol se forman derivados de tioéster de dopa; la reacción con cisteína produce cisteinildopa, que después de oxidación adicional y polimerización produce el pigmento amarillo a rojizo marrón faeomelanina. Como consecuencia, la eumelanina está principalmente 15 compuesta de unidades de 5,6-dihidroxiindol (DHI) y 5,6-dihidroxiindol-2-ácido carboxílico (DHICA), mientras que faeomelanina contiene principalmente unidades de benzotiacina (Alaluf et al., 2001). La disponibilidad y proporción mutua de estos dos pigmentos influencia la composición química del pigmento polimérico.
La síntesis de melanina tiene lugar en gránulos, a los que se les llama melanosomas (Cooksey et al., 1997) que están presentes en células de melanocitos presentes en las capas basales de la epidermis; la síntesis de 20 melanina en estas células es inducida por luz ultravioleta (UV). Después de la síntesis, la melanina migra a las células de la epidermis y allí es dispersada, donde la melanina es decolorada después del metabolismo de la dermis y después es descamada en forma de mugre durante la renovación de la piel. La melanina tiene una importancia clínica ya que protege la piel de efectos adversos causados por la luz UV. Sin embargo, altos niveles de melanina pueden resultar en oscurecimiento no deseado de la piel y el pelo, mientras que la distribución heterogénea del 25 mismo puede llevar a cloasma y aparición de pecas que pueden ser desagradables estéticamente.
Productos Aclaradores
Los productos aclaradores de la piel se han vuelto cada vez mas populares en los últimos años. El principal propósito de los productos aclaradores de la piel es aclarar o blanquear la piel o para tratar problemas de pigmentación tales como cloasma, pecas, marcas del embarazo y manchas de la edad. Diversos tipos de productos 30 aclaradores de la piel están disponibles actualmente.
Productos basados en la degeneración y muerte de las células de pigmento típicamente incluyen productos químicos fuertes, tales como hidroquinona, 4-isopropilcatecol, e hidroquinona monobencil éter, que promueven el blanqueado de la piel y el aclaramiento de la piel o el desvanecimiento de la pigmentación de la piel. Tales productos son típicamente ineficientes y pueden ser dañinos para la piel ya que una aplicación externa continua de estos 35 productos puede llevar a leucoderma permanente y efectos secundarios tales como discromatosis y sarpullido.
Otros productos aclaradores son basados en la inhibición de la tirosinasa, la enzima que transforma el precursor L-tirosina en un segundo precursor dopaquinona. Este grupo de productos incluye Arbutin, un compuesto de glucosa hidroquinona que es capaz de inhibir la tirosinasa quelatando iones de cobre de esta forma suprimiendo la tautomerización de Dopacromo a DHICA. 40
El melanostato es otro producto aclarador que actúa a través de la tirosinasa. El melanostato es un péptido sintético que funciona desactivando la melanogénesis en melanocitos.
Varios compuestos antioxidantes que pueden inhibir la producción de melanina también son utilizados en los productos aclaradores. Ya que la síntesis de melanina involucra una reacción de oxidación, bloqueando la oxidación en varios puntos desde tirosina/DOPA a melanina a la larga inhibe la síntesis de melanina. 45
Un antioxidante que es utilizado para bloquear la síntesis de melanina es L-Ascórbico (vitamina C) que actúa como un agente reductor en los intermediarios de melanina y bloquea reacciones oxidativas; otros antioxidantes utilizados por productos de aclaramiento incluyen bioflavonoides que son típicamente extraídos de mora o regaliz.
Los productos aclaradores del pelo actúan sobre la melanina dentro de la corteza del pelo. Existen varios 50 químicos que pueden aclarar el pelo, entre ellos están incluidos el ácido hidroclórico, hipoclorito de sodio y peróxido de hidrógeno.
El químico más común usado para aclarar el pelo es el peróxido de hidrógeno. Para mantener la efectividad deseada, las soluciones de peróxido de hidrógeno deben ser estabilizadas usando compuestos tales como acetanilida, ácidos diluidos, sílice coloidal, p-hidroxibenzoatos, sulfato de oxiquinolina, fenacetina, y compuestos de 55
estaño ( estanato de sodio, hidróxido estánico, octoato estanoso). Antes de que el pelo sea aclarado, se agrega amoniaco a la solución de peróxido de hidrógeno para mejorar la penetración del peróxido de hidrógeno a través de la cutícula, la capa externa del pelo, y por lo tanto acelerar la reacción de oxidación.
JP 2002 012535 A (LION CORP) Enero 15 del 2002 (2002-01-15) divulga un método para aclarar una región de la piel o el pelo de un sujeto, el método comprende la aplicación de peroxidasa. 5
Mientras la presente invención se redujo a la práctica, los presentes inventores han descubierto que la isoenzima H1 lignina peroxidasa puede oxidar la melanina in vitro y puede adicionalmente aclarar la piel y el pelo in vivo.
Por lo tanto, la presente invención provee composiciones cosméticas y métodos que son altamente adecuados para la aclaración de piel y pelo. 10
Resumen de la invención
De acuerdo con un aspecto de la presente invención se provee un método no-terapéutico de aclarar una región de la piel o pelo de un sujeto, que comprende aplicar a la región de la piel o pelo por lo menos un tipo de enzima modificadora de lignina de una forma apropiada para oxidar un pigmento contenido dentro de las células de la región de la piel o pelo. 15
De acuerdo con otro aspecto de la presente invención se provee una composición cosmética para aclarar una región de la piel o un sujeto que comprende por lo menos un tipo de una enzima modificadora de lignina y un vehículo cosméticamente aceptable de acuerdo con la reivindicación 11.
De acuerdo con aún otro aspecto de la presente invención se provee un equipo para aclarar una región de la piel o pelo que comprende un primer recipiente que incluye una enzima modificadora de lignina, y un segundo 20 recipiente que incluye un receptor de electrones.
De acuerdo con aún otro aspecto de la presente invención se provee un articulo de manufactura que comprende un material de empaque y una composición cosmética identificada para aclarar una región de la piel o pelo de un sujeto que está contenido dentro del material de empaque, la composición cosmética incluye, como un ingrediente activo, una enzima modificadora de lignina, y un vehículo cosméticamente aceptable. 25
De acuerdo con características adicionales en modalidades preferidas de la invención descrita más abajo, el método es efectuado por medio de una aplicación tópica de una preparación que incluye por lo menos un tipo de enzima modificadora de lignina.
De acuerdo con aún otras características adicionales en las modalidades preferidas descritas el método es efectuado por medio de la administración por vía intradérmica o subcutánea de una preparación que incluye por lo 30 menos un tipo de enzima modificadora de lignina.
De acuerdo con aún mas características en las modalidades preferidas descritas la enzima modificadora de lignina está incluida en una composición formulada para la aplicación en la piel o pelo. La enzima modificadora de lignina es lignina peroxidasa.
De acuerdo con aún más características adicionales en las modalidades preferidas descritas la lignina 35 peroxidasa es una isoenzima H1 o una forma modificada de isoenzima...
Reivindicaciones:
1. Un método no terapéutico para aclarar una región de piel o pelo de un sujeto, el método que comprende aplicar a la región de la piel o pelo por lo menos un tipo de una enzima de lignina peroxidasa de una forma apropiada para oxidar un pigmento contenido dentro de las células de la región de la piel o pelo. 5
2. El método no terapéutico de la reivindicación 1, donde dicha lignina peroxidasa es una isoenzima H1 o una forma modificada de isoenzima H2.
3. El método no terapéutico de la reivindicación 1, donde dicha aplicación es efectuada por medio de una aplicación tópica de una preparación que incluye dicho por lo menos un tipo de enzima de lignina peroxidasa. 10
4. El método no terapéutico de la reivindicación 1, donde dicha aplicación es efectuada por medio de la administración intradérmica o subcutánea de una preparación que incluye por lo menos un tipo de dicha enzima de lignina peroxidasa.
5. El método no terapéutico de la reivindicación 1, donde dicho por lo menos un tipo de enzima de lignina peroxidasa está incluida en una composición formulada para aplicación a la piel o pelo. 15
6. El método no terapéutico de la reivindicación 5, donde dicha composición comprende además un aceptador de electrones.
7. El método no terapéutico de la reivindicación 5, donde dicha composición comprende además alcohol veratrílico.
8. El método no terapéutico de la reivindicación 5, donde dicha composición comprende por 20 lo menos un tipo de un penetrante epidérmico.
9. El método no terapéutico de la reivindicación 5, donde dicha composición comprende por lo menos un tipo de penetrante de pelo.
10. El método no terapéutico de la reivindicación 1, donde dicha aplicación es efectuada por un periodo de tiempo seleccionado de acuerdo al nivel de aclaramiento deseado. 25
11. Una composición cosmética para aclarar una región de la piel o pelo de un sujeto que comprende una enzima de lignina peroxidasa y un vehículo cosméticamente aceptable, donde dicho vehículo cosméticamente aceptable está en una formulación seleccionada de un grupo que consiste de una emulsión de aceite-en-agua, una emulsión de agua-en-aceite, una emulsión de agua-en-aceite-en-agua, una emulsión de aceite-en-agua-en-silicona, una crema, un ungüento, una loción, un aerosol, un vehículo 30 que comprende un emoliente, un surfactante o un acondicionador.
12. La composición cosmética de la reivindicación 11, que comprende además un mediador oxidante.
13. La composición cosmética de la reivindicación 11, donde dicho vehículo cosméticamente aceptable es formulado para uso en una piel o un pelo. 35
14. La composición cosmética de la reivindicación 12, donde dicho mediador oxidativo es alcohol veratrílico o veratrole.
15. La composición cosmética de la reivindicación 11, 12, 13 o 14, donde dicha lignina peroxidasa es la isoenzima H1 o una forma modificada de la isoenzima H2.
16. La composición cosmética de la reivindicación 11, 12, 13 o 14, donde dicho vehículo 40 cosméticamente aceptable incluye transcutol y/o glicol de butileno.
17. La composición cosmética de la reivindicación 11, 12, 13 o 14, donde dicho vehículo cosméticamente aceptable incluye aminas de alcanol.
18. La composición cosmética de la reivindicación 11, 12, 13 o 14, donde dicha lignina peroxidasa es provista a una concentración de por lo menos 1 U/gr. 45
19. La composición cosmética de la reivindicación 14, donde dicho alcohol veratrílico es provisto a una concentración de por lo menos 0.05%.
20. Un equipo para aclarar una región de la piel o pelo que comprende un primer recipiente que incluye una enzima de lignina peroxidasa, un segundo recipiente que incluye un receptor de electrones,
21. El equipo de la reivindicación 20, donde dicho primer recipiente comprende además alcohol veratrílico.
22. El equipo de la reivindicación 20, donde dicha lignina peroxidasa es la isoenzima H1 o una forma modificada de la isoenzima H2.
23. El equipo de la reivindicación 20, donde dicho aceptador de electrones incluido es 5 peróxido de hidrógeno.
24. El equipo de la reivindicación 21, donde dicho alcohol veratrílico es provisto en una concentración de por lo menos 0.05%.
25. El equipo de la reivindicación 20, donde dicha lignina peroxidasa es provista a una concentración de por lo menos 1 U/gr. 10
26. El equipo de la reivindicación 23, donde dicho peróxido de hidrógeno es provisto a una concentración de por lo menos 0.005%.
27. El equipo de la reivindicación 20, donde dicho primero y/o segundo recipiente(s) incluye además un vehículo cosméticamente aceptable adecuado para la penetración epidérmica.
28. El equipo de la reivindicación 20, donde dicho primero y/o segundo recipiente incluye 15 además un vehículo cosméticamente aceptable adecuado para la penetración del pelo.
29. El equipo de la reivindicación 27, donde dichos vehículos cosméticamente aceptables incluyen transcutol y/o glicol de butileno.
30. El equipo de la reivindicación 28, donde dicho vehículo cosméticamente aceptable incluye aminas de alcanol. 20
31. Un artículo-de-fabricación que comprende material de empacado y una composición cosmética identificada para aclarar una región de piel o pelo de un sujeto, dicha composición cosmética siendo contenida dentro de dicho material de empaque, dicha composición cosmética que incluye, como un ingrediente activo, una enzima de lignina peroxidasa, y un vehículo cosméticamente aceptable.
32. El artículo-de-fabricación de la reivindicación 31, donde dicha lignina peroxidasa es la 25 isoenzima H1 o una forma modificada de la isoenzima H2.
33. El artículo-de-fabricación de la reivindicación 31, donde dicha composición cosmética comprende además alcohol veratrílico.
34. El artículo-de-fabricación de la reivindicación 31, donde dicho vehículo cosméticamente aceptable incluye composiciones adecuadas para penetración epidérmica o del pelo. 30
35. El uso de un vector de expresión que comprende un promotor funcionalmente enlazado a un polinucleótido que codifica una enzima de lignina peroxidasa para la fabricación de una composición cosmética para aclarar una región de la piel de un sujeto, dicho polinucleótido comprende la secuencia de ácido nucleico expuesta en la SEQ ID NO:1, donde la expresión de dicho polinucleótido dentro de células de la región de la piel es efectuada de una forma adecuada para oxidar un pigmento contenido dentro de 35 las células de la región de la piel.
36. El uso de la reivindicación 35, donde la composición cosmética comprende además un receptor de electrones.
37. El uso de la reivindicación 36, donde dicho receptor de electrones es el peróxido de hidrógeno. 40
38. El uso de la reivindicación 35, donde la composición cosmética además comprende alcohol veratrílico.
39. El uso de la reivindicación 35, donde dicho vector de expresión es un vector viral.
40. El método no-terapéutico de la reivindicación 1, la composición cosmética de la reivindicación 11, 12, 13 o 14, el equipo de la reivindicación 20 o el artículo-de-fabricación de la 45 reivindicación 31, donde dicha lignina peroxidasa es obtenida por:
(a) cultivo del el hongo Phanerochaete chrysosporium en una matriz porosa en un medio de cultivo agitado y aireado que contiene glicerol por un periodo predeterminado de tiempo;
(b) después de dicho periodo de tiempo predeterminado, extracción de una fracción soluble de dicho hongo Phaherochaete chrysosporium. 50
41. El método no terapéutico, la composición cosmética, el equipo o artículo-de-fabricación de la reivindicación 40, donde dicho medio de cultivo carece de iones de manganesio.
42. El método no terapéutico, la composición cosmética, el equipo o el artículo-de-fabricación de la reivindicación 40, donde dicho cultivo aireado es obtenido sometiendo dicho medio de cultivo a un índice de aireación en el rango de 0.1 – 1 litro por litro por minuto. 5
43. El método no terapéutico, la composición cosmética, el equipo o el artículo-de-fabricación de la reivindicación 40, donde dicho cultivo es efectuado a una temperatura de 37 °C.
44. El método no terapéutico, la composición cosmética, el equipo o el artículo-de-fabricación de la reivindicación 40, donde dicho medio de cultivo es obtenido agitando dicho medio de cultivo a una velocidad en el rango de 50-300 rpm. 10
45. El método no terapéutico, la composición cosmética, el equipo o el artículo-de-fabricación de la reivindicación 40, donde dicho medio de cultivo agitado es obtenido agitando dicho medio de cultivo a una velocidad de 160 rpm.
46. El método no terapéutico, la composición cosmética, el equipo o el artículo-de-fabricación de la reivindicación 40, donde dicho periodo de tiempo predeterminado es seleccionado del rango de 3-10 15 días.
47. El método no terapéutico, la composición cosmética, el equipo o el artículo-de-fabricación de la reivindicación 40, donde dicho periodo de tiempo predeterminado es de 7 días.
48. El método no terapéutico, la composición cosmética, el equipo o el artículo-de-fabricación de la reivindicación 40, donde dicho glicerol es provisto a un rango de concentración de 3-20 gramos por 20 litro.
49. El método no terapéutico, la composición cosmética, el equipo o el artículo-de-fabricación de la reivindicación 40, donde dicho glicerol es provisto a una concentración de 6 gramos por litro.
50. El método no terapéutico, la composición cosmética, el equipo o el artículo-de-fabricación de la reivindicación 40, donde dicho medio de cultivo incluye además alcohol veratrílico. 25
51. El método no terapéutico, la composición cosmética, el equipo o el artículo-de-fabricación de la reivindicación 50, donde dicho alcohol veratrílico es provisto a un rango de concentración de 0.5-4 mM.
52. El método no terapéutico, la composición cosmética, el equipo o el artículo-de-fabricación de la reivindicación 50, donde dicho alcohol veratrílico es provisto a una concentración de 2 mM. 30
53. El método no terapéutico, la composición cosmética, el equipo o el artículo-de-fabricación de la reivindicación 40, donde dicha matriz porosa es una espuma de poliuretano.
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