Medios y métodos para la determinación de la cantidad de polipéptido Neurotoxina y de sus actividades catalíticas y proteolíticas.

Un procedimiento in vitro para determinar la cantidad de polipéptidos de neurotoxina clostridial tratados en una solución que comprende polipéptidos de neurotoxina tratados y polipéptidos de neurotoxina parcialmente tratados y/o no tratados,

comprendiendo el procedimiento las etapas siguientes:

a) poner en contacto una primera porción de dicha solución que comprende polipéptido neurotoxina clostridial tratado y polipéptido neurotoxina parcialmente tratado y/o no tratado, con un primer anticuerpo de captura que se une específicamente a la cadena ligera del polipéptido neurotoxina tratado, parcialmente tratado y sin tratar en condiciones que permiten la unión de dicho anticuerpo de captura a dicha ligera de polipéptido neurotoxina tratado, parcialmente tratado y sin tratar, formando así un primer complejo de anticuerpo,

b) poner en contacto dicho primer complejo de anticuerpo con un anticuerpo de detección que se une específicamente a la cadena ligera de dicho polipéptido neurotoxina clostridial tratado, parcialmente tratado, y no tratado en el complejo de anticuerpo formado en la etapa a), por lo que se forma un primer complejo de detección,

c) poner en contacto una segunda porción de dicha solución que comprende polipéptido neurotoxina clostridial tratado y polipéptido neurotoxina parcialmente tratado y/o sin tratar con un segundo anticuerpo de captura que se une específicamente al enlazador de dicho polipéptido neurotoxina clostridial parcialmente tratado y sin tratar en condiciones que permiten la unión de dicho segundo anticuerpo de captura a dicho polipéptido neurotoxina clostridial parcialmente tratado y sin tratar, en donde dicho segundo anticuerpo de captura se une específicamente a un epítopo peptídico que consiste en una secuencia de aminoácidos como se muestra en cualquiera de las SEQ. ID. nº: 1 a nº: 16, formando así un segundo complejo de anticuerpos,

d) poner en contacto dicho segundo complejo de anticuerpo con un anticuerpo de detección que es diferente del anticuerpo de detección en la etapa b) y que se une específicamente al complejo de anticuerpo formado en la etapa c), con lo cual se forma un segundo complejo de detección,

e) determinar la cantidad del primer complejo de detección formado en la etapa b) y la cantidad del segundo complejo de detección formado en la etapa d), y

f) calcular la cantidad de polipéptido neurotoxina clostridial tratado, basándose en las cantidades del primer y segundo complejo de detección determinado en la etapa e).

Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/EP2010/055432.

Solicitante: MERZ PHARMA GMBH & CO. KGAA.

Nacionalidad solicitante: Alemania.

Dirección: ECKENHEIMER LANDSTRASSE 100 60318 FRANKFURT AM MAIN ALEMANIA.

Inventor/es: PFEIL,MICHAEL, FRIEDRICH,JOSEF.

Fecha de Publicación: .

Clasificación Internacional de Patentes:

  • G01N33/569 SECCION G — FISICA.G01 METROLOGIA; ENSAYOS.G01N INVESTIGACION O ANALISIS DE MATERIALES POR DETERMINACION DE SUS PROPIEDADES QUIMICAS O FISICAS (procedimientos de medida, de investigación o de análisis diferentes de los ensayos inmunológicos, en los que intervienen enzimas o microorganismos C12M, C12Q). › G01N 33/00 Investigación o análisis de materiales por métodos específicos no cubiertos por los grupos G01N 1/00 - G01N 31/00. › para microorganismos, p. ej. protozoarios, bacterias, virus.

PDF original: ES-2647243_T3.pdf

 

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