Ensayos de unión de ligando-receptor resuelta espacialmente.

Un método para determinar la concentración de una secuencia de ácido nucleico diana de hebra sencilla en una muestra que comprende las etapas de:



(a) combinar en una mezcla de reacción (i) una muestra que se sospecha que contiene una secuencia de ácido nucleico diana de hebra sencilla, (ii) una secuencia de ácido nucleico de captura de hebra sencilla anclada a una micropartícula que es complementaria a la secuencia de ácido nucleico diana de hebra sencilla, y (iii) una secuencia de ácido nucleico de hebra sencilla marcada con fluorescencia que es idéntica a la secuencia de ácido nucleico diana de hebra sencilla, y que permite la formación de un complejo que comprende la micropartícula anclada a la secuencia de ácido nucleico de captura de hebra sencilla, la secuencia de ácido nucleico diana de hebra sencilla y la secuencia de ácido nucleico de hebra sencilla marcada con fluorescencia;

(b) adquirir una imagen de luz blanca de la mezcla de reacción para determinar la ubicación de la micropartícula en la reacción de la etapa (a) y una imagen de fluorescencia de la mezcla de reacción para determinar la ubicación de la secuencia de ácido nucleico de hebra sencilla marcado con fluorescencia en la reacción de la etapa (a);

(c) seleccionar al menos una región de interés a partir de las imágenes adquiridas en la etapa (b), en donde la al menos una región de interés es una región a partir de la cual emanan señales luminosas del complejo formado en la etapa (a);

(d) seleccionar píxeles en la al menos una región de interés para el análisis;

(e) calcular y registrar la media y la varianza de los recuentos por píxel para los píxeles seleccionados en la etapa (d), en donde el recuento por píxel es el número de fotones sometidos a recuento por píxel por unidad de tiempo;

(f) omitir píxeles que tienen recuentos mayores o menores que una varianza especificada;

(g) calcular los recuentos medios por píxel de los píxeles restantes; y

(h) determinar la concentración de la secuencia de ácido nucleico diana de hebra sencilla a partir de los datos de la etapa (g).

Tipo: Patente Europea. Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: E16198871.

Solicitante: ABBOTT LABORATORIES.

Nacionalidad solicitante: Estados Unidos de América.

Dirección: 100 Abbott Park Road Abbott Park, IL 60064-3500 ESTADOS UNIDOS DE AMERICA.

Inventor/es: QIAOQIAO,RUAN, SALDANA,SILVIA C, SKINNER,JOSEPH P, TETIN,SERGEY Y.

Fecha de Publicación: .

Clasificación Internacional de Patentes:

  • G01N21/64 SECCION G — FISICA.G01 METROLOGIA; ENSAYOS.G01N INVESTIGACION O ANALISIS DE MATERIALES POR DETERMINACION DE SUS PROPIEDADES QUIMICAS O FISICAS (procedimientos de medida, de investigación o de análisis diferentes de los ensayos inmunológicos, en los que intervienen enzimas o microorganismos C12M, C12Q). › G01N 21/00 Investigación o análisis de los materiales por la utilización de medios ópticos, es decir, utilizando rayos infrarrojos, visibles o ultravioletas (G01N 3/00 - G01N 19/00 tienen prioridad). › Fluorescencia; Fosforescencia.
  • G01N33/543 G01N […] › G01N 33/00 Investigación o análisis de materiales por métodos específicos no cubiertos por los grupos G01N 1/00 - G01N 31/00. › con un soporte insoluble para la inmovilización de compuestos inmunoquímicos.

PDF original: ES-2733575_T3.pdf

 

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