Extracción de ácido nucleico de materiales biológicos heterogéneos.

Un método para extraer ácido nucleico de una muestra biológica,

que comprende los pasos de:

(a) proporcionar una muestra biológica obtenida de un sujeto, en el que la muestra comprende una colección heterogénea de materiales que contienen ácido nucleico que comprenden células o microvesículas, o ambos;

(b) realizar un paso de preprocesamiento de muestra en la muestra biológica para obtener una fracción que comprende la colección heterogénea de materiales que contienen ácido nucleico, en el que el paso de preprocesamiento excluye proteínas, lípidos, restos de células muertas y otros contaminantes potenciales e inhibidores PCR de los materiales que contienen ácido nucleico heterogéneo;

(c) realizar una operación de exclusión por afinidad poniendo en contacto la colección heterogénea de materiales que contienen ácido nucleico con un agente de afinidad que se une a un marcador de superficie y eliminando los materiales de ácido nucleico que se unen al agente de afinidad para agotar los materiales que contienen ácido nucleico procedentes de un célula de tipo donante específico o un tipo de célula tumoral específica, seguido de una operación de mejora de extracción, en el que el marcador de superficie es un marcador tumoral seleccionado de los marcadores listados en la Tabla 2, y en el que la operación de mejora de extracción comprende el uso de un agente seleccionado del grupo que consiste en un inhibidor de RNasa, una proteasa, un agente reductor, un sustrato señuelo, un receptor soluble, un ARN de interferencia corta, una molécula de unión a ARN, una sustancia desnaturalizante de RNasa y cualquier combinación de los mismos, en combinación con un paso de procesamiento seleccionada del grupo que consiste en lavar los materiales que contienen ácido nucleico; separación por tamaño de RNasas de la muestra biológica; desnaturalización de proteínas en la muestra biológica; y combinaciones de los mismos; y

(d) extraer ácido nucleico de los materiales resultantes.

Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/US2012/037443.

Solicitante: Exosome Diagnostics, Inc.

Nacionalidad solicitante: Estados Unidos de América.

Dirección: 266 Second Avenue, Suite 200 Waltham, MA 02451 ESTADOS UNIDOS DE AMERICA.

Inventor/es: SKOG,JOHAN KARL OLOV, RUSSO,LEILEATA M, COMPER,WAYNE.

Fecha de Publicación: .

Clasificación Internacional de Patentes:

  • C07H21/02 QUIMICA; METALURGIA.C07 QUIMICA ORGANICA.C07H AZUCARES; SUS DERIVADOS; NUCLEOSIDOS; NUCLEOTIDOS; ACIDOS NUCLEICOS (derivados de ácidos aldónicos o sacáricos C07C, C07D; ácidos aldónicos, ácidos sacáricos C07C 59/105, C07C 59/285; cianohidrinas C07C 255/16; glicales C07D; compuestos de constitución indeterminada C07G; polisacáridos, sus derivados C08B; ADN o ARN concerniente a la ingeniería genética, vectores, p. ej. plásmidos o su aislamiento, preparación o purificación C12N 15/00; industria del azúcar C13). › C07H 21/00 Compuestos que contienen al menos dos unidades mononucleótido que tienen cada una grupos fosfato o polifosfato distintos unidos a los radicales sacárido de los grupos nucleósido, p. ej. ácidos nucleicos. › con ribosilo como radical sacárido.

PDF original: ES-2744589_T3.pdf

 

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