Método de generación de L-lisina por medio de bacterias fermentadoras que poseen un gen de aconitasa y/o un elemento regulador modificado.

Un método para producir L-lisina mediante fermentación o para aumentar el rendimiento de fermentación de la Llisina,

que comprende las etapas de:

(1) modificar un gen de aconitasa y/o un elemento regulador de este en un cromosoma de una bacteria productora de L-lisina, de modo que la actividad y/o la cantidad de expresión de la aconitasa de la bacteria se reduce, pero no se elimina; y

(2) producir L-lisina mediante fermentación con la bacteria obtenida mediante la modificación de la etapa (1),

en el que la modificación del gen de aconitasa y/o un elemento regulador de este incluye:

(i) una sustitución del codón de inicio de la secuencia de nucleótidos de SEQ ID NO:1 del gen de aconitasa en el cromosoma de una Escherichia coli productora de L-lisina por GTG;

(ii) una sustitución de la secuencia de nucleótidos de SEQ ID NO:4 de un promotor del gen de aconitasa en el cromosoma de una Escherichia coli productora de L-lisina por la secuencia de nucleótidos de SEQ ID NO:3;

(iii) una sustitución de la secuencia de nucleótidos de SEQ ID NO:6 de un promotor del gen de aconitasa en el cromosoma de una Corynebacterium glutamicum o Corynebacterium pekinense productora de L-lisina por la secuencia de nucleótidos de SEQ ID NO:5;

(iv) una deleción de 90 nucleótidos antes del codón de fin en la secuencia de nucleótidos del gen de aconitasa de SEQ ID NO:1 en el cromosoma de una Escherichia coli productora de L-lisina; o

(v) una adición en la secuencia de nucleótidos de un represor de la transcripción (SEQ ID NO:7) del gen de aconitasa, preferiblemente una adición de la secuencia de nucleótidos mostrada en SEQ ID NO:8 y 7 en tándem.

Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/CN2014/070228.

Solicitante: Ningxia Eppen Biotech Co. Ltd.

Nacionalidad solicitante: China.

Dirección: Yanghe Industry Garden Yongning Yinchuan Ningxia 750100 CHINA.

Inventor/es: ZHANG, YUN, MA,JIYIN, WEN,TINGYI, CHEN,JINLONG, LIANG,YONG, LIU,SHUWEN, WEI,AIYING, YANG,LIPENG, REN,RUI, MENG,GANG, ZHAO,CHUNGUANG, SHANG,XIULING, GUO,XIAOWEI.

Fecha de Publicación: 11 de Abril de 2018.

Clasificación Internacional de Patentes:

C12N1/21 QUIMICA; METALURGIA. › C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA. › C12N MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN; PROPAGACION, CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO (medios para ensayos microbiológicos C12Q 1/00). › C12N 1/00 Microorganismos, p.ej. protozoos; Composiciones que los contienen (preparaciones de uso médico que contienen material de protozoos, bacterias o virus A61K 35/66, de algas A61K 36/02, de hongos A61K 36/06; preparación de composiciones de uso médico que contienen antígenos o anticuerpos bacterianos, p. ej. vacunas bacterianas, A61K 39/00 ); Procesos de cultivo o conservación de microorganismos, o de composiciones que los contienen; Procesos de preparación o aislamiento de una composición que contiene un microorganismo; Sus medios de cultivo. › modificados por la introducción de material genético extraño.
C12N15/61 C12N […] › C12N 15/00 Técnicas de mutación o de ingeniería genética; ADN o ARN relacionado con la ingeniería genética, vectores, p. ej. plásmidos, o su aislamiento, su preparación o su purificación; Utilización de huéspedes para ello (mutantes o microorganismos modificados por ingeniería genética C12N 1/00, C12N 5/00, C12N 7/00; nuevas plantas en sí A01H; reproducción de plantas por técnicas de cultivo de tejidos A01H 4/00; nuevas razas animales en sí A01K 67/00; utilización de preparaciones medicinales que contienen material genético que es introducido en células del cuerpo humano para tratar enfermedades genéticas, terapia génica A61K 48/00; péptidos en general C07K). › Isomerasas (5).
C12N15/70 C12N 15/00 […] › Vectores o sistemas de expresión especialmente adaptados a E. coli.
C12P13/08 C12 […] › C12P PROCESOS DE FERMENTACION O PROCESOS QUE UTILIZAN ENZIMAS PARA LA SINTESIS DE UN COMPUESTO QUIMICO DADO O DE UNA COMPOSICION DADA, O PARA LA SEPARACION DE ISOMEROS OPTICOS A PARTIR DE UNA MEZCLA RACEMICA. › C12P 13/00 Preparación de compuestos orgánicos que contienen nitrógeno. › Lisina; Acido diaminopimélico; Treonina; Valina.

PDF original: ES-2673582_T3.pdf

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