Complejo enzimático de enzimas de Trichoderma Reesei y P. Funiculosum.

Un complejo enzimático que tiene actividad beta-1,4-endoglucan hidrolasa que comprende:

a. un producto de fermentación de Trichoderma reesei; y

b. un producto de fermentación de Penicillium funiculosum que comprende una o más enzimas seleccionadas de una xilanasa (EC 3.2.1.8), una celulasa (EC 3.2.1.4) y una beta-glucanasa (EC 3.2.1.6);

en donde la relación de la actividad beta-1,4-endoglucan hidrolasa de Penicillium funiculosum y de Trichoderma reesei es de 0,25/0,75 a 0,35/0,65 y en donde la actividad beta-1,4-endoglucan hidrolasa del complejo enzimático se mide usando el siguiente ensayo:

una unidad de actividad de celulasa se define como la cantidad de enzima que produce 1 mmol de equivalentes de glucosa por minuto en las condiciones del ensayo (pH 5,0) y 50ºC;

El complejo enzimático se diluye en muestras y se hace una curva estándar de glucosa usando concentraciones de glucosa de 0, 0,125, 0,25, 0,375 y 0,5 mg/ml;

Se mezclan 0,25 ml de solución de enzima con 1,75 ml de solución de sustrato (solución de carboximetilcelulosa (CMC) al 1,5% p/v en tampón acetato sódico 0,1 M, pH 5,0) a 50ºC y la reacción se detiene después de 10 min mediante la adición de una solución de ácido 3,5-dinitrosalicílico (DNS) (20 g/l de DNS en tampón que contiene 32 g/l de pellets de hidróxido sódico y 600 g/l de tartrato de sodio y potasio (+)). A esto le sigue el calentamiento a 95ºC durante 5 minutos;

La densidad óptica se mide a 540 nm (OD540 nm). La actividad enzimática se determina a partir de la curva estándar. La actividad se calcula como sigue:

Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/EP2010/056259.

Solicitante: Dupont Nutrition Biosciences ApS.

Nacionalidad solicitante: Dinamarca.

Dirección: Langebrogade 1 1411 Copenhagen K DINAMARCA.

Inventor/es: FISH,NEVILLE MARSHALL, MILLER,LONE BRØND.

Fecha de Publicación: 7 de Junio de 2019.

Clasificación Internacional de Patentes:

A23L2/02 NECESIDADES CORRIENTES DE LA VIDA. › A23 ALIMENTOS O PRODUCTOS ALIMENTICIOS; SU TRATAMIENTO, NO CUBIERTO POR OTRAS CLASES. › A23L ALIMENTOS, PRODUCTOS ALIMENTICIOS O BEBIDAS NO ALCOHOLICAS NO CUBIERTOS POR LAS SUBCLASES A21D O A23B - A23J; SU PREPARACION O TRATAMIENTO, p. ej. COCCION, MODIFICACION DE LAS CUALIDADES NUTRICIONALES, TRATAMIENTO FISICO (conformación o tratamiento, no enteramente cubierto por la presente subclase, A23P ); CONSERVACION DE ALIMENTOS O DE PRODUCTOS ALIMENTICIOS, EN GENERAL (conservación de la harina o las masas panificables A21D). › A23L 2/00 Bebidas no alcohólicas; Composiciones secas o concentrados para fabricarlas; Su preparación (concentrados de sopa A23L 23/10; preparación de bebidas no alcohólicas por eliminación de alcohol C12H 3/00). › que contienen zumos de frutas o verduras.
C12C1/00 QUIMICA; METALURGIA. › C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA. › C12C CERVEZA; PREPARACIÓN DE CERVEZA POR FERMENTACIÓN (envejecimiento o maduración mediante almacenamiento C12H 1/22; métodos para reducir el contenido de alcohol después de la fermentación C12H 3/00; métodos para aumentar el contenido de alcohol después de la fermentación C12H 6/00; dispositivos de ventilación para barricas, barriles o similares C12L 9/00 ); PREPARACIÓN DE MALTA PARA LA PRODUCCIÓN DE CERVEZA; PREPARACIÓN DE LÚPULO PARA LA PRODUCCIÓN DE CERVEZA. › Preparación de malta.
C12C5/00 C12C […] › Otras materias primas para la fabricación de cerveza.
C12C7/04 C12C […] › C12C 7/00 Preparación del mosto (extracto de malta C12C 1/18). › Preparación o tratamiento de la masa de malta.
C12N1/14 C12 […] › C12N MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN; PROPAGACION, CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO (medios para ensayos microbiológicos C12Q 1/00). › C12N 1/00 Microorganismos, p.ej. protozoos; Composiciones que los contienen (preparaciones de uso médico que contienen material de protozoos, bacterias o virus A61K 35/66, de algas A61K 36/02, de hongos A61K 36/06; preparación de composiciones de uso médico que contienen antígenos o anticuerpos bacterianos, p. ej. vacunas bacterianas, A61K 39/00 ); Procesos de cultivo o conservación de microorganismos, o de composiciones que los contienen; Procesos de preparación o aislamiento de una composición que contiene un microorganismo; Sus medios de cultivo. › Microorganismos fúngicos (cultivo de setas A01G 18/00; como novedades vegetales A01H 15/00 ); Sus medios de cultivo.
C12N9/24 C12N […] › C12N 9/00 Enzimas, p. ej. ligasas (6.); Proenzimas; Composiciones que las contienen (preparaciones para la limpieza de los dientes que contienen enzimas A61K 8/66, A61Q 11/00; preparaciones de uso médico que contienen enzimas A61K 38/43; composiciones detergentes que contienen enzimas C11D ); Procesos para preparar, activar, inhibir, separar o purificar enzimas. › actúan sobre compuestos glicosílicos (3.2).
C12N9/42 C12N 9/00 […] › actúan sobre los enlaces beta-glucosídicos-1,4, p. ej. celulasa.
C12P7/06 C12 […] › C12P PROCESOS DE FERMENTACION O PROCESOS QUE UTILIZAN ENZIMAS PARA LA SINTESIS DE UN COMPUESTO QUIMICO DADO O DE UNA COMPOSICION DADA, O PARA LA SEPARACION DE ISOMEROS OPTICOS A PARTIR DE UNA MEZCLA RACEMICA. › C12P 7/00 Preparación de compuestos orgánicos que contienen oxígeno. › Etanol como producto químico y no como bebida alcohólica.
C12R1/80 C12 […] › C12R SISTEMA DE INDEXACION ASOCIADO A LAS SUBCLASES C12C - C12Q, RELATIVO A LOS MICROORGANISMOS. › C12R 1/00 Microorganismos. › Penicillium.
C12R1/885 C12R 1/00 […] › Trichoderma.

PDF original: ES-2715952_T3.pdf

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