Quimera IL-6R/IL-6 para terapia de neuropatía periférica inducida por quimioterapia.

Uso de una quimera IL6R/IL6, o una muteína de la misma, en la fabricación de un medicamento para laprevención y/o tratamiento de neuropatía periférica inducida por quimioterapia (NPIQ),

en el que el agente dequimioterapia es un alcaloide de la vinca, y adicionalmente en el que la muteína tiene una secuencia de aminoácidosderivada de la secuencia de aminoácidos de la quimera IL6R/IL6 por deleción o sustitución de uno o más residuosde aminoácidos de los componentes que se producen naturalmente de la quimera IL6R/IL6 o mediante la adición deuno o más residuos de aminoácidos a la secuencia original de la quimera IL6R/IL6 y es capaz de unirse a gp130.

Quimera IL-6R/IL-6 para terapia de neuropatía periférica inducida por quimioterapia Campo de la invención La presente invención está en el campo de la neuropatía inducida por quimioterapia. En particular, se refiere al uso de una quimera IL-6R/IL-6 en la fabricación de un medicamento para el tratamiento y/o prevención de neuropatía inducida por quimioterapia, en el que el agente de quimioterapia es un alcaloide de la vinca.

Antecedentes de la invención La neuropatía periférica es un complejo de trastornos del sistema nervioso periférico resultante de lesión al nervio o a la vaina de mielina. La lesión es de larga duración, normalmente sobreviviendo a la lesión que la inicia.

La neuropatía periférica inducida por quimioterapia (NPIQ) es un efecto secundario común y posiblemente inhabilitante de muchos fármacos citotóxicos. La neuropatía inducida por quimioterapia está relacionada con dosis acumulada o intensidades de dosis (Verstappen y col., 2003 Drugs 63:1549-63) .

Los alcaloides de la vinca (por ejemplo, vincristina y vinblastina) , compuestos basados en platino (por ejemplo, cisplatino) y taxanos (paclitaxel y docetaxel) están entre los fármacos más importantes que inducen neurotoxicidad periférica (Visovsky C. Cancer Invest. 2003 Jun; 21 (3) : 439-51) , Quasthoff S, Hartung HP J Neurol. 2002 Jan; 249 (1) : 9-17. Revisión) . Estos fármacos se usan ampliamente para el tratamiento de diversos tumores malignos tales como cánceres de ovario, mama y cánceres hematológicos (Verstappen y col., 2003 Drugs 63 (15) : 1549) .

La neuropatía accionada por vincristina se caracteriza principalmente por insuficiencia motora y sensorial (tipo mixto de neuropatía) . Mientras que el mecanismo subyacente no se entiende completamente hasta ahora, se ha descrito que implica una alteración del transporte axonal anterógrado, que conduce por último lugar a degeneración axonal. Hasta ahora, el tratamiento de neuropatía accionada por vincristina era solo paliativo, ya que hasta la fecha no se había desarrollado ninguna terapia eficiente.

Actualmente, la NPIQ se alivia por reducción de dosis, que puede comprometer la eficacia del tratamiento de quimioterapia. Se cree que los pacientes que ya tienen síntomas neuropáticos debido a diabetes mellitus, neuropatías hereditarias o tratamiento temprano con quimioterapia neurotóxica son más vulnerables al desarrollo de NPIQ.

En general, el tratamiento de neuropatía periférica es sintomático y no tiene efecto beneficioso que subyazca a la lesión a los nervios (Peltier AC, Russell JW. Recent advances in drug-induced neuropathies. Curr Opin Neurol. 2002 Oct; 15 (5) : 633-8) . Por ejemplo, la piridoxina (vitamina B6) se usa como procedimiento de soporte nutritivo tras la lesión nerviosa periférica, antioxidantes (por ejemplo ácido gamma-linoleico, ácido alfalipoico e inhibidores de PKC e inhibidores de aldosis reductasa) se usan para eliminar toxinas que pueden contribuir a la neuropatía periférica, se usan anticonvulsivos para suprimir los síntomas de dolor. Los intentos por prevenir la neuropatía por vincristina usando agentes neuroprotectores putativos tales como vitamina B1, vitamina B12, glutamato (Boyle y col., J Pharmacol Exp Ther. 1996 Oct; 279 (1) : 410-5.) , isoaxonina (Le Quesne y col., J Neurol Neurosurg Psychiatr y . 1985 Sep; 48 (9) : 933-5.) , gangliósidos o factor de crecimiento nervioso (Hayakawa y col., Life Sci. 1994; 55 (7) : 519-25. 4; Lewis y col., Exp Neurol. 1993 Nov; 124 (1) : 73-88.) mostraron éxito limitado.

La interleucina (IL) -6 es una citocina pleiotrópica que no solo afecta el sistema inmunitario, sino que también actúa en otros sistemas biológicos y muchos eventos fisiológicos en diversos órganos. En una célula diana, la IL-6 puede generar simultáneamente señales funcionalmente distintas o algunas veces contradictorias mediante su complejo receptor, IL-6Ralfa y gp130. La salida fisiológica final puede entenderse como consecuencia de la orquestación de las diversas rutas de señalización generadas por un ligando dado. Este concepto, el modelo de orquestación de señales, puede explicar cómo IL-6 puede provocar efectos proinflamatorios o antiinflamatorios, dependiendo de las circunstancias medioambientales in vivo. La elucidación de los mecanismos moleculares que subyacen esta cuestión es un objeto desafiante para la futura investigación (Jones y col., 2001, Heinrich y col., 2003 Biochem Journal 374, 1-20) . Las propiedades funcionales de IL-6 son extremadamente variadas y esto se refleja por la terminología originalmente usada para describir esta citocina (Horst Ibelgaufts' COPE: Cytokines Online Pathfinder Encyclopaedia) .

Las actividades biológicas de IL-6 están mediadas por un sistema de receptor de membrana que comprende dos proteínas diferentes, una llamada el receptor de IL-6 (IL-6R o gp80, revisado por Jones y col., FASEB J. 2001 Jan; 15 (1) : 43-58. Revisión) y la otra gp130 (revisado por Hirano y col., Stem Cells. 1994 May; 12 (3) :262-77. Revisión) . Formas solubles de IL-6R (sIL-6R) , correspondientes al dominio extracelular de gp80, son productos naturales del cuerpo humano encontrados como glucoproteínas en sangre y en orina (Novick y col., J Chromatogr. 1990 Jun 27;510:331-7, y Cytokine. 1992 Jan;4 (1) :6-11) . Una propiedad excepcional de moléculas de sIL-6R es que actúan de potentes agonistas de IL-6 en muchos tipos de células que incluyen células humanas (Taga y col., Cell. 1989 Aug 11;58 (3) :573-81. Novick y col., 1992 Jan;4 (1) :6-11) . Incluso sin el dominio intracitoplásmico de gp80, sIL-6R es todavía capaz de desencadenar la dimerización de gp130 en respuesta a IL-6, que a su vez media en la

transducción de señales específica de IL-6 posterior y efectos biológicos (Murakami Science. 1993 Jun 18;260 (5115) :1808-10) . sIL-6R tiene dos tipos de interacción con gp130, ambas de las cuales son esenciales para las actividades biológicas específicas de IL-6 (Halimi y col., Eur Cytokine Netw. 1995 May-Jun;6 (3) :135-43) , y se propuso que el complejo de receptor de IL-6 activo era una estructura hexámera formada por dos cadenas de gp130, dos IL-6R y dos ligandos de IL-6 (Ward y col., 1994; Paonessa y col., EMBO J. 1995 May 1;14 (9) :1942-51) .

A diferencia de la expresión del IL-6R relacionado que tiene una distribución celular limitada (revisado por Jones y col., 2001) , la expresión de gp130 que atraviesa trans-membrana se encuentra en casi todos los órganos, que incluyen corazón, riñón, bazo, hígado, pulmón, placenta y cerebro (Saito y col., J Immunol. 1992 Jun 15;148 (12) :4066-71) .

In vitro, hay muchos ejemplos diferentes que muestran que IL-6 sola no induce una actividad específica a menos que se administre IL-6R soluble. Por ejemplo, IL-6 induce la formación de osteoclastos en co-cultivos de médula ósea de ratón y células osteoblásticas, solo cuando se combina con sIL-6R (revisado por Jones y col., 2001) . Por tanto, aunque muchas células neuronales pueden producir IL-6, siguen siendo insensibles a la estimulación por la propia IL-6. La diferenciación y supervivencia de células neuronales puede, sin embargo, mediarse por la acción de sIL-6R (Hirota J Exp Med. 1996 Jun 1;183 (6) :2627-34., Martz 1998) .

Las concentraciones circulantes de sIL-6R (agonista) en sujetos normales son relativamente altas y comparables a las de gp130 soluble de por encima de 10 ng/ml, un antagonista natural de IL-6 (Corbi y col., 2000 Eur J Cardiotherac Surg. 18 (1) :98-103, Disthabanchong y col., Clin Nephrol. 2002 Oct;58 (4) :289-95) . A diferencia, las concentraciones circulantes de IL-6 son aproximadamente o por debajo de 10 pg/ml (Kado y col., 1999 Acta Diabetol. Jun 36 (1-2) 67-72, Corbi y col., 2000) . Así, el efecto de administración de IL-6 in vivo, sola, sin coadministración con sIL-6R en enfermedad puede o puede no ser eficaz y depende de la concentración del agonista/antagonista soluble en una enfermedad particular y en una localización particular en el cuerpo.

Se han descrito moléculas quiméricas que enlazan el receptor de IL-6 soluble y IL-6 juntos (Chebath y col., Eur Cytokine Netw. 1997 Dec;8 (4) :359-65) . Se han designado quimera IL-6R/IL-6. Las moléculas de IL-6R/IL-6 quiméricas se generaron fusionando las regiones codificantes enteras de ADNc que codifican el receptor de IL-6 soluble (sIL-6R) y IL-6. La quimera IL-6R/IL-6 recombinante se produjo en células CHO (Chebath y col., Eur Cytokine Netw. 1997, documento WO99/02552) . IL-6R/IL-6 se une con una mayor eficiencia a la cadena de gp130 in vitro que la mezcla de IL-6 con sIL-6R (Kollet y col., Blood. 1999 Aug 1;94 (3) :923-31) .

Las proteínas MBP y P0 se inducen normalmente durante la maduración posnatal final de células de Schwann, y se re-inducen durante... [Seguir leyendo]

1. Uso de una quimera IL6R/IL6, o una muteína de la misma, en la fabricación de un medicamento para la prevención y/o tratamiento de neuropatía periférica inducida por quimioterapia (NPIQ) , en el que el agente de quimioterapia es un alcaloide de la vinca, y adicionalmente en el que la muteína tiene una secuencia de aminoácidos derivada de la secuencia de aminoácidos de la quimera IL6R/IL6 por deleción o sustitución de uno o más residuos de aminoácidos de los componentes que se producen naturalmente de la quimera IL6R/IL6 o mediante la adición de uno o más residuos de aminoácidos a la secuencia original de la quimera IL6R/IL6 y es capaz de unirse a gp130.

2. El uso según la reivindicación 1, en el que la neuropatía periférica se produce por vinblastina, vincristina o una mezcla de las mismas.

3. El uso según la reivindicación 1 ó 2, en el que la quimera IL6R/IL6 o muteína de la misma está glucosilada en uno

o más sitios.

4. El uso según la reivindicación 1 ó 2, en el que la quimera IL6R/IL6 o muteína de la misma no está glucosilada.

5. El uso según cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en el que la muteína comprende al menos un resto unido a uno o más grupos funcionales.

6. El uso según la reivindicación 5, en el que el resto es un resto de polietileno.

7. El uso según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, en el que el medicamento comprende una célula que expresa una quimera IL6R/IL6 o una muteína de la misma.

8. El uso según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, en el que el medicamento comprende un vector de expresión que comprende la secuencia codificante de una quimera IL6R/IL6 o muteína de la misma.

9. El uso según la reivindicación 8, en el que el vector es un vector lentiviral.

10. El uso de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, en el que el medicamento comprende opcionalmente un vehículo farmacéuticamente aceptable.

11. El uso de la reivindicación 10, en el que el paciente es un paciente de alto riesgo seleccionado de pacientes que padecen diabetes, SIDA, neuropatías hereditarias y pacientes sometidos a tratamiento temprano con fármacos neurotóxicos.

12. El uso de cualquiera de las reivindicaciones 10 a 11, en el que la vía de administración del medicamento está seleccionada de intrahepática, intradérmica, intraplantar, transdérmica, intramuscular, intraperitoneal, intravenosa, subcutánea, oral, epidural, tópica e intranasal.

13. Uso de una quimera IL6R/IL6 o una muteína de la misma, opcionalmente junto con un vehículo farmacéuticamente aceptable, en la fabricación de un medicamento para aumentar la dosis de un agente quimioterapéutico en un paciente, en el que el agente de quimioterapia es un alcaloide de la vinca, y adicionalmente en el que la muteína tiene una secuencia de aminoácidos derivada de la secuencia de aminoácidos de la quimera IL6R/IL6 por deleción o sustitución de uno o más residuos de aminoácidos de los componentes que se producen naturalmente de la quimera IL6R/IL6 o mediante la adición de uno o más residuos de aminoácidos a la secuencia original de la quimera IL6R/IL6 y es capaz de unirse a gp130.

14. El uso según la reivindicación 13, en el que el medicamento se administra tanto antes, durante como después del agente de quimioterapia.

15. Una composición farmacéutica que comprende una combinación de una quimera IL6R/IL6 o una muteína de la misma y un agente quimioterapéutico en la que el agente de quimioterapia es un alcaloide de la vinca, y adicionalmente en la que la muteína tiene una secuencia de aminoácidos derivada de la secuencia de aminoácidos de la quimera IL6R/IL6 por deleción o sustitución de uno o más residuos de aminoácidos de los componentes que se producen naturalmente de la quimera IL6R/IL6 o mediante la adición de uno o más residuos de aminoácidos a la secuencia original de la quimera IL6R/IL6 y es capaz de unirse a gp130.

16. La composición farmacéutica según la reivindicación 15, en la que el alcaloide de la vinca está seleccionado de vinblastina, vincristina o una mezcla de las mismas.

17. La composición farmacéutica según la reivindicación 15 ó 16, que comprende además un fármaco adicional seleccionado de antioxidantes, inhibidores de PKC y agentes neuroprotectores.

18. La composición farmacéutica según la reivindicación 17, en la que el fármaco adicional está seleccionado de glutamato, piridoxina, ácido gamma-linoleico, vitamina B1, vitamina B2, isoaxonina, gangliósido y NGF.

19. Una quimera IL6R/IL6, o una muteína de la misma, para su uso en la prevención y/o tratamiento de neuropatía periférica inducida por quimioterapia (NPIQ) , en la que el agente de quimioterapia es un alcaloide de la vinca, y adicionalmente en la que la muteína tiene una secuencia de aminoácidos derivada de la secuencia de aminoácidos de la quimera IL6R/IL6 por deleción o sustitución de uno o más residuos de aminoácidos de los componentes que se

producen naturalmente de la quimera IL6R/IL6 o mediante la adición de uno o más residuos de aminoácidos a la secuencia original de la quimera IL6R/IL6 y es capaz de unirse a gp130.

20. Una quimera IL6R/IL6, o una muteína de la misma, para su uso en aumentar la dosis de un agente quimioterapéutico en un paciente, en la que el agente de quimioterapia es un alcaloide de la vinca, y adicionalmente en la que la muteína tiene una secuencia de aminoácidos derivada de la secuencia de aminoácidos de la quimera IL6R/IL6 por deleción, inserción, adición de aminoácidos o sustitución de uno o más residuos de aminoácidos de los componentes que se producen naturalmente de la quimera IL6R/IL6 o mediante la adición de uno o más residuos de aminoácidos a la secuencia original de la quimera IL6R/IL6 y es capaz de unirse a gp130.