Generación de moléculas de unión.

Un método para producir al menos dos anticuerpos que se unen a un antígeno o epítopo seleccionado de interés,

dicho método comprende al menos las siguientes etapas:

a) proporcionar una población de células B que expresan un repertorio limitado de VL que comprende no más de 10 VL diferentes, en las que esencialmente todas las citadas células B portan al menos una VL, en donde dicha población de células B se obtiene a partir de un animal transgénico no humano que porta un repertorio limitado de VL, en donde dicho repertorio limitado de VL consiste en menos de 10 VL, en donde dicho animal no humano ha sido inmunizado con dicho antígeno, y en donde dicha población de células B comprende células B obtenidas del bazo y/o al menos un ganglio linfático,

b) obtener ácidos nucleicos a partir de dichas células B,

c) opcionalmente, amplificación de secuencias de ácido nucleico que codifican regiones variables de cadena pesada de inmunoglobulina en dicha muestra,

d) secuenciación al menos parcial de esencialmente todos los ácidos nucleicos obtenidos de la etapa b) o los productos de amplificación de etapa c),

e) realizar un análisis de frecuencia de las secuencias de VH de la etapa d), que comprende secuencias de CDR3 de cadena pesada,

f) seleccionar las 20 secuencias de VH más abundantes,

g) proporcionar células huésped con al menos un vector que comprende al menos una de dichas secuencias de VH y al menos una secuencia de VL de dicho repertorio limitado de VL,

h) cultivar dichas células huésped y permitir la expresión de polipéptidos de VH y VL,

i) obtener dichos anticuerpos.

Tipo: Patente Europea. Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: E12186010.

Solicitante: Merus N.V.

Inventor/es: LOGTENBERG, TON, DE KRUIF, CORNELIS, ADRIAAN, THROSBY,Mark.

Fecha de Publicación: .

Clasificación Internacional de Patentes:

  • C07K16/00 QUIMICA; METALURGIA. › C07 QUIMICA ORGANICA. › C07K PEPTIDOS (péptidos que contienen β -anillos lactamas C07D; ipéptidos cíclicos que no tienen en su molécula ningún otro enlace peptídico más que los que forman su ciclo, p. ej. piperazina diones-2,5, C07D; alcaloides del cornezuelo del centeno de tipo péptido cíclico C07D 519/02; proteínas monocelulares, enzimas C12N; procedimientos de obtención de péptidos por ingeniería genética C12N 15/00). › Inmunoglobulinas, p. ej. anticuerpos mono o policlonales.
  • C07K16/10 C07K […] › C07K 16/00 Inmunoglobulinas, p. ej. anticuerpos mono o policlonales. › de virus ARN.
  • C07K16/28 C07K 16/00 […] › contra receptores, antígenos celulares de superficie o determinantes celulares de superficie.
  • C07K16/30 C07K 16/00 […] › de células tumorales.
  • C07K16/32 C07K 16/00 […] › contra productos de traducción de oncogenes.
  • C07K16/46 C07K 16/00 […] › Inmoglobulinas híbridas (híbridos de una inmunoglobulina con un péptido distinto de una inmunoglobulina C07K 19/00).
  • C12Q1/68 C […] › C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA. › C12Q PROCESOS DE MEDIDA, INVESTIGACION O ANALISIS EN LOS QUE INTERVIENEN ENZIMAS, ÁCIDOS NUCLEICOS O MICROORGANISMOS (ensayos inmunológicos G01N 33/53 ); COMPOSICIONES O PAPELES REACTIVOS PARA ESTE FIN; PROCESOS PARA PREPARAR ESTAS COMPOSICIONES; PROCESOS DE CONTROL SENSIBLES A LAS CONDICIONES DEL MEDIO EN LOS PROCESOS MICROBIOLOGICOS O ENZIMOLOGICOS. › C12Q 1/00 Procesos de medida, investigación o análisis en los que intervienen enzimas, ácidos nucleicos o microorganismos (aparatos de medida, investigación o análisis con medios de medida o detección de las condiciones del medio, p. ej. contadores de colonias, C12M 1/34 ); Composiciones para este fin; Procesos para preparar estas composiciones. › en los que intervienen ácidos nucleicos.
  • C40B30/04 C […] › C40 TECNOLOGIA COMBINATORIA. › C40B QUIMICA COMBINATORIA; BIBLIOTECAS, p. ej. QUIMIOTECAS (bibliotecas combinatorias in silico de ácidos nucleicos, proteínas o péptidos G16B 35/00; química combinatoria in silico G16C 20/60). › C40B 30/00 Procedimientos de selección de bibliotecas. › midiendo la capacidad para unirse específicamente a una molécula diana, p. ej. unión anticuerpo-antígeno, unión receptor-ligando.

PDF original: ES-2636239_T3.pdf

 

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