Reducción de la lixiviación de la proteína A durante la cromatografía de afinidad con proteína A.
(25/03/2020) Un método para reducir la lixiviación de proteína A en la purificación de un anticuerpo que comprende una región CH2/CH3 mediante cromatografía con proteína A, en donde el método comprende:
separar células hospedadoras recombinantes que expresan el anticuerpo del medio de cultivo celular para proporcionar una composición del fluido de cultivo celular recogido (FCCR) que comprende el anticuerpo y una o más impurezas;
reducir la temperatura de la composición del FCCR que se somete a cromatografía con proteína A a una temperatura en el intervalo de 3 ºC a 18 ºC; y
someter la composición del FCCR que tiene una temperatura en el intervalo de 3 ºC a 18 ºC a una cromatografía con proteína A para proporcionar una composición de anticuerpo purificada;
en donde la reducción de la temperatura de la composición del FCCR reduce la lixiviación de la…
Purificación de proteínas.
(31/05/2017) Un método para purificar un polipéptido de una composición que comprende el polipéptido y contaminantes, comprendiendo dicho método las etapas secuenciales de:
(a) cargar la composición en una resina de intercambio iónico con un tampón de equilibrado que tiene una primera concentración de sal;
(b) lavar la resina de intercambio iónico con un tampón de lavado hasta que se mide una concentración de proteína predeterminada en el flujo a través, en donde la concentración de sal del tampón de lavado aumenta desde una segunda concentración inicial de sal, que es mayor que la concentración de sal del tampón de equilibrado, hasta una tercera concentración final de sal y en donde la concentración predeterminada de proteína corresponde a una DO de 0,6 medida a 280 nm;
(c) hacer pasar un…
Reducción de la lixiviación de la proteína A durante la cromatografía de afinidad con proteína A.
Sección de la CIP Química y metalurgia
(27/04/2016). Solicitante/s: GENENTECH, INC.. Clasificación: C07K16/06.
Un método de purificación de una proteína que comprende una región CH2/CH3 mediante cromatografía de afinidad con proteína A, en el que una cromatografía con proteína A inicial se lleva a cabo a temperatura ambiente de más de 20 ºC que da como resultado más de 20 ng de proteína A lixiviada por mg de proteína que está presente en una composición purificada, comprendiendo el método:
(a) someter una muestra de la proteína y una o más impurezas a una cromatografía de afinidad con proteína A, en donde la temperatura de la muestra está a una temperatura reducida en el intervalo de 3 ºC a 15 ºC,
(b) recuperar la composición purificada obtenida, y
(c) medir la proteína A lixiviada en dicha composición purificada,
en el que la lixiviación de la proteína A se reduce en la composición purificada obtenida a la temperatura reducida y dicha composición purificada contiene de 0 ng de proteína A a 15 ng de proteína A por mg de proteína.
PDF original: ES-2578933_T3.pdf
Purificación de anticuerpos anti-HER2.
(15/10/2014) Un método para purificar un polipéptido a partir de una composición que comprende el polipéptido y contaminantes, en el que el polipéptido es un anticuerpo que se une a HER2 y en el que los contaminantes comprenden una variedad desamidada del anticuerpo, y en donde el método comprende las etapas secuenciales de:
(a) cargar la composición sobre una resina de intercambio catiónico con un tampón de equilibrado que tiene una primera concentración de sal;
(b) lavar la resina de intercambio catiónico con un tampón de lavado hasta que se mide una concentración predeterminada de proteína en el flujo a través, en donde la concentración de sal del tampón de lavado aumenta desde una segunda concentración de sal inicial que es mayor que la concentración de sal…
Precipitación con polielectrolito y purificación de anticuerpos.
(21/10/2013) Método de purificación de anticuerpos, que comprende:
(a) ajustar la acidez o la concentración de sales de una mezcla que contiene un anticuerpo en la que elanticuerpo deriva de un fluido de cultivo celular y el fluido de cultivo celular deriva de un cultivo celular demamífero;
(b) añadir un polielectrolito policatiónico cargado positivamente seleccionado entre poliarginina y polilisina a lamezcla, mediante lo cual se forma un precipitado que comprende el polielectrolito policatiónico cargadopositivamente e impurezas seleccionadas entre agregados de proteínas, fragmentos de proteínas,proteínas de célula huésped, insulina, gentamicina y ADN; y
(c)…
PRECIPITACIÓN CON POLIELECTROLITO Y PURIFICACIÓN DE ANTICUERPOS.
(15/02/2012) Método de purificación de anticuerpos que comprende: (a) ajustar la acidez o concentración de sal de una mezcla que contiene un anticuerpo donde el anticuerpo deriva de un fluido de cultivo celular recogido y el fluido de cultivo celular recogido deriva de un cultivo de células de mamífero; (b) añadir un polielectrolito cargado negativamente seleccionado entre ácido polivinilsulfónico, polivinilsulfonato, ácido poliestirensulfónico, y ácido poliacrílico y donde el polielectrolito cargado negativamente tiene un peso molecular de aproximadamente 1000 a aproximadamente 1.000.000 Da, mediante lo cual se forma un precipitado de proteína-polielectrolito que comprende el polielectrolito cargado negativamente y el anticuerpo; (c) separar el precipitado de proteína-polielectrolito…