Método para enriquecer secuencias mutantes monocatenarias a partir de una mezcla de secuencias naturales y mutantes.

Un método para preparar una secuencia diana mutante monocatenaria a partir de una mezcla de secuencias diana que se sospecha que contienen la secuencia diana mutante y una secuencia diana natural,

el método comprende:

(i) someter las secuencias diana a una temperatura de desnaturalización que es superior a la temperatura de fusión de las secuencias diana, formar de esta manera una mezcla que contiene la secuencia mutante monocatenaria y secuencias naturales monocatenarias, la mezcla se caracteriza por una relación de secuencias mutantes monocatenarias con respecto a secuencias naturales monocatenarias,

(ii) poner en contacto la mezcla con un exceso de una secuencia de referencia complementaria a la secuencia natural,

(iii) reducir la temperatura para permitir la formación de dúplexes de cadena diana/cadena de referencia, en donde los dúplexes incluyen dúplexes de cadena mutante/cadena de referencia y dúplexes de cadena natural/cadena de referencia,

(iv) someter los dúplexes de cadena diana/cadena de referencia a una temperatura crítica de desnaturalización Tc que es inferior a la temperatura de fusión de los dúplexes de cadena natural/cadena de referencia, para permitir la desnaturalización selectiva de los dúplexes de cadena mutante/cadena de referencia,

(v) retirar los dúplexes de cadena natural/cadena de referencia,

con los cual aumenta la relación de secuencias diana mutantes monocatenarias con respecto a las secuencias diana naturales monocatenarias.

Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/US2012/031527.

Solicitante: DANA-FARBER CANCER INSTITUTE, INC..

Nacionalidad solicitante: Estados Unidos de América.

Dirección: 450 Brookline Avenue Boston, MA 02215 ESTADOS UNIDOS DE AMERICA.

Inventor/es: MAKRIGIORGOS,GERASSIMOS.

Fecha de Publicación: .

Clasificación Internacional de Patentes:

  • C12Q1/68 SECCION C — QUIMICA; METALURGIA.C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA.C12Q PROCESOS DE MEDIDA, INVESTIGACION O ANALISIS EN LOS QUE INTERVIENEN ENZIMAS O MICROORGANISMOS (ensayos inmunológicos G01N 33/53 ); COMPOSICIONES O PAPELES REACTIVOS PARA ESTE FIN; PROCESOS PARA PREPARAR ESTAS COMPOSICIONES; PROCESOS DE CONTROL SENSIBLES A LAS CONDICIONES DEL MEDIO EN LOS PROCESOS MICROBIOLOGICOS O ENZIMOLOGICOS. › C12Q 1/00 Procesos de medida, investigación o análisis en los que intervienen enzimas o microorganismos (aparatos de medida, investigación o análisis con medios de medida o detección de las condiciones del medio, p. ej. contadores de colonias, C12M 1/34 ); Composiciones para este fin; Procesos para preparar estas composiciones. › en los que intervienen ácidos nucleicos.

PDF original: ES-2656557_T3.pdf

 

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