Utilización de ácido acético para eliminar los problemas inducidos por el ión Fe en las formulaciones de anticuerpos anti-HM1.24 o anti-IL6R.

El uso de ácido acético para suprimir la formación de materia insoluble visible y/o partículas insolubles causada por iones Fe presentes en una formulación en disolución que contiene anticuerpos,

en donde la formulación en disolución que contiene anticuerpos comprende ácido acético y un agente tensioactivo como estabilizadores, en donde el anticuerpo es un anticuerpo anti-receptor de interleuquina-6 o un anticuerpo anti-antígeno HM1.24 y en donde la concentración de ácido acético está en el intervalo de 5 a 100 mM.

Utilización de ácido acético para eliminar los problemas inducidos por el ión Fe en las formulaciones de anticuerpos anti-HM1.24 o anti-IL6R

Campo técnico

La presente invención se refiere en general al uso de ácido acético para suprimir la formación de materia insoluble visible y/o partículas insolubles causada por iones Fe presentes en una formulación de disolución que contiene anticuerpo. 10

Técnica anterior

Los avances en la tecnología de recombinación génica han permitido el uso farmacéutico de anticuerpos, tales como inmunoglobulinas, anticuerpos monoclonales y anticuerpos humanizados. Para garantizar un suministro estable de 15 estos anticuerpos, es necesario establecer condiciones de producción y almacenamiento en las que la estructura y la actividad de los anticuerpos puedan ser mantenidas.

El documento EP-A-1.174.148 se refiere a una composición farmacéutica parenteral que comprende un fragmento de anticuerpo monoclonal humanizado, un agente tensioactivo no iónico y sacáridos, en donde el pH es débilmente 20 ácido.

El documento US-B-6.252.055 describe preparaciones de anticuerpos monoclonales concentrados para la administración a seres humanos en las que el anticuerpo está presente a una concentración mayor de 100 mg/mL y tan alta como 350 mg/mL. 25

Las sustancias farmacéuticas liofilizadas de anticuerpos monoclonales o policlonales, que contienen un azúcar o un amino azúcar, así como un tensioactivo como agente estabilizante se describen en el documento WO 98/22136.

El documento WO 98/56418 describe una formulación farmacéutica acuosa estable que comprende una cantidad 30 terapéuticamente eficaz de un anticuerpo no sometido a liofilización previamente; un tampón que mantiene el pH en el intervalo de aproximadamente 4, 5 a aproximadamente 6, 0, un tensioactivo y un poliol.

Cuando las proteínas se almacenan en forma de una disolución altamente concentrada, generalmente están asociadas con un problema de deterioro, que incluye la formación de agregados insolubles, es necesario evitar tal 35 deterioro. Por ejemplo, el solicitante ha encontrado que un anticuerpo anti-HM1.24 tiene un efecto terapéutico sobre las células de mieloma (documento JP KOKAI 11-092399) , y también ha estudiado la formulación de este anticuerpo. Sin embargo, el anticuerpo anti-HM1.24 es una proteína inestable y es muy probable que experimente cambios físicos y químicos (por ejemplo, asociación, agregación) como resultado de estreses en el proceso de purificación. Tales estreses incluyen el estrés por filtración durante la eliminación de virus y bacterias, el estrés por 40 concentración, el estrés por calor y el estrés por luz.

También, en el caso de utilizar técnicas de ingeniería genética para obtener anticuerpos, las células productoras de anticuerpos se cultivan a granel, las disoluciones que contienen anticuerpos se purifican, se congelan y se almacenan hasta su descongelación para su utilización en la formulación del fármaco. Sin embargo, la repetición de 45 tales etapas de agitación y congelación-descongelación provoca la formación de agregados de anticuerpos y/o partículas insolubles. Además, el almacenamiento a largo plazo causa la descomposición de los anticuerpos, lo que da como resultado la formación de productos de descomposición. Estos fenómenos podrían conducir eventualmente a una reducción del nivel de anticuerpos que permanecen en la disolución.

50 También existe el problema de que la materia insoluble visible y las partículas insolubles se forman en presencia de iones metálicos (iones Fe) introducidos durante el proceso de producción. Puesto que los iones metálicos (iones Fe) , incluso cuando están presentes en cantidades muy pequeñas en la disolución, contribuyen a la formación de materia insoluble visible y partículas insolubles, tales iones deben eliminarse por completo. Sin embargo, existe un límite para los métodos de eliminación tal como la precipitación, la formación de complejos, etcétera. Por lo tanto, ha 55 habido una necesidad de desarrollar una estrategia para evitar la formación de materia insoluble visible y partículas insolubles incluso en presencia de iones metálicos.

Se han realizado muchos intentos para almacenar proteínas en una forma de disolución, con el hallazgo de que los efectos de estabilización se obtienen mediante la adición de un estabilizador para prevenir cambios químicos y 60 físicos. Los ejemplos del estabilizador incluyen materiales de alto peso molecular tales como proteínas (p. ej., albúmina de suero humano, gelatina purificada) o materiales de bajo peso molecular tales como polioles, aminoácidos y tensioactivos. Sin embargo, cuando se añaden como estabilizadores, los materiales de alto peso molecular derivados de organismos como las proteínas son desventajosos ya que se requieren procesos muy complicados para eliminar los contaminantes, tales como virus y priones. Con respecto a los materiales de bajo peso molecular, también es preferible utilizarlos en cantidades tan pequeñas como sea posible.

Para la estabilización de formulaciones de anticuerpos liofilizadas, se ha informado sobre aquellas que comprenden un azúcar o un amino azúcar, un aminoácido, y un agente tensioactivo como estabilizadores (documento JP 5 TOKUHYO 2001-503781) .

Sin embargo, ha habido una fuerte demanda de formulaciones en disolución fáciles de usar que eliminen las etapas de disolución y reconstitución antes de su uso. Especialmente, ha habido una necesidad de formulaciones en disolución estables que contengan anticuerpos. 10

Descripción de la invención

El objeto de la presente invención es suprimir la formación de materia insoluble visible y/o partículas insolubles en presencia de iones Fe introducidos durante el proceso de producción. 15

Como resultado de los esfuerzos extensos y profundos realizados para lograr el objeto anterior, los autores de de la presente invención han encontrado que el uso de ácido acético suprime significativamente la formación de materia insoluble visible en presencia de hierro, y que la adición de agentes tensioactivos suprime muy significativamente la formación de materia insoluble visible y/o partículas insolubles durante las etapas de agitación y congelación-20 descongelación.

La presente invención se resume en las reivindicaciones adjuntas.

Mejor modo de llevar a cabo la invención 25

Según se utiliza en la presente memoria, se pretende que el término "formulación en disolución que contiene anticuerpo" signifique una formulación en disolución que contiene un anticuerpo como un ingrediente activo y disponible para su uso en la administración a animales incluyendo seres humanos, preferiblemente preparada sin utilizar una etapa de liofilización. 30

Dentro de los límites de la reivindicación 1, según se utiliza en la presente memoria, se pretende que el término "disolución que contiene anticuerpo" signifique una disolución que contiene cualquier anticuerpo, ya sea el anticuerpo uno nativo o uno recombinante. Este es preferiblemente un medio de cultivo de células de mamífero (por ejemplo, células CHO) que contienen las moléculas de anticuerpo producidas por cultivo, que además se pueden 35 someter a purificación parcial u otro tratamiento o tratamientos determinados (disolución a granel) , o alternativamente, la formulación en disolución indicada anteriormente disponible para su uso en la administración a animales incluyendo seres humanos.

Según se utiliza en la presente memoria, se pretende que el término "partículas insolubles" signifique material 40 partículado insoluble de 10 µm o más grandes, como se define en la Prueba para Partículas Insolubles en Inyectables, Procedimientos de Ensayo Normalizados, Farmacopea Japonesa. La medición de partículas insolubles puede llevarse a cabo mediante el uso de un microscopio, un filtro para recoger partículas insolubles y un filtro de membrana para la medición, pero convenientemente mediante el uso de un tipo de protección contra la luz de un analizador automático de partículas. 45

Según se utiliza en la presente memoria, se pretende que el término "materia insoluble visible" signifique aquella fácilmente detectada a simple vista cuando una formulación en disolución en un recipiente se coloca directamente bajo una luz blanca con un brillo de aproximadamente 3000 lux (2000-3750 lux) contra un fondo negro, de acuerdo con los procedimientos descritos en la Sección 9.2.20 de la Farmacopea Europea, tercera edición. 50

Según se utilizan en la presente memoria, se pretende que los términos "productos de agregación" y "productos de descomposición" signifiquen... [Seguir leyendo]

1. El uso de ácido acético para suprimir la formación de materia insoluble visible y/o partículas insolubles causada por iones Fe presentes en una formulación en disolución que contiene anticuerpos, en donde la formulación en disolución que contiene anticuerpos comprende ácido acético y un agente tensioactivo como estabilizadores, en 5 donde el anticuerpo es un anticuerpo anti-receptor de interleuquina-6 o un anticuerpo anti-antígeno HM1.24 y en donde la concentración de ácido acético está en el intervalo de 5 a 100 mM.

2. El uso de acuerdo con la reivindicación 1, en donde la concentración de ácido acético está en el intervalo de 10 a 50 mM. 10

3. El uso de acuerdo con la reivindicación 1, en donde el agente tensioactivo es Polisorbato 80 o 20, o un poloxámero.

4. El uso de acuerdo con la reivindicación 3, en donde la concentración del agente tensioactivo está en el intervalo 15 de 0, 01 a 10 mg/mL.

5. El uso de acuerdo con la reivindicación 1, que comprende además cloruro de sodio.

6. El uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, en donde el anticuerpo es un anticuerpo 20 recombinante.

7. El uso de acuerdo con la reivindicación 6, en donde el anticuerpo es un anticuerpo quimérico, un anticuerpo humanizado o un anticuerpo humano.

8. El uso de acuerdo con la reivindicación 6 o 7, en donde el anticuerpo es un anticuerpo de clase IgG.

9. El uso de acuerdo con la reivindicación 8, en donde el anticuerpo de clase IgG es un anticuerpo de clase IgG1.

10. El uso de acuerdo con la reivindicación 1, en donde el anticuerpo es un anticuerpo anti-antígeno HM1.24. 30

11. El uso de acuerdo con la reivindicación 10, en donde la formulación en disolución que contiene anticuerpo comprende de 10 a 50 mM de ácido acético y de 0, 01 a 10 mg/mL de Polisorbato 80 como estabilizadores.