Un compuesto seleccionado de: **Fórmula**

Inhibidores de serina proteasas, particularmente de la proteasa VHC NS3-NS4a.

Referencia a solicitudes de patente relacionadas La presente solicitud reivindica el beneficio de la Solicitud Provisional de los Estados Unidos número 60/513.765, presentada el 23 de octubre de 2003, titulada "Inhibitors of Serine Proteases, Particularly HCVNS3-NS4A Protease". La presente solicitud también reivindica el beneficio de la Solicitud de Patente de los Estados Unidos número 10/412.600, presentada el 11 de abril de 2003, titulada "Inhibitors of Serine Proteases, Particularly HCV NS3-NS4A Protease".

Campo técnico de la invención

La presente invención se refiere a compuestos que inhiben la actividad de serina proteasas, particularmente la actividad de la serina proteasa NS3-NS4A del virus de la hepatitis C. Como tal, actúan interfiriendo con el ciclo de vida del virus de la hepatitis C y son también útiles como agentes antivirales. La invención se refiere adicionalmente a composiciones farmacéuticas que comprenden estos compuestos bien para uso ex vivo o bien para administración a un paciente que sufre de infección por VHC. La invención también se refiere a procedimientos para preparar los compuestos y a procedimientos de tratar una infección por VHC en un paciente administrando una composición farmacéutica que comprende un compuesto de la presente invención.

Antecedentes de la invención

La infección por virus de la hepatitis C es un problema médico humano imperioso. EL VHC está reconocido como el agente causante de la mayoría de los casos de hepatitis no-A, no-B, con una seroprevalencia humana estimada del 3 % globalmente [A. Alberti y cols., "Natural Histor y of Hepatitis C, " J. Hepatology, 31., (Supl. 1) , páginas 17-24 (1999) ]. Casi cuatro millones de personas puedan estar infectadas sólo en los Estados Unidos [M.J. Alter y cols., "The Epidemiology of Viral Hepatitis in the United States, Gastroenterol. Clin. North Am., 23, páginas 437-455 (1994) ; M. J. Alterar "Hepatitis C Virus Infection in the United States, " J. Hepatology, 31., (Supl. 1) , páginas 88-91 (1999) ].

Tras la primera exposición al VHC sólo aproximadamente el 20 % de los individuos infectados desarrollan hepatitis clínicas agudas mientras que otros parecen resolver la infección espontáneamente. En casi el 70 % de los casos, sin embargo, el virus establece una infección crónica que persiste durante décadas [S. Iwarson, "The Natural Course of Chronic Hepatitis", FEMS Microbiology Reviews, 14, páginas. 201-204 (1994) ; D. Lavanchy, "Global Surveillance and Control of Hepatitis C", J. Viral Hepatitis, 6, páginas 35-47 (1999) ]. Esto normalmente da como resultado inflamación del hígado recurrente y progresiva, que a menudo conduce a enfermedades más graves tales como cirrosis y carcinoma hepatocelular [M.C. Kew, "Hepatitis C and Hepatocellular Carcinoma", FEMS Microbiology Reviews, 14, páginas 211-220 (1994) ; I. Saito y cols., "Hepatitis C Virus Infection is Associated with the Development of Hepatocellular Carcinoma", Proc. Natl. Acad. Sci. EE.UU., 87, páginas 6547-6549 (1990) ]. Desafortunadamente, no hay tratamientos efectivos en líneas generales para la progresión debilitante de VHC crónica.

El genoma del VHC codifica una poliproteína de 3010-3033 aminoácidos [Q.L. Choo, y cols., "Genetic Organization and Diversity of the Hepatitis C Virus" Proc. Natl. Acad. Sci. EE.UU:, 88, páginas 2451-2455 (1991) ; N. Kato y cols., "Molecular Cloning of the Human Hepatitis C Virus Genome From Japanese Patients with Non-A, Non-B Hepatitis", Proc. Natl. Acad. Sci. EE.UU., 87, páginas 9524-9528 (1990) ; A. Takamizawa y cols., "Structure and Organization of the Hepatitis C Virus Genome Isolated From Human Carriers", J. Virol., 65, páginas 1105-1113 (1991) ]. Se supone que las proteínas de VHC no estructurales (NS) proporcionan la maquinaria catalítica esencial para la replicación vírica. Las proteínas NS se derivan por escisión proteolítica de la poliproteína [R. Bartenschlageret. y cols., "Nonstructural Protein 3 of the Hepatitis C Virus Encodes a Serine- Type Proteinase Required for Cleavage at the NS3/4 and NS4/5 Junctions", J. Virol., 67, páginas 3835-3844 (1993) ; A. Grakoui y cols., "Characterization of the Hepatitis C Virus-Encoded Serine Proteinase: Determination of Proteinase-Dependent Polyprotein Cleavage Sites", J. Virol., 67, páginas 2832-2843 (1993) ; A. Grakoui y cols., "Expression and Identification of Hepatitis C Virus Polyprotein Cleavage Products", J. Virol., 67, páginas 1385-1395 (1993) ; L. Tomei y cols., "NS3 is a serine protease required for processing of hepatitis C virus polyprotein", J. Virol., 67, páginas 4017-4026 (1993) ].

La proteína 3 NS (NS3) del VHC contiene una actividad serina proteasa que ayuda a la mayoría de las enzimas víricas y así se considera esencial para replicación vírica e infectividad. Se sabe que las mutaciones en la proteasa NS3 del virus de la fiebre amarilla disminuyen la infectividad vírica [Chambers, T.J. y cols., "Evidence that the Nterminal Domain of Nonstructural Protein NS3 From Yellow Fever Virus is a Serine Protease Responsible for Site-Specific Cleavages in the Viral Polyprotein", Proc. Natl. Acad. Sci. EE.UU., 87, páginas 8898-8902 (1990) ]. Se ha mostrado que los primeros 181 aminoácidos de NS3 (residuos 1027-1207 de la poliproteína vírica) contienen el dominio de la serina proteasa de NS3 que procesa todos los cuatro sitios más adelante en la cadena de la poliproteína de VHC [C. Lin y cols., "Hepatitis C Virus NS3 Serine Proteinase: Trans-Cleavage Requirements and Processing Kinetics", J. Virol., 68, páginas 8147-8157 (1994) ].

La serina proteasa NS3 de VHC y su cofactor asociado, NS4A, ayudan a procesar todas las enzimas víricas y así se consideran esenciales para la replicación vírica. Este procesamiento parece ser análogo a aquel llevado a cabo por la aspartil proteasa del virus de la inmunodeficiencia humana, que también está implicada en el procesamiento de enzimas víricas. Los inhibidores de la proteasa del VIH, que inhiben el procesamiento de proteínas víricas, son potentes agentes antivirales en el hombre, indicando que interrumpir esta fase del ciclo vital vírico da como resultado agentes terapéuticamente activos. En consecuencia la serina proteasa NS3 de VHC es también un objetivo atractivo para descubrimiento de fármacos.

Además, la comprensión actual del VHC no ha conducido a ningún otro agente o tratamiento anti-VHC satisfactorio. Hasta recientemente, el único tratamiento para la enfermedad de VHC era el tratamiento de interferón. Sin embargo, los interferones tienen efectos secundarios significativos [M. A. Wlaker y cols., "Hepatitis C Virus: An Overview of Current Approaches and Progress, " DDT, 4, páginas 518-29 (1999) ; D. Moradpour y cols., "Current and Evolving Therapies for Hepatitis C, " Eur. J. Gastroenterol. Hepatol., 11, páginas 1199-1202 (1999) ; H. L. A. Janssen y cols. "Suicide Associated with Alfa-Interferon Therapy for Chronic Viral Hepatitis", J. Hepatol., 21, páginas 241-243 (1994) ;

P.F. Renault y cols., "Side Effects of Alpha Interferon", Seminars in Liver Disease, 9, páginas 273-277. (1989) ] e inducen la remisión a largo plazo en sólo una fracción (-25 %) de los casos (O. Wieland, "Interferon Therapy in Chronic Hepatitis C Virus Infection", FEMS Microbiol. Rev., 14, páginas 279-288 (1994) ]. Las recientes introducciones de las formas pegiladas de interferón (PEG-Intron® y Pegasys®) y la terapia de combinación de ribavirina e interferón pegilado (Rebetrol®) han resultado en sólo mejoras modestas en las tasas de remisión y sólo reducciones parciales de los efectos secundarios. Además, las perspectivas de vacunas eficaces anti-VHC siguen siendo inciertas.

Así, existe la necesidad de terapias contra el VHC más eficaces. Tales inhibidores tendrían potencial terapéutico como inhibidores de proteasa, particularmente como inhibidores de serina proteasa y más particularmente como inhibidores de proteasa NS3 de VHC. Específicamente, tales compuestos pueden ser útiles como agentes antivirales, particularmente como agentes anti-VHC.

El documento WO 98/17679 A1 describe inhibidores de serina proteasas, particularmente inhibidores de proteasas NS3 del virus de la hepatitis C. El documento WO 01/40262 A1 describe inhibidores de alfa-cetoamida de la proteasa NS3 del virus de la hepatitis C. El documento WO 01/74768 A2 describe inhibidores de la proteasa NS3 del virus de la hepatitis C. El documento WO 02/08244 A2 describe péptidos novedosos como inhibidores de serina proteasa NS3 del virus de la hepatitis C.

Sumario de... [Seguir leyendo]

1. Un compuesto seleccionado de:

2. Una composición farmacéutica que comprende un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 o una sal farmacéuticamente aceptable o mezcla de la misma en una cantidad efectiva para inhibir una serina proteasa; y un transportador, coadyuvante o vehículo aceptable.

3. La composición de acuerdo con la reivindicación 2, en la que dicha composición está formulada para administración a un paciente.

4. La composición de acuerdo con la reivindicación 3, en la que dicha composición comprende un agente adicional seleccionado de un agente inmunomodulador; un agente antiviral; un segundo inhibidor de proteasa de VHC; un

inhibidor de otro objetivo en el ciclo vital de VHC; y un inhibidor del citocromo p-450; o combinaciones de los mismos.

5. La composición de acuerdo con la reivindicación 2, en la que dicho agente inmunomodulador es a-, º-, o y

interferón o timosina; dicho agente antiviral es ribavirina, amantadina, o telbivudina; o dicho inhibidor de otro objetivo 5 en el ciclo vital de VHC es un inhibidor de VHC helicasa, polimerasa, o metaloproteasa.

6. La composición de acuerdo con la reivindicación 4, en la que dicho inhibidor del citocromo P-450 es ritonavir.

7. Un procedimiento in vitro de inhibir la actividad de una serina proteasa en una muestra biológica que comprende la etapa de poner en contacto dicha serina proteasa con un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1.

8. El procedimiento de acuerdo con la reivindicación 7, en el que dicha serina proteasa es una proteasa NS3 de 10 VHC.

9. El uso de una composición de acuerdo con la reivindicación 3 en la elaboración de un medicamento para tratar una infección por VHC en un paciente.

10. Un procedimiento in vitro de eliminar o reducir la contaminación de VHC de una muestra biológica o de

equipamiento médico o de laboratorio, que comprende la etapa de poner en contacto dicha muestra biológica o 15 dicho equipamiento médico o de laboratorio con una composición de acuerdo con la reivindicación 2.

11. El procedimiento de acuerdo con la reivindicación 10, en el que dicha muestra o equipamiento se selecciona de sangre, otros fluidos corporales, tejido biológico, un instrumento quirúrgico, una prenda quirúrgica, un instrumento de laboratorio, una prenda de laboratorio, un aparato de recogida de sangre o de otro fluido corporal; un material de almacenamiento de sangre o de otro fluido corporal.

12. El procedimiento de acuerdo con la reivindicación 11, en el que dicho fluido corporal es sangre.