Derivados de ácido fenilacético como moduladores de inflamación.

Compuesto de la siguiente fórmula I

y sales del mismo

en la que

R1 es alquilo o cicloalquilo;

R2 es halo, alquilo, haloalquilo, alcoxilo, haloalcoxilo o cicloalquilo; y

X es cloro o fluoro,

en la que el alquilo o cicloalquilo puede estar sustituido con un grupo seleccionado de: -OR', ≥O, ≥NR', ≥N OR', -NR'R", -SR', halógeno, -SiR'R"R"', -OC(O)R', -C(O)R', -CO2R', -CONR'R", -OC(O)NR'R", -NR"C(O)R', -NR'-C(O)NR"R"', -NR'-SO2NR"R"', -NR"CO2R', -NH-C(NH2)≥NH, -NR'C(NH2)≥NH, -NH-C(NH2)≥NR', - S(O)R', -SO2R', -SO2NR'R", -NR"SO2R, -CN y -NO2, en un número que oscila entre cero y tres, en los que R', R" y R"' se refieren cada uno independientemente a hidrógeno, alquilo y heteroalquilo (C1-C8) no sustituido, arilo no sustituido, arilo sustituido con de uno a tres halógenos, grupos alquilo, alcoxilo o tioalcoxilo no sustituidos o grupos aril-alquilo (C1-C4), y en los que, cuando R' y R" se unen al mismo átomo de nitrógeno, pueden combinarse con el átomo de nitrógeno para formar un anillo de 5, 6 ó 7 miembros.

Derivados de ïcido fenilacïtico como moduladores de inflamaciïn Los receptores acoplados a proteïnas G desempeïan importantes papeles en diversos procesos de seïalizaciïn, incluyendo los implicados en mecanismos de defensa del huïsped. Las respuestas inmunitarias a enfermedades infecciosas, lesiïn, tumores y trasplante de ïrganos y en enfermedades y estados tales como asma, alergia, artritis reumatoide y neoplasia se han relacionado con la regulaciïn de GPCR. Respuestas inmunitarias exageradas o mal dirigidas son responsables de muchas enfermedades inflamatorias y de hipersensibilidad que, si se dejan sin tratar, pueden dar como resultado daïo de tejidos u ïrganos, dolor y/o pïrdida de funciïn. La inflamaciïn de tejidos estï enormemente implicada en la patogenia de tales enfermedades, de las que el asma y las enfermedades alïrgicas se encuentran entre las mejor caracterizadas. Los mecanismos subyacentes a la inflamaciïn y la hiperreactividad de las vïas respiratorias son similares a los subyacentes a la inflamaciïn alïrgica en otros tejidos, tales como la piel y el intestino.

Las prostaglandinas son mediadores inflamatorios derivados de lïpidos que reclutan macrïfagos, cïlulas T, eosinïfilos, basïfilos y neutrïfilos de sangre perifïrica a tejidos daïados o inflamados. Ademïs, las prostaglandinas pueden, dependiendo del tipo de cïlula diana, inducir o inhibir la movilizaciïn de Ca2+ intracelular, la producciïn de AMPc, la agregaciïn de plaquetas, la agregaciïn de leucocitos, la proliferaciïn de cïlulas T, la migraciïn de linfocitos y la quimiotaxia de cïlulas Th2, la secreciïn de IL-1a e IL-2 y la contracciïn del mïsculo liso vascular y avascular en cïlulas que responden. Las prostaglandinas se han implicado en la fiebre, diversas enfermedades alïrgicas, relajaciïn del mïsculo liso vascular y avascular, percepciïn de dolor, sueïo, agregaciïn de plaquetas y procesos reproductivos. Las prostaglandinas ejercen sus efectos interaccionando con GPCR especïficos.

La prostaglandina D2 (PGD2) es el principal mediador inflamatorio liberado por mastocitos activados, que se encuentran normalmente cerca de las superficies de la piel, membranas mucosas y vasos sanguïneos, tras la exposiciïn inmunolïgica (Lewis et al. (1982) J. Immunol. 129:1627-1631) . Durante asma y respuestas alïrgicas, se libera PGD2 en grandes cantidades. El papel de PGD2 en el inicio y el mantenimiento de la inflamaciïn alïrgica se ha establecido bien en modelos de ratïn de asma. Por ejemplo, se ha demostrado que la sobreproducciïn de PGD2 in vivo por PGD2 sintasa agrava la inflamaciïn de las vïas respiratorias en un modelo de ratïn de asma (Fujitani et al. (2002) J. Immunol. 168:443-449) .

Se ha identificado un receptor selectivo de PGD2, designado como DP, (Boie et al. (1995) J. Biol. Chem. 270:1891018916) . En seres humanos, DP se expresa en mïsculo liso, plaquetas, intestino delgado y cerebro, y su expresiïn en epitelio pulmonar se induce mediante la exposiciïn alïrgica. La activaciïn del receptor induce la producciïn de AMPc y la movilizaciïn de Ca2+ intracelular, y se cree que inhibe la agregaciïn de plaquetas y la migraciïn celular e induce la relajaciïn de diversos mïsculos lisos. DP se acopla principalmente a la proteïna Gas.

Significativamente, en un modelo de asma inducido por OVA, ratones DP-/-mostraron sïntomas de asma reducidos, por ejemplo, infiltraciïn celular reducida de eosinïfilos y linfocitos en lïquido BAL, niveles reducidos de citocinas Th2 en lïquido BAL e hiperreactividad reducida de las vïas respiratorias debida a acetilcolina (Matsuoka et al. (2002) Science 287:2013-2019) . La infiltraciïn celular aumentada en tejido pulmonar y secreciïn mucosa por cïlulas epiteliales de las vïas respiratorias caracterïsticas de asma en seres humanos y observada en ratones silvestres no se observï en ratones deficientes en DP.

Recientemente, se ha identificado un receptor selectivo de PGD2 adicional, designado como molïcula homïloga al receptor quimioatrayente expresada en cïlulas Th2, o CRTH2 (Hirai et al. (2001) J. Exp. Med. 193 (2) :255-261) . El receptor se denominaba previamente GPR44 o DL1R. Entre los linfocitos T de sangre perifïrica, CRTH2 humana se expresa selectivamente en cïlulas Th2, y se expresa altamente en tipos de cïlula asociados con la inflamaciïn alïrgica tales como eosinïfilos, basïfilos y cïlulas Th2. Se ha mostrado que la activaciïn de CRTH2 induce la movilizaciïn de Ca2+ intracelular y la infiltraciïn de cïlulas Th2, eosinïfilos y basïfilos.

El anïlisis de la secuencia de proteïna indica que CRTH2 no tiene una homologïa significativa con DP, sino que mïs bien, se refiere a miembros de la subfamilia de receptores de N-formil-pïptidos (FPR) (Nagata et al. (1999) J. Immunol. 162:1278-1286) . A diferencia de DP, CRTH2 ha mostrado que se acopla principalmente con la proteïna Gai.

Estas observaciones sugieren que CRTH2 y DP pueden funcionar independientemente para regular aspectos de la inflamaciïn alïrgica.

La incidencia creciente de asma, enfermedades alïrgicas y enfermedades inmunolïgicas a nivel mundial subraya la necesidad de nuevas terapias para tratar o prevenir eficazmente estas enfermedades. El descubrimiento de pequeïas molïculas que modulan CRTH2 y/o uno o mïs de otros receptores de PGD2 es ïtil para el estudio de procesos fisiolïgicos mediados por CRTH2 y/o uno o mïs de otros receptores de PGD2 y el desarrollo de agentes terapïuticos para asma, enfermedades alïrgicas y otras enfermedades inmunolïgicas. Se describen compuestos novedosos que presentan tal actividad deseable en el presente documento.

El documento WO 04/058164 da a conocer determinados compuestos de ïcido carboxïlico sustituidos con arilsulfonamida como moduladores de asma y de la inflamaciïn alïrgica. De la clase de compuestos dados a conocer en el documento WO 04/058164, se seleccionï AMG 009 como el compuesto mïs preferido para avanzar en los ensayos clïnicos. Se proporciona a continuaciïn la estructura de AMG 009.

Cuando se sometieron a prueba en el modelo de respuesta de vïas respiratorias de oveja, tal como se describe en Can J Physiol Pharmacol 1995; 73:191, AMG 009 (1) inhibe la respuesta tardïa de las vïas respiratorias (LAR, late airway response) inducida por antïgeno; (2) bloquea el desarrollo de hiperreactividad de las vïas respiratorias (AHR, airway hyper-reactivity) inducida por antïgeno frente a carbacol; y (3) bloqueï el reclutamiento inducido por alïrgeno de cïlulas inflamatorias al pulmïn (BAL) (vïanse las figuras 1, 2 y 3, respectivamente) .

El desarrollo de AMG 009 se suspendiï tras observarse aumentos no previstos en los niveles de ALT/AST hepïticas en voluntarios sanos que habïan recibido AMG 009. No estaban previstos cambios en la funciïn hepïtica a partir de los estudios de seguridad preclïnicos con AMG 009. Estudios de metabolismo in vitro revelaron que AMG 009 puede activarse metabïlicamente para dar productos intermedios reactivos quïmicamente que pueden formar aductos covalentes con proteïnas. La propensiïn del metabolismo de AMG 009 para generar metabolitos reactivos se llevï a cabo en estudios para evaluar la uniïn covalente in vitro a proteïna mediante mïtodos normalizados (Day, et al., J. Pharmacol. Toxicol. Methods., 52, 278-285 (2005) ) . Estos estudios mostraron que equivalentes radiactivos de [14C]AMG 009 se unieron covalentemente a proteïna tras incubaciones con microsomas de hïgado de rata y humano en presencia del cofactor NADPH a un nivel de ~50 equivalentes de pmol/mg de proteïna. La uniïn covalente de [14C]AMG 009 a proteïna en microsomas fue en el mismo intervalo que un punto de corte objetivo para la uniïn covalente aceptable en microsomas (50 equivalentes de pmol/mg de proteïna) tal como se notifica en la bibliografïa (Evans, et al. Chem. Res. Toxicol., 17, 3-16 (2004) ) .

El nïmero de uniones covalentes objetivo de 50 equivalentes de pmol del residuo de fïrmaco por mg de proteïna es un valor de uniones covalentes objetivo, pero no es un umbral. El nïmero de 50 equivalentes de pmol del residuo de fïrmaco/mg de proteïna no se dedujo arbitrariamente, sino que procedïa de una bïsqueda meticulosa en la bibliografïa de los niveles de uniïn covalente a proteïnas hepïticas en animales a los que se les dosificaron hepatotoxinas conocidas, por ejemplo bromobenceno (Monks, T. J. et al., (1982) Life Sci., 30, 841-848) , isoniazida (Nelson, S.D. et al, (1978) J. Pharmacol. Exp. Ther., 206, 574-585) , y paracetamol (Matthews, A.M. et al, (1997) Toxicol. Lett., 90, 77-82) , en condiciones en las que estos fïrmacos indujeron hepatotoxicidad (Evans, D.C. et al, (2004 Chem. Res. Toxicol., 17, 3-16) .

Cuando se midieron los valores de uniïn covalente... [Seguir leyendo]

1. Compuesto de la siguiente fïrmula I

y sales del mismo en la que R1 es alquilo o cicloalquilo;

R2 es halo, alquilo, haloalquilo, alcoxilo, haloalcoxilo o cicloalquilo; y

X es cloro o fluoro,

en la que el alquilo o cicloalquilo puede estar sustituido con un grupo seleccionado de: -OR’, =O, =NR’, =N

OR’, -NR’R”, -SR’, halïgeno, -SiR’R”R”’, -OC (O) R’, -C (O) R’, -CO2R’, -CONR’R”, -OC (O) NR’R”, -NR”C (O) R’, -NR’-C (O) NR”R”’, -NR’-SO2NR”R”’, -NR”CO2R’, -NH-C (NH2) =NH, -NR’C (NH2) =NH, -NH-C (NH2) =NR’, -S (O) R’, -SO2R’, -SO2NR’R”, -NR”SO2R, -CN y –NO2, en un nïmero que oscila entre cero y tres, en los que R’, R” y R”’ se refieren cada uno independientemente a hidrïgeno, alquilo y heteroalquilo (C1-C8) no sustituido, arilo no sustituido, arilo sustituido con de uno a tres halïgenos, grupos alquilo, alcoxilo o tioalcoxilo no sustituidos o grupos aril-alquilo (C1-C4) , y en los que, cuando R’ y R” se unen al mismo ïtomo de nitrïgeno, pueden combinarse con el ïtomo de nitrïgeno para formar un anillo de 5, 6 ï 7 miembros.

2. Compuesto segïn la reivindicaciïn 1, en el que X es cloro.

3. Compuesto segïn la reivindicaciïn 1, en el que R1 es alquilo.

4. Compuesto segïn la reivindicaciïn 3, en el que R1 es t-butilo.

5. Compuesto segïn la reivindicaciïn 1, en el que R2 es cicloalquilo.

6. Compuesto segïn la reivindicaciïn 5, en el que R2 es ciclopropilo.

7. Compuesto segïn la reivindicaciïn 1, seleccionado de

y sales del mismo.

8. Compuesto segïn la reivindicaciïn 7, seleccionado de y sales del mismo.

9. Compuesto segïn la reivindicaciïn 8, en el que dicho compuesto es el ïcido libre de la forma II anhidra que tiene una ïnica transiciïn tïrmica cuando se analiza usando DSC, siendo dicha ïnica transiciïn tïrmica una transiciïn endotïrmica a 203ïC.

10. Compuesto segïn la reivindicaciïn 9, en el que dicha ïnica transiciïn tïrmica es una transiciïn 10 endotïrmica a 203, 22ïC.

11. Compuesto segïn la reivindicaciïn 8, en el que dicho compuesto es el ïcido libre de la forma II anhidra que tiene un patrïn de difracciïn de rayos X de polvo que comprende un pico caracterïstico en tïrminos de 2-theta a 19, 2.

12. Compuesto segïn la reivindicaciïn 11, que tiene un patrïn de difracciïn de rayos X de polvo que 15 comprende ademïs un pico caracterïstico en tïrminos de 2-theta a 9, 5.

13. Compuesto segïn la reivindicaciïn 12, que tiene un patrïn de difracciïn de rayos X de polvo que comprende ademïs picos caracterïsticos en tïrminos de 2-theta a 22, 0, 20, 2, 17, 2 y 16, 6.

14. Compuesto segïn la reivindicaciïn 13, que tiene un patrïn de difracciïn de rayos X de polvo que comprende picos caracterïsticos en tïrminos de 2-theta, tal como se expone en la siguiente figura 8, que incluye la presentaciïn como tabla de los datos de rayos X de polvo

Espectros de difracciïn de rayos X de polvo para el polimorfo de forma II anhidra del compuesto de ejemplo 14

Presentaciïn en forma de tabla de los datos de rayos X de polvo

2-theta Intensidad (%) Tipo de pico p =primario s = secundario

19, 2 100 p

9, 5 95, 64 p

22, 0 73, 31 p

20, 2 56, 38 p

17, 2 52, 51 p

16, 6 50, 67 p

13, 4 45, 10 p

14, 8 42, 35 p

6, 7 41, 61 p

15, 1 37, 44 p

12, 2 28, 21 s

19, 8 24, 37 s

10, 1 23, 45 s

8, 3 12, 52 s

15. Composiciïn farmacïutica que comprende un compuesto segïn la reivindicaciïn 1 y un vehïculo, adyuvante o diluyente farmacïuticamente aceptable.

16. Compuesto segïn la reivindicaciïn 1, para su uso en el tratamiento de asma, EPOC, rinitis alïrgica o

dermatitis.

17. Uso de un compuesto segïn la reivindicaciïn 1, para la preparaciïn de un medicamento para tratar asma, EPOC, rinitis alïrgica o dermatitis.

18. Procedimiento para fabricar un compuesto de fïrmula II

en la que R1 es t-butilo; R2 es alquilo, haloalquilo, alcoxilo, haloalcoxilo o cicloalquilo; y X es cloro o fluoro;

que comprende la etapa de poner en contacto un compuesto de fïrmula A

en la que R3 es cloro, bromo, yodo, -OS (O) 2-alquilo o -OS (O) 2-arilo; con un compuesto de fïrmula B

en presencia de a) un catalizador de metal de transiciïn; y b) una base;

para formar un compuesto de fïrmula C

en la que el alquilo o cicloalquilo puede estar sustituido con un grupo seleccionado de: -OR’, =O, =NR’, =N-OR’, -NR’R”, -SR’, halïgeno, -SiR’R”R”’, -OC (O) R’, -C (O) R’, -CO2R’, -CONR’R”, -OC (O) NR’R”, -NR”C (O) R’, -NR’-C (O) NR”R”’, -NR’-SO2NR”R”’, -NR”CO2R’, -NH-C (NH2) =NH, -NR’C (NH2) =NH, -NH-C (NH2) =NR’,

S (O) R’, -SO2R’, -SO2NR’R”, -NR”SO2R, -CN y –NO2, en un nïmero que oscila entre cero y tres, en los que R’, R” y R”’ se refieren cada uno independientemente a hidrïgeno, alquilo y heteroalquilo (C1-C8) no sustituido, arilo no sustituido, arilo sustituido con de uno a tres halïgenos, grupos alquilo, alcoxilo o tioalcoxilo no sustituidos o grupos aril-alquilo (C1-C4) , y en los que, cuando R’ y R” se unen al mismo ïtomo de nitrïgeno, pueden combinarse con el ïtomo de nitrïgeno para formar un anillo de 5, 6 ï 7 miembros.

19. Procedimiento segïn la reivindicaciïn 18, en el que el metal de transiciïn comprende paladio.

20. Procedimiento segïn la reivindicaciïn 19, en el que la fuente de paladio se selecciona de (T3-C3H5) 2Pd2Cl2, Pd2 (dba) 3, Pd/C, PdCl2, Pd (OAc) 2, (CH3CN) 2PdCl2, Pd[P (C6H5) 3]4, y Pd (dba) 2.

21. Procedimiento segïn la reivindicaciïn 20, en el que el catalizador de metal de transiciïn comprende el ligando t-butil-2-di-tercbutilfosfino-2’, 4’, 6’-triisopropil-1, 1’-bifenilo.

22. Procedimiento segïn la reivindicaciïn 18, en el que el compuesto de fïrmula C se pone en contacto ademïs con un compuesto de fïrmula D

R1-O-C (=O) -alquilo D

en presencia de un ïcido para formar un compuesto de fïrmula E

en el que el compuesto de fïrmula E se hidroliza posteriormente para formar un compuesto de fïrmula II.

23. Procedimiento segïn la reivindicaciïn 18, en el que el compuesto de fïrmula A se prepara poniendo en contacto un compuesto de fïrmula F

con un compuesto de fïrmula G

en la que R4 es halïgeno u OTs; en presencia de una base.

24. Procedimiento segïn la reivindicaciïn 18, en el que el compuesto de fïrmula B se prepara mediante un procedimiento que comprende la etapa de poner en contacto un compuesto de fïrmula H

con un compuesto seleccionado de R2-BY y R2-M-X1

en los que Y es - (OR) 2, -F3-oR’2;

R es independientemente H, alquilo, arilo o arilalquilo;

o los dos grupos R pueden combinarse para formar pinacol o catecol;

R’ es alquilo, o los dos grupos R’ pueden combinarse para formar 9-borabiciclononano (9-BBN) ;

MesZn oMg; y

X1 es Cl, Br o I;

en presencia de un a) un catalizador de metal de transiciïn; y 10 b) una base; para formar un compuesto de fïrmula J

25. Procedimiento segïn la reivindicaciïn 24, en el que el metal de transiciïn comprende paladio.

26. Procedimiento segïn la reivindicaciïn 25, en el que la fuente de paladio se selecciona de (T3-C3H5) 2Pd2Cl2, 15 Pd2 (dba) 3, Pd/C, PdCl2, Pd (OAc) 2, (CH3CN) 2PdCl2, Pd[P (C6H5) 3]4, y Pd (dba) 2.

27. Procedimiento segïn la reivindicaciïn 26, en el que el catalizador de metal de transiciïn comprende un ligando seleccionado de triarilfosfinas y trialquilfosfinas.

28. Procedimiento segïn la reivindicaciïn 24, en el que el compuesto de fïrmula J se trata posteriormente con ïcido para formar un compuesto de fïrmula B.

29. Procedimiento segïn la reivindicaciïn 23, en el que el compuesto de fïrmula F se prepara mediante un procedimiento que comprende poner en contacto un compuesto de fïrmula K

en la que R5 es CN, -C (=O) OH o -C (=O) O-alquilo con cualquiera de

(1) yoduro de hidrïgeno acuoso o una sal de yoduro de metal en presencia de un ïcido fuerte; o

(2) un reductor en presencia de un ïcido.

30. Compuesto segïn la reivindicaciïn 1, en el que el compuesto tiene una fïrmula II

y en el que el compuesto se prepara mediante el procedimiento segïn la reivindicaciïn 22 en la que R1 es t-butilo; R2 es alquilo, haloalquilo, alcoxilo, haloalcoxilo o cicloalquilo; y X es cloro o fluoro.

31. Producto intermedio de fïrmula C

en la que R2 es alquilo, haloalquilo, alcoxilo, haloalcoxilo o cicloalquilo; y

X es cloro o fluoro, y

en la que el alquilo o cicloalquilo puede estar sustituido con un grupo seleccionado de: -OR’, =O, =NR’, =N-OR’, -NR’R”, -SR’, halïgeno, -SiR’R”R”’, -OC (O) R’, -C (O) R’, -CO2R’, -CONR’R”, -OC (O) NR’R”, -NR”C (O) R’, -NR’-C (O) NR”R”’, -NR’-SO2NR”R”’, -NR”CO2R’, -NH-C (NH2) =NH, -NR’C (NH2) =NH, -NH-C (NH2) =NR’,

S (O) R’, -SO2R’, -SO2NR’R”, -NR”SO2R, -CN y –NO2, en un nïmero que oscila entre cero y tres, en los que R’, R” y R”’ se refieren cada uno independientemente a hidrïgeno, alquilo y heteroalquilo (C1-C8) no sustituido, arilo no sustituido, arilo sustituido con de uno a tres halïgenos, grupos alquilo, alcoxilo o tioalcoxilo no sustituidos o grupos aril-alquilo (C1-C4) , y en los que, cuando R’ y R” se unen al mismo ïtomo de nitrïgeno, pueden combinarse con el ïtomo de nitrïgeno para formar un anillo de 5, 6 ï 7 miembros.