Dianas moleculares y métodos para cribado de formulación y ensayo de eficacia de conservante.

Un método para identificar y cuantificar células microbianas en una o más muestras que contienen un microorganismo de interés,

que comprende:

(a) la amplificación de ADN específico de especie procedente de muestras que contienen pre-ARNr usando una reacción en cadena de polimerasa de transcripción inversa, comprendiendo dicha etapa de amplificación:

usar un primer cebador complementario a una región pre-ARNr de dicho microorganismo de interés;

usar un segundo cebador complementario a una región de ARNr maduro de dicho microorganismo de interés; y

llevar a cabo múltiples ciclos de amplificación usando dicho primer cebador y dicho segundo cebador para producir niveles detectables de ADN amplificado específico de especie; y

(b) la cuantificación de dicho ADN amplificado específico de especie, comprendiendo dicha etapa de cuantificación:

usar una sonda de hibridación marcada fluorescentemente complementaria a dicha región de ARNr maduro de dicho microorganismo de interés;

usar dicho primer cebador complementario a dicha región pre-ARNr de dicho microorganismo de interés;

usar dicho segundo cebador complementario a dicha región de ARNr maduro de dicho microorganismo de interés; y

llevar a cabo múltiples ciclos de amplificación usando dicha sonda de hibridación marcada fluorescentemente y dicho primer cebador y dicho segundo cebador para producir niveles crecientes de señal de fluorescencia por encima de la fluorescencia de fondo;

en donde dicha amplificación de dicho ADN específico de especie indica la presencia de dichas células microbianas viables en dicha una o más muestras, y en donde dicha cuantificación de dicho ADN específico de especie proporciona una medida relativa de la cantidad de dichas células microbianas viables en dicha una o más muestras.

Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/US2012/057705.

Solicitante: LONZA WALKERSVILLE, INC.

Nacionalidad solicitante: Estados Unidos de América.

Dirección: 8830 Biggs Ford Road Walkersville, MD 21793 ESTADOS UNIDOS DE AMERICA.

Inventor/es: COLEMAN, TIMOTHY, A., SEOANE,SOPHIE, GONTARD,STEPHANIE.

Fecha de Publicación: .

Clasificación Internacional de Patentes:

  • C12Q1/68 SECCION C — QUIMICA; METALURGIA.C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA.C12Q PROCESOS DE MEDIDA, INVESTIGACION O ANALISIS EN LOS QUE INTERVIENEN ENZIMAS O MICROORGANISMOS (ensayos inmunológicos G01N 33/53 ); COMPOSICIONES O PAPELES REACTIVOS PARA ESTE FIN; PROCESOS PARA PREPARAR ESTAS COMPOSICIONES; PROCESOS DE CONTROL SENSIBLES A LAS CONDICIONES DEL MEDIO EN LOS PROCESOS MICROBIOLOGICOS O ENZIMOLOGICOS. › C12Q 1/00 Procesos de medida, investigación o análisis en los que intervienen enzimas o microorganismos (aparatos de medida, investigación o análisis con medios de medida o detección de las condiciones del medio, p. ej. contadores de colonias, C12M 1/34 ); Composiciones para este fin; Procesos para preparar estas composiciones. › en los que intervienen ácidos nucleicos.

PDF original: ES-2626481_T3.pdf

 

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