Método para romper un ácido nucleico y añadir un adaptador por medio de transposasa y reactivo.
(01/07/2020) Un metodo para romper un acido nucleico y anadir un adaptador por medio de una transposasa, que comprende las siguientes etapas:
interrumpir aleatoriamente un acido nucleico mediante el uso de un complejo de insercion de transposasa, en donde el complejo de insercion de transposasa comprende una transposasa y un primer adaptador que comprende una secuencia de identificacion de transposasa, y ambos extremos del acido nucleico interrumpido se ligan por separado al primer adaptador para formar una brecha en cada extremo, en donde el primer adaptador es un adaptador bicatenario;
eliminar la transposasa en el sistema por medio de purificacion, o disociacion de la transposasa de una secuencia objetivo por desnaturalizacion o digestion de la transposasa por medio de tratamiento con reactivo quimico;
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Adaptador vesicular y sus usos en la construcción y secuenciación de una biblioteca de ácidos nucleicos.
(10/07/2019) Uso de un adaptador vesicular del oligonucleótido para la construcción de una biblioteca de ácidos nucleicos monocatenarios cíclicos en donde dicho adaptador comprende
una región bicatenaria emparejada en 5' en un primer terminal del adaptador;
una región bicatenaria emparejada en 3' en un segundo terminal del adaptador, que comprende una primera cadena y una segunda cadena complementarias entre sí, en la que la primera cadena comprende un saliente en el extremo 3' de la misma y la segunda cadena comprende una base fosforilada en su extremo 5' para proporcionar un terminal adherente y
una región vesicular…
Oligonucleótido aislado y su uso en la secuenciación de ácidos nucleicos.
(27/03/2019) Un oligonucleótido aislado, que comprende
una primera cadena y una segunda cadena, en las que
un primer nucleótido terminal en el extremo 5' de la primera cadena tiene un grupo fosfato, y un segundo nucleótido terminal en el extremo 3' de la primera cadena es didesoxinucleótido; y
un tercer nucleótido terminal en el extremo 5' de la segunda cadena no tiene un grupo fosfato, y un cuarto nucleótido terminal en el extremo 3' de la segunda cadena es un didesoxinucleótido,
en el que la primera cadena es de una longitud más larga que aquella de la segunda cadena, y se forma una estructura de cadena doble entre la primera cadena y la segunda cadena y
un…
Procedimiento y sistema para determinar si un genoma es anormal.
(12/02/2019) Un procedimiento para determinar si existe una anomalía genómica en un feto, que comprende las etapas de:
a) separar glóbulos rojos nucleados fetales de una muestra obtenida de una mujer embarazada;
b) amplificar un genoma completo de los glóbulos rojos nucleados para obtener un genoma completo amplificado, construir una biblioteca de secuenciación del genoma completo utilizando el genoma completo amplificado y secuenciar la biblioteca de secuenciación del genoma completo, para obtener un resultado de secuenciación que contiene una pluralidad de datos de secuenciación;
c) determinar si la anomalía genómica existe en el feto mediante la determinación de la anomalía genómica en los glóbulos rojos nucleados basándose en…
Adaptador vesicular y usos de este en la construcción y secuenciación de bibliotecas de ácidos nucleicos.
(09/01/2019) Un adaptador vesicular de oligonucleótido para construir una biblioteca de ácidos nucleicos, que comprende:
una región bicatenaria emparejada en 5' en un primer extremo terminal del adaptador;
una región bicatenaria emparejada en 3' en un segundo extremo terminal del adaptador, que comprende una primera cadena y una segunda cadena complementarias entre sí, en donde la primera cadena comprende un saliente en el extremo 3' de esta y la segunda cadena comprende una base fosforilada en el extremo 5' de esta para proporcionar un extremo terminal adhesivo; y
una región vesicular no emparejada entre la región bicatenaria emparejada en 5' y la región bicatenaria emparejada en 3',
en donde la región vesicular no emparejada…
Método para determinar la composición de ácidos nucleicos de una mezcla de ácidos nucleicos.
(15/10/2018) Método para determinar la composición de ácidos nucleicos en una mezcla de ácidos nucleicos totales que comprende un primer ácido nucleico y un segundo ácido nucleico, en el que dicho primer ácido nucleico y dicho segundo ácido nucleico se derivan de fuentes diferentes, comprendiendo dicho método:
1) tratar dicha mezcla de ácidos nucleicos totales con un bisulfito, para convertir citosina no metilada en dicha mezcla de ácidos nucleicos totales en uracilo, y obtener una mezcla de ácidos nucleicos totales convertidos;
2) someter dicha mezcla de ácidos nucleicos totales convertidos a PCR cuantitativa fluorescente multiplexada usando un primer conjunto de cebadores de amplificación y un segundo conjunto de cebadores de amplificación, para capturar y amplificar un fragmento de ácido…
Método para construir una biblioteca de secuenciación con base en una muestra de sangre y uso de la misma para determinar una anormalidad genética fetal.
(18/09/2018) Un método para preparar una biblioteca para la secuenciación usando una muestra de ADN de una muestra de sangre, que comprende:
(a) aislar una muestra de ADN de la muestra de sangre,
(b) desfosforilación de la muestra de ADN para obtener un producto de fragmentación desfosforilado, y
(c) someter los fragmentos de ADN desfosforilados de dicho producto de fragmentación a las siguientes etapas para obtener una biblioteca de ADN cíclicos para secuenciación:
(i) reparación final para obtener un fragmento de ADN de cadena doble que tiene dos extremos romos con cuatro nucleótidos terminales que carecen cada uno de un grupo fosfato;
(ii) ligar un primer adaptador y un segundo adaptador que son diferentes entre sí con el fragmento de ADN de cadena doble respectivamente en los dos extremos…