Oligonucleótido bifuncional para la detección de multianalitos universal en tiempo real.
Procedimiento para la detección de al menos una molécula objetivo,
que comprende los siguientes pasos:pasos:
a) puesta a disposición de una sonda mediadora para la detección de al menos una molécula objetivo, que comprende una región de sonda y una región mediadora, siendo la sonda mediadora un oligonucleótido y estando dispuesta la región de sinda en el extremo 3` y la región mediadora en el extremo 5` del oligonucleótido, presentándose entre las regiones un punto de disociación químico, biológico y/o físico, y presentando la región de sonda una afinidad con una molécula modelo y la región mediadora una afinidad adicional con una molécula de identificación,
b) puesta a disposición de una molécula de identificación, siendo la molécula de identificación un oligonucleótido y presentando al menos las siguientes regiones:
· una primera región en un extremo 5` de la molécula de identificación, que presenta un aceptor de fluorescencia o un donador de fluorescencia y/o un grupo químico para el enlace con una fase sólida y/o un grupo protector químico,
· una segunda región que interacciona con la región mediadora, y
· una tercera región que presenta un donador de fluorescencia o un aceptor de fluorescencia y/o un grupo protector químico,
c) unión de la región de sonda de la sonda mediadora a una secuencia de la molécula modelo y/o de la molécula objetivo,
d) amplificación de la molécula modelo y/o de la molécula objetivo con ayuda de una molécula auxiliar, preferentemente mediante un proceso de amplificación que incluye un procedimiento isotérmico y/o procedimiento basado en termociclaje y/o mediante una PCR, de modo especialmente preferente una PCR en tiempo real,
e) disociación de la sonda mediadora en el punto de disociación durante el paso d) mediante al menos la molécula auxiliar del paso d) u otras moléculas auxiliares, y
f) unión de la región mediadora disociada de la sonda mediadora a la molécula de identificación,
g) detección de señal.
Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/EP2012/072402.
Solicitante: Albert-Ludwigs-Universität Freiburg.
Nacionalidad solicitante: Alemania.
Dirección: Fahnenbergplatz 1 79085 Freiburg ALEMANIA.
Inventor/es: ROTH,GÜNTER, FALTIN,BERND, STETTEN,FELIX, WALDE,SIMON.
Fecha de Publicación: .
Clasificación Internacional de Patentes:
- C12Q1/68 QUIMICA; METALURGIA. › C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA. › C12Q PROCESOS DE MEDIDA, INVESTIGACION O ANALISIS EN LOS QUE INTERVIENEN ENZIMAS, ÁCIDOS NUCLEICOS O MICROORGANISMOS (ensayos inmunológicos G01N 33/53 ); COMPOSICIONES O PAPELES REACTIVOS PARA ESTE FIN; PROCESOS PARA PREPARAR ESTAS COMPOSICIONES; PROCESOS DE CONTROL SENSIBLES A LAS CONDICIONES DEL MEDIO EN LOS PROCESOS MICROBIOLOGICOS O ENZIMOLOGICOS. › C12Q 1/00 Procesos de medida, investigación o análisis en los que intervienen enzimas, ácidos nucleicos o microorganismos (aparatos de medida, investigación o análisis con medios de medida o detección de las condiciones del medio, p. ej. contadores de colonias, C12M 1/34 ); Composiciones para este fin; Procesos para preparar estas composiciones. › en los que intervienen ácidos nucleicos.
PDF original: ES-2698903_T3.pdf
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