Método de detección de nucleótidos simples.

Un método para determinación de la secuencia de bases nucleotídicas en un analito polinucleotídico caracterizado por los pasos de (1) generación de una corriente de trifosfatos de bases nucleotídicas simples a partir del analito por pirofosforólisis progresiva en presencia de una enzima de pirofosforólisis;

(2) producción de moléculas capturadas por reacción de cada trifosfato de base nucleotídica simple en presencia de una polimerasa y una ligasa con un sistema de captura que comprende: (i) dos componentes que comprenden (a) un primer oligonucleótido que comprende una región bicatenaria y una región monocatenaria y (b) un segundo oligonucleótido monocatenario cuya secuencia de bases nucleotídicas es al menos parcialmente complementaria a la de la región monocatenaria del primer oligonucleótido; o (ii) un oligonucleótido simple que comprende una región nucleotídica monocatenaria cuyos extremos están unidos a dos regiones oligonucleotídicas bicatenarias diferentes; y en donde el sistema de captura está marcado con elementos detectables en un estado indetectable; (3) liberación de los elementos detectables de cada molécula capturada en un estado detectable utilizando una exonucleasa o la actividad de exonucleasa de una polimerasa y (4) detección de los elementos detectables así liberados y determinación de la secuencia de bases nucleotídicas a partir de ello.

Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/GB2014/051105.

Solicitante: Base4 Innovation Ltd.

Nacionalidad solicitante: Reino Unido.

Dirección: Broers Building, J J Thomson Avenue Cambridge, Cambridgeshire CB3 0FA REINO UNIDO.

Inventor/es: DEAR,PAUL, BALMFORTH,BARNABY, FRAYLING,CAMERON ALEXANDER, SOARES,BRUNO FLAVIO NOGUEIRA DE SOUSA, ISAAC,THOMAS HENRY, BREINER,BORIS, NATALE,ALESSANDRA, AMASIO,MICHELE.

Fecha de Publicación: .

Clasificación Internacional de Patentes:

  • C12Q1/68 QUIMICA; METALURGIA.C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA.C12Q PROCESOS DE MEDIDA, INVESTIGACION O ANALISIS EN LOS QUE INTERVIENEN ENZIMAS, ÁCIDOS NUCLEICOS O MICROORGANISMOS (ensayos inmunológicos G01N 33/53 ); COMPOSICIONES O PAPELES REACTIVOS PARA ESTE FIN; PROCESOS PARA PREPARAR ESTAS COMPOSICIONES; PROCESOS DE CONTROL SENSIBLES A LAS CONDICIONES DEL MEDIO EN LOS PROCESOS MICROBIOLOGICOS O ENZIMOLOGICOS. › C12Q 1/00 Procesos de medida, investigación o análisis en los que intervienen enzimas, ácidos nucleicos o microorganismos (aparatos de medida, investigación o análisis con medios de medida o detección de las condiciones del medio, p. ej. contadores de colonias, C12M 1/34 ); Composiciones para este fin; Procesos para preparar estas composiciones. › en los que intervienen ácidos nucleicos.

PDF original: ES-2558610_T3.pdf

 

Método de detección de nucleótidos simples.

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