Meganucleasas diseñadas racionalmente con especificidad de secuencia y afinidad de unión a ADN alteradas.
(22/03/2017) Un método para escindir una secuencia de reconocimiento de diana de ADN bicatenario en una célula eucariota que comprende:
introducir en dicha célula eucariota
un ácido nucleico que codifica una meganucleasa; o
una proteína meganucleasa;
en el que dicha meganucleasa escinde dicha secuencia de reconocimiento de diana de ADN bicatenario; y
en el que dicha meganucleasa es una meganucleasa recombinante que comprende:
un polipéptido que tiene al menos un 85 % de similitud de secuencia con los restos 2-153 de la meganucleasa I-CreI de SEQ ID NO: 1;
y que tiene especificidad por un semisitio de secuencia…
Meganucleasas diseñadas racionalmente con especificidad de secuencia y afinidad de unión a ADN alteradas.
(14/09/2016) Un método para producir una meganucleasa recombinante que tiene especificidad por un semisitio de secuencia de reconocimiento alterada que difiere en al menos un par de bases respecto de un semisitio dentro de una secuencia de reconocimiento de la meganucleasa I-Crel seleccionada del grupo que consiste en las SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 4 y SEQ ID NO: 5, comprendiendo dicho método:
A. diseñar una secuencia polipeptídica que tiene una similitud de al menos el 85 % con los restos 2-153 de la meganucleasa I-Crel de SEQ ID NO: 1, comprendiendo dicho diseño modificar la secuencia de los restos 2-153 de la meganucleasa I-Crel de SEQ ID NO: 1, en donde se ha alterado la especificidad en la posición -1:
(a) a una T en una hebra codificante mediante una modificación seleccionada entre el…
Meganucleasas diseñadas racionalmente con especificidad de secuencia y afinidad de unión a ADN alteradas.
Sección de la CIP Química y metalurgia
(04/05/2016). Solicitante/s: Precision Biosciences. Clasificación: C12N15/90, C12N9/22.
Una meganucleasa recombinante que comprende:
un polipéptido que tiene una similitud de al menos el 85 % con los restos 2-153 de la meganucleasa I-CreI de SEQ ID NO: 1;
en la que la afinidad de unión a ADN se ha aumentado mediante al menos una modificación de un resto que es parte de la superficie de contacto de la estructura de la meganucleasa I-CreI de SEQ ID NO: 1, correspondiendo dicha modificación a una sustitución seleccionada entre el grupo que consiste en:
sustitución de E80 por H, N, Q, S, T, K o R.
PDF original: ES-2582091_T3.pdf
Meganucleasa diseñada racionalmente con afinidad de formación de dímeros alterada.
(25/03/2015) Un monómero de meganucleasa recombinante que tiene afinidad alterada para la formación de dímeros con un monómero de meganucleasa de referencia, que comprende:
un polipéptido que tiene al menos un 85 % de similitud de secuencia con los restos 2-153 del monómero de meganucleasa I-Crel de SEC ID Nº: 1;
en el que la afinidad por la formación de monómeros se ha alterado mediante al menos una modificación correspondiente a una sustitución seleccionada del grupo que consiste en:
(a) sustitución de K7, K57 o K96 por D o E; o
(b) sustitución de E8 o E61 por K o R.
Meganucleasas diseñadas racionalmente con especificidad de secuencia y afinidad de unión a ADN alteradas.
(24/12/2014) Un método para producir una célula eucariota genéticamente modificada que incluye una secuencia exógena insertada en un cromosoma de dicha célula eucariota, que comprende:
transfectar una célula eucariota con uno o más ácidos nucleicos que incluyen
(i) una primera secuencia de ácido nucleico que codifica una meganucleasa, y
(ii) una segunda secuencia de ácido nucleico que incluye dicha secuencia exógena;
en el que dicha meganucleasa produce un sitio de escisión en dicho cromosoma y dicha secuencia exógena se inserta en dicho cromosoma en dicho sitio de escisión;
en el que dicha meganucleasa comprende un polipéptido que tiene al menos un 85 % de similitud de secuencia…
Meganucleasas diseñadas racionalmente con especificidad de secuencia y afinidad de unión a ADN alteradas.
(10/10/2013) Una meganucleasa recombinante que comprende:
un polipéptido que tiene al menos 85 % de similitud de secuencia con los restos 2-153 de la meganucleasa I-CreI de SEC ID Nº 1; y
que tiene especificidad por un semisitio de secuencia de reconocimiento que difiere en al menos un par de bases de un semisitio dentro de una secuencia de reconocimiento de meganucleasa I-CreI seleccionada del grupo que consiste en SEC ID Nº: 2, SEC ID Nº: 3, SEC ID Nº: 4 y SEC ID Nº: 5;
en la que:
la especificidad en la posición -1 se ha alterado:
(a) a una T en una cadena con sentido por una modificación seleccionada del grupo que consiste en H139, Q46 y H46;
(b) a una A en una cadena con sentido por una modificación seleccionada del grupo que consiste en Y139, C46 y A46;
(c) a una G en una cadena con sentido por una modificación…
Meganucleasas racionalmente diseñadas con especificidad de secuencia y afinidad de unión a ADN alteradas.
(02/10/2013) Un procedimiento de escisión de un secuencia de reconocimiento diana de ADN bicatenario en una célulaeucariota que comprende:
introducir en dicha célula eucariota
un ácido nucleico que codifica una meganucleasa o
una proteína meganucleasa,
en el que dicha meganucleasa escinde dicha secuencia de reconocimiento diana de ADN bicatenario, y
en el que dicha meganucleasa es una meganucleasa recombinante que comprende:
un polipéptido que tiene al menos el 85% de similitud de secuencias con los residuos 2-153 de lameganucleasa I-CreI de SEC ID Nº: 1,
y que tiene especificidad por un medio sitio de la secuencia 15 de reconocimiento que se diferencia al menos unpar de bases de un medio sitio dentro de una secuencia de reconocimiento de la meganucleasa I-CreIseleccionada del grupo…
Meganucleasas diseñadas racionalmente con especificidad de secuencia y afinidad de unión a ADN alteradas.
(14/03/2012) Un monómero de meganucleasa recombinante que comprende:
un polipéptido que tiene 85 % de similitud de secuencia con los restos 2-153 de la meganucleasa I-CreI deSEC ID Nº 1;
en el que la afinidad para formación de dímeros se ha alterado por al menos una modificación correspondientea una sustitución seleccionada del grupo que consiste en:
(a) sustitución de K7, K57 o K96 con D o E; o
(b) sustitución de E8 o E61 con K o R.
BIOSENSORES PARA DETECTAR GLUCOSA.
Sección de la CIP Física
(15/06/2009). Ver ilustración. Solicitante/s: DUKE UNIVERSITY. Clasificación: G01N33/543, G01N33/542.
Biosensor para detectar glucosa bajo condiciones fisiológicas, que comprende una proteína de unión periplasmática bactericida, donde la proteína periplasmática bactericida es una proteína de unión a glucosa (GBP) y por lo menos un grupo informador fijado en una posición de dicha GBP correspondiente a la posición 183 de GBP E. coli, donde la unión de glucosa en una cavidad de unión a glucosa de dicho biosensor provoca un cambio en la señalización por dicho grupo informador.
Sección de la CIP Física
(16/03/2009). Ver ilustración. Solicitante/s: DUKE UNIVERSITY. Clasificación: G01N33/58, G01N33/53, G01N33/533, G01N33/532, G01N33/66.
Biosensor de glucosa que comprende una proteína enlazante de glucosa (GBP) y un grupo indicador que efectúan la transducción de una señal detectable, en el que dicho grupo indicador se acopla a dicha GBP para que una señal transducida mediante dicho grupo indicador cuando dicha GBP se encuentra enlazada a la glucosa se diferencia de una señal transducida por dicho grupo indicador cuando dicha GBP no se encuentra enlazada a la glucosa; en el que dicho grupo indicador es un fluoróforo y en el que dicha GBP se manipula mediante ingeniería genética para incluir residuos de aminoácido que permitan la introducción específica del sitio de dicho grupo indicador.
