Procedimientos para la preparación de plasminógeno.
Procedimiento para la preparación de plasminógeno, comprendiendo el procedimiento:
(a) expresar un plasminógeno recombinante utilizando un sistema de expresión recombinante en condiciones de expresión suficientes para producir un cuerpo de inclusión de plasminógeno recombinante;
(b) poner en contacto el cuerpo de inclusión de plasminógeno recombinante con un tampón de solubilización en condiciones de solubilización suficientes para obtener un cuerpo de inclusión de plasminógeno recombinante solubilizado;
(c) poner en contacto el cuerpo de inclusión de plasminógeno recombinante solubilizado con una solución de replegamiento en condiciones de replegamiento para obtener una composición que comprende el plasminógeno recombinante, en el que se añade PEG o sulfato de amonio a la solución de replegamiento en condiciones de precipitación, en el que la solución de replegamiento comprende el plasminógeno y polipéptidos agregados, en el que el plasminógeno es plasminógeno replegado, en el que las condiciones de precipitación son suficientes para precipitar todas o una parte sustancial de las proteínas agregadas;
(d) diafiltrar la composición después de la etapa (c);
(e) poner en contacto la composición con un medio de intercambio catiónico en condiciones de intercambio iónico que son suficientes para que el medio de intercambio catiónico se una al plasminógeno recombinante;
(f) eluir el plasminógeno recombinante capturado por el medio de intercambio catiónico para obtener un eluato del medio de intercambio catiónico que comprende el plasminógeno recombinante;
(g) poner en contacto el eluato del medio de intercambio catiónico con un primer medio de afinidad en una primera condición de afinidad que es suficiente para que el primer medio de afinidad se una al plasminógeno recombinante; y
(h) eluir el plasminógeno recombinante al que se unió por el primer medio de afinidad para obtener una solución de plasminógeno que comprende el plasminógeno recombinante.
Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/US2010/025898.
Solicitante: Grifols Therapeutics Inc.
Inventor/es: ZIMMERMAN, THOMAS P., MILLER,CHARLES, KOEPF,EDWARD, LINDSAY,MYLES, SILVERSTEIN,REBECCA, HUNT,JENNIFER A, REBBEOR,JAMES, CARONNA,ANTHONY, STOKES,KENYA.
Fecha de Publicación: .
Clasificación Internacional de Patentes:
- C07K1/18 QUIMICA; METALURGIA. › C07 QUIMICA ORGANICA. › C07K PEPTIDOS (péptidos que contienen β -anillos lactamas C07D; ipéptidos cíclicos que no tienen en su molécula ningún otro enlace peptídico más que los que forman su ciclo, p. ej. piperazina diones-2,5, C07D; alcaloides del cornezuelo del centeno de tipo péptido cíclico C07D 519/02; proteínas monocelulares, enzimas C12N; procedimientos de obtención de péptidos por ingeniería genética C12N 15/00). › C07K 1/00 Procedimientos generales de preparación de péptidos. › Cromatografía de intercambio iónico.
- C12N15/57 C […] › C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA. › C12N MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN; PROPAGACION, CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO (medios para ensayos microbiológicos C12Q 1/00). › C12N 15/00 Técnicas de mutación o de ingeniería genética; ADN o ARN relacionado con la ingeniería genética, vectores, p. ej. plásmidos, o su aislamiento, su preparación o su purificación; Utilización de huéspedes para ello (mutantes o microorganismos modificados por ingeniería genética C12N 1/00, C12N 5/00, C12N 7/00; nuevas plantas en sí A01H; reproducción de plantas por técnicas de cultivo de tejidos A01H 4/00; nuevas razas animales en sí A01K 67/00; utilización de preparaciones medicinales que contienen material genético que es introducido en células del cuerpo humano para tratar enfermedades genéticas, terapia génica A61K 48/00; péptidos en general C07K). › que actúan sobre los enlaces peptídicos (3.4).
- C12N9/50 C12N […] › C12N 9/00 Enzimas, p. ej. ligasas (6.); Proenzimas; Composiciones que las contienen (preparaciones para la limpieza de los dientes que contienen enzimas A61K 8/66, A61Q 11/00; preparaciones de uso médico que contienen enzimas A61K 38/43; composiciones detergentes que contienen enzimas C11D ); Procesos para preparar, activar, inhibir, separar o purificar enzimas. › Proteinasas.
PDF original: ES-2552337_T3.pdf
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