Direccionamiento de ABCB5 para terapia para el cáncer.

Una composición para uso en el tratamiento de un sujeto que tiene melanoma,

comprende un anticuerpo anti- ABCB5 o fragmento de unión a antígeno del mismo, que tiene al menos una región humana, el anticuerpo anti- ABCB5 o fragmento de unión a antígeno del mismo comprende 1) un dominio variable de cadena pesada de inmunoglobulina, en el que: (i) CDR1-H1 comprende una secuencia de aminoácidos de la SEC ID Nº: 3; (ii) CDR2- H2 comprende una secuencia de aminoácidos de la SEC ID Nº: 4; y (iii) la secuencia de CDR3-H3 comprende una secuencia de aminoácidos de la SEC ID Nº: 5, y comprende adicionalmente 2) un dominio variable de cadena ligera de inmunoglobulina, en el que: (i) CDR1-L1 comprende una secuencia de aminoácidos de la SEC ID Nº: 6; (ii) CDR2-L2 comprende una secuencia de aminoácidos de la SEC ID Nº: 7; y (iii) la secuencia de CDR3-L3 comprende una secuencia de aminoácidos de la SEC ID Nº: 8.

Direccionamiento de ABCB5 para terapia para el cáncer Antecedentes de la invención

El melanoma maligno humano es un cáncer altamente resistente a la quimioterapia. En la actualidad no existen muchas opciones de tratamiento eficaces. El melanoma maligno de la piel es altamente predominante en Estados Unidos, con 1 de 63 hombres y mujeres que afectados durante su vida. De ellos, un 11 % se diagnostica después de que el cáncer se haya diseminado a los ganglios linfáticos regionales o directamente más allá del sitio primario y un 3 % después de que el cáncer ya ha hecho metástasis (estadio distante), con tasas de supervivencia relativa correspondientes a 5 años de un 63,8 % y un 16,0 %.

Sumario de la invención

La invención se basa al menos en parte en el descubrimiento de que las células madre tumorales quimiorresistentes ABCB5+ contribuyen al desarrollo de cánceres tales como melanoma y que estas células se pueden dirigir para el tratamiento del cáncer. El direccionamiento de ABCB5 se puede usar, ya sea como un enfoque terapéutico independiente para la enfermedad diseminada, o como un tratamiento adicional para sensibilizar las células cancerosas a los agentes quimioterapéuticos, especialmente en aquellos pacientes con enfermedad metastásica resistente en la actualidad. Una ventaja de los enfoques terapéuticos dirigidos por ABCB5 es que se dirigen a las células madre tumorigénicas, mientras que los agentes terapéuticos convencionales se dirigen solamente a la mayor parte de la población de células tumorales.

En algunos aspectos se describe un método para suministrar un agente terapéutico a un compartimiento intracelular de una célula poniendo en contacto una célula con una molécula aislada que se une selectivamente a ABCB5 conjugadas con un agente terapéutico en una cantidad eficaz para suministrar el agente terapéutico a un compartimento intracelular de la célula.

En algunas realizaciones, la molécula aislada que se une selectivamente a ABCB5 es un péptido aislado. En otras realizaciones es una molécula pequeña. El péptido aislado puede ser, por ejemplo, un anticuerpo o fragmento de unión al antígeno del mismo o un scFv.

El agente terapéutico puede ser, en algunas realizaciones, una toxina, un ARNsi, un agente de quimioterapéutico o un anticuerpo terapéutico.

El método implica, en otras realizaciones, la etapa de poner en contacto una célula con una molécula aislada que se une de forma selectiva a un marcador de superficie tal como CD49e, CD133, CD166, BMPRIa, TIR-1, VE-cadherina (CD144) o nestina.

En otras divulgaciones se proporciona una composición de un péptido aislado que se une de forma selectiva a ABCB5 y comprende una secuencia de aminoácidos seleccionada entre el grupo que consiste en SEC ID N°: 1, SEC ID N°: 2, SEC ID N°: 3, SEC ID N°: 4, SEC ID N°: 5, SEC ID N°: 6, SEC ID N°: 7 y SEC ID N°: 8, o variantes funcionalmente equivalentes de la misma que contienen sustituciones conservativas, en el que el péptido aislado no es mAb 3C2-ID12.

En otras divulgaciones en el presente documento, se proporciona una composición de un péptido aislado que se une de forma selectiva a ABCB5 y comprende una secuencia de aminoácidos seleccionada entre el grupo que consiste en SEC ID N°: 1, SEC ID N°: 2, SEC ID N°: 3, SEC ID N°: 4, SEC ID N°: 5, SEC ID N°: 6, SEC ID N°: 7, y SEC ID N°: 8, o variantes funcionalmente equivalentes de la misma que contienen sustituciones conservativas. El anticuerpo aislado o fragmento de anticuerpo está presente en una cantidad eficaz para aumentar la quimiosensibilización en un sujeto humano.

De acuerdo con otra divulgación más en el presente documento, se proporciona una composición de un péptido aislado que se une de forma selectiva a ABCB5 y comprende una secuencia de aminoácidos seleccionada entre el grupo que consiste en SEC ID N°: 1, SEC ID N°: 2, SEC ID N°: 3, SEC ID N°: 4, SEC ID N°: 5, SEC ID N°: 6, SEC ID N°: 7 and SEC ID N°: 8, o variantes funcionalmente equivalentes de la misma que contienen sustituciones conservativas. El péptido aislado se coformula con un agente terapéutico.

El péptido aislado, en algunas realizaciones, se conjuga con el agente terapéutico. En otras realizaciones, el agente terapéutico se selecciona entre el grupo que consiste en camptotecina 9-NH2, mitoxantrona, camptotecina 7-CI, pirazofurina, menogarilo, éster de camptotecina 20, camptotecina, amsacrina, etopósido, derivado de antrapirazol, ternipósido, camptotecina 11 -formilo, camptotecina 10-OH, daunorrubicina, doxidoxorrubicina, doxorrubicina, oxantrazol, camptotecina 11-CASA, zorrubicina, mostaza de uracilo, piperazinadiona, hepsulfam, melfalán, bisantreno, trietilenmelamina, espiromustina, Yoshi-864, clorambucilo, mostaza de piperazina, hidroxiurea, porfiromicina, mecloretamina, fluorodopán, mitomicina, citarabina (araC), dianhidrogalactitol, gemcitabina, tiotepa,

N,N-d¡benc¡l-daunom¡c¡na, teroxirona, y glicinato de afidicolina.

Se proporciona un kit de acuerdo con otras divulgaciones en el presente documento. El kit Incluye un recipiente que alberga un péptldo aislado que se une de forma selectiva a ABCB5 y comprende una secuencia de aminoácidos seleccionada entre el grupo que consiste en SEC ID N°: 1, SEC ID N°: 2, SEC ID N°: 3, SEC ID N°: 4, SEC ID N°: 5, SEC ID N°: 6, SEC ID N°: 7, SEC ID N°: 8, SEC ID N°: 9, SEC ID N°: 10, SEC ID N°: 11 y SEC ID N°: 12, o variantes funcionalmente equivalentes de la misma que contienen sustituciones conservativas, e instrucciones para la administración del péptido aislado a un sujeto humano.

Se proporciona un método para el tratamiento de un sujeto de acuerdo con otras divulgaciones en el presente documento. El método implica la administración sistemática de un péptldo aislado que se une de forma selectiva a ABCB5 y comprende una secuencia de aminoácidos seleccionada entre el grupo que consiste en SEC ID N°: 1, SEC ID N°: 2, SEC ID N°: 3, SEC ID N°: 4, SEC ID N°: 5, SEC ID N°: 6, SEC ID N°: 7 y SEC ID N°: 8, o variantes funclonalmente equivalentes de la misma que contienen sustituciones conservativas a un sujeto que tiene cáncer en una cantidad eficaz para tratar el cáncer.

También se proporciona un método para el tratamiento de un sujeto mediante la administración de una cualquiera de las composiciones que se describen en el presente documento a un sujeto que tiene cáncer en una cantidad eficaz para tratar el cáncer.

Se proporciona un método para el tratamiento de un sujeto de acuerdo con otras divulgaciones en el presente documento. El método implica la administración de un péptldo aislado que se une de forma selectiva a ABCB5 y comprende una secuencia de aminoácidos seleccionada entre el grupo que consiste en SEC ID N°: 1, SEC ID N°: 2, SEC ID N°: 3, SEC ID N°: 4, SEC ID N°: 5, SEC ID N°: 6, SEC ID N°: 7 and SEC ID N°: 8, o variantes funclonalmente equivalentes de la misma que contienen sustituciones conservativas y un agente qulmioterapéutico, a un sujeto que tiene cáncer en una cantidad eficaz para tratar el cáncer.

De acuerdo con otras divulgaciones en el presente documento, se proporciona un método para el tratamiento de un sujeto mediante la administración sistémica a un sujeto que tiene cáncer en una cantidad eficaz para tratar el cáncer de un anticuerpo aislado o fragmento de anticuerpo que se une de forma selectiva a ABCB5 y un agente

qulmioterapéutico.

En el presente documento se desvela un péptldo aislado de un dominio variable de cadena pesada de inmunoglobullna, en el que: (i) CDR1-H1 comprende una secuencia de aminoácidos de la SEC ID N°: 3; (¡I) CDR2- H2 comprende una secuencia de aminoácidos de la SEC ID N°: 4; y (¡II) una secuencia de CDR3-H3, en las que el péptido aislado no es mAb 3C2-1D12. En algunas realizaciones, el CDR3-H3 tiene una secuencia de aminoácidos de la SEC ID N°: 3. El péptido aislado se puede unir a ABCB5 humana y puede ser un anticuerpo. Opcionalmente, el péptido aislado incluye adicionalmente un dominio variable de cadena ligera en el que CDR1-L1 tiene una secuencia de aminoácidos de la SEC ID N°: 6, un CDR2-L2 que tiene una secuencia de aminoácidos de la SEC ID N°: 7 y/o un CDR3-L3 que tiene una secuencia de aminoácidos de la SEC ID N°: 8.

También se describe un péptido aislado que tiene un dominio variable de cadena ligera de inmunoglobullna, en el que: (i) CDR1-L1 tiene una secuencia de aminoácidos de la SEC ID N°: 6; (ii) CDR2-L2 tiene una secuencia de aminoácidos de la SEC ID N°: 7; y (iii) una secuencia de CDR3-L3, en la que el péptido aislado no es mAb 3C2- 1D12. En algunas realizaciones, el CDR3-L3 tiene una secuencia de aminoácidos de la SEC ID N°: 8.

Se proporciona un péptido aislado... [Seguir leyendo]

1. Una composición para uso en el tratamiento de un sujeto que tiene melanoma, comprende un anticuerpo anti- ABCB5 o fragmento de unión a antígeno del mismo, que tiene al menos una región humana, el anticuerpo anti- ABCB5 o fragmento de unión a antígeno del mismo comprende 1) un dominio variable de cadena pesada de inmunoglobulina, en el que: (i) CDR1-H1 comprende una secuencia de aminoácidos de la SEC ID N°: 3; (ii) CDR2- H2 comprende una secuencia de aminoácidos de la SEC ID N°: 4; y (iii) la secuencia de CDR3-H3 comprende una secuencia de aminoácidos de la SEC ID N°: 5, y comprende adicionalmente 2) un dominio variable de cadena ligera de inmunoglobulina, en el que: (i) CDR1-L1 comprende una secuencia de aminoácidos de la SEC ID N°: 6; (¡i) CDR2-L2 comprende una secuencia de aminoácidos de la SEC ID N°: 7; y (iii) la secuencia de CDR3-L3 comprende una secuencia de aminoácidos de la SEC ID N°: 8.

2. Uso de una composición para la preparación de un medicamento para el tratamiento de un sujeto que tiene melanoma, composición que comprende un anticuerpo anti-ABCB5 o fragmento de unión a antígeno del mismo, que tiene al menos una región humana, el anticuerpo anti-ABCB5 o fragmento de unión a antígeno del mismo comprende 1) un dominio variable de cadena pesada de inmunoglobulina, en el que: (i) CDR1-H1 comprende una secuencia de aminoácidos de la SEC ID N°: 3; (ii) CDR2-H2 comprende una secuencia de aminoácidos de la SEC ID N°: 4; y (¡ii) la secuencia de CDR3-H3 comprende una secuencia de aminoácidos de la SEC ID N°: 5, y comprende adicionalmente 2) un dominio variable de cadena ligera de inmunoglobulina, en el que: (I) CDR1-L1 comprende una secuencia de aminoácidos de la SEC ID N°: 6; (ii) CDR2-L2 comprende una secuencia de aminoácidos de la SEC ID N°: 7; y (¡ü) la secuencia de CDR3-L3 comprende una secuencia de aminoácidos de la SEC ID N°: 8.

3. La composición de la reivindicación 1 o uso de la reivindicación 2, en las que el anticuerpo es un Fv monocatenario, un anticuerpo monoclonal, un anticuerpo biespecífico o un anticuerpo sintético.

4. La composición de la reivindicación 1 o uso de la reivindicación 2, que comprende al menos al menos dos dominios variables de anticuerpo que comprenden: (a) el dominio variable de anticuerpo de cadena pesada de la SEC ID N°: 1; y (b) el dominio variable de anticuerpo de cadena ligera de la SEC ID N°: 2.

5. La composición de la reivindicación 1 o uso de la reivindicación 2 en las que el anticuerpo es un anticuerpo aislado totalmente humano.

6. La composición de acuerdo con la reivindicación 1 o uso de la reivindicación 2, que comprende adicionalmente un dominio de dimerización unido a la región C-terminal de un dominio variable de polipéptido de cadena pesada.

7. La composición de la reivindicación 1 o uso de la reivindicación 2, en las que el anticuerpo anti-ABCB5 o fragmento de unión a antígeno del mismo es un anticuerpo quimérico que comprende un dominio variable que se une de forma específica a ABCB5 y un dominio constante, en el que el dominio variable y el dominio constante son de especies diferentes.